- 2005年至2008年全国HLA低分辨基因分型检测室间质量评价结果分析被引量：3
- 2009年
- 目的 总结并分析2005年至2008年全国医院临床实验室HLA低分辨基因分型检测室间质量评价（EQA）结果，为进一步提高临床实验室HLA基因分型检测水平提供有价值的参考。方法根据HLA低分辨基因分型检测的特点，用常规统计方法归纳了连续4年EQA活动的结果，分析了近4年EQA活动中回报结果的错误率以及导致错误结果的可能原因。结果2005年至2008年，参与HTJA低分辨基因分型检测EQA项目的临床实验室从22家增加到61家；连续4年EQA活动中回报数据共计2844份，总体错误率为1．05％（30／2844）；每年出现错误的实验室比率分别为13．6％（3／22）、10．7％（3／28）、10．6％（5／47）、16．4％（10／61）；连续4年EQA活动中错误数据共计30份，错误类型主要包括HIA基因分型错误25份、人为错误5份。结论目前我国临床实验室HLA低分辨基因分型检测错误的比例过高；由于错误类型以基因分型错误和人为错误为主，反映了从业人员在HLA基因分型技术上存在不容忽视的问题。
- 黑爱莲周晓阳肖尧戴大鹏蔡剑平
- 关键词：人白细胞抗原基因型组织相容性试验
- 2009-2014年全国HLA低分辨基因分型检测室间质量评价结果分析被引量：3
- 2015年
- 目的为进一步提高全国临床实验室人类白细胞抗原(HLA)基因分型检测水平提供有价值的参考。方法利用常规统计方法归纳总结2009-2014年全国医疗机构和商业临床实验室HLA低分辨基因分型检测室间质量评价(EQA)结果,分析在连续6年的EQA活动中,回报结果的错误率、错误类型以及导致错误结果的原因。结果2009-2014年全国参加HLA低分辨基因分型检测EQA项目的临床实验室数目从63家增至83家;在连续6年EQA活动中,回报HLA分型数据共计7 836份,总体错误率为2.12%(166/7836);2009-2014年每年出现错误的实验室比例分别为1.59%(1/63)、11.48%(7/61)、0.00%(0/69)、2.74%(2/73)、2.82%(2/71)、10.84%(9/83);连续6年EQA活动中错误数据共计166份,主要包括HLA基因分型错误23份、血清型和基因型混淆错误14份、录入错误108份,漏报错误21份。结论目前我国临床实验室HLA低分辨基因分型整体检测水平仍不容乐观,错误比例过高;反映了从业人员在HLA基因分型技术上和规范化管理上存在不容忽视的问题。
- 黑爱莲周晓阳蔡剑平
- 秀丽隐杆线虫NDX-4蛋白的体外表达及酶学活性研究
- 2014年
- 目的构建秀丽隐杆线虫NDX-4基因的克隆载体和表达载体,诱导NDX-4蛋白表达,研究NDX-4的体外酶学活性。方法构建NDX-4的克隆载体,将NDX-4的开放阅读框架(ORF)插入PGEM-T载体中扩增;采用双酶切将NDX-4ORF连入表达载体pET-30a(+)中;将连接质粒转入BL21(DE3)感受态细胞后,用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)对NDX-4蛋白进行表达诱导,并进行树脂纯化;用SDS-PAGE和Western blot检测以评价NDX-4体外表达和纯化的质量;采用高效液相色谱-紫外检测技术(HPLC-UV)检测NDX-4蛋白水解8-oxodGTP和8-oxoGTP的活性。结果 SDS-PAGE和Western blot检测均在经IPTG诱导的蛋白提纯物泳道上出现单一条带,分子质量约为24kDa,而未诱导的和空载体均未见条带。HPLC-UV检测结果显示加入NDX-4蛋白的8-oxodGTP和8-oxoGTP均被水解为相应的单磷酸和二磷酸氧化核苷,并且随着蛋白量的增加,两种产物的量逐渐增多。结论秀丽隐杆线虫的NDX-4蛋白具有水解8-oxodGTP和8-oxoGTP的双重功能,可能对抑制DNA和RNA的氧化损伤具有重要意义。
- 郭娇徐新民干伟史飞钱建畅周晓阳蔡剑平
- 关键词：HPLC-UV酶活性
