郭娇
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
- 供职机构：北京协和医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生理学化学工程更多>>
- 原子精度Ag团簇酶的催化活性及辐射防护作用研究
- 背景:高能电离射线（X射线和γ射线）被广泛应用于临床诊断和放射治疗。然而,在诊疗过程中,高能电离辐射也会不可避免地对正常组织造成损伤。因此,开发高效、低毒的理想辐射防护剂一直是辐射领域内的重要研究课题。原子精度的金属团簇...
- 郭娇
- 关键词：辐射防护
- RNA氧化与线虫衰老的相关性研究
- 研究目的：探究RNA氧化与线虫生命周期的相关性。 研究内容：研究线虫NDX-4蛋白的体外酶学活性;建立RNA氧化水平增加的线虫模型;观察RNA氧化水平增加后线虫生命周期的改变,初步探讨可能机制。 研究方法：体...
- 郭娇
- 关键词：衰老
- 秀丽隐杆线虫NDX-4蛋白的体外表达及酶学活性研究
- 2014年
- 目的构建秀丽隐杆线虫NDX-4基因的克隆载体和表达载体,诱导NDX-4蛋白表达,研究NDX-4的体外酶学活性。方法构建NDX-4的克隆载体,将NDX-4的开放阅读框架(ORF)插入PGEM-T载体中扩增;采用双酶切将NDX-4ORF连入表达载体pET-30a(+)中;将连接质粒转入BL21(DE3)感受态细胞后,用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)对NDX-4蛋白进行表达诱导,并进行树脂纯化;用SDS-PAGE和Western blot检测以评价NDX-4体外表达和纯化的质量;采用高效液相色谱-紫外检测技术(HPLC-UV)检测NDX-4蛋白水解8-oxodGTP和8-oxoGTP的活性。结果 SDS-PAGE和Western blot检测均在经IPTG诱导的蛋白提纯物泳道上出现单一条带,分子质量约为24kDa,而未诱导的和空载体均未见条带。HPLC-UV检测结果显示加入NDX-4蛋白的8-oxodGTP和8-oxoGTP均被水解为相应的单磷酸和二磷酸氧化核苷,并且随着蛋白量的增加,两种产物的量逐渐增多。结论秀丽隐杆线虫的NDX-4蛋白具有水解8-oxodGTP和8-oxoGTP的双重功能,可能对抑制DNA和RNA的氧化损伤具有重要意义。
- 郭娇徐新民干伟史飞钱建畅周晓阳蔡剑平
- 关键词：HPLC-UV酶活性
