张稷
- 作品数:8 被引量:13H指数:3
- 供职机构:苏州大学更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 心肌营养素1分子的克隆及其反转录病毒载体的构建
- 2007年
- 实验于2005-10/2006-06在江苏省干细胞重点实验室进行。体外分离培养新生SD大鼠心室肌细胞2周后,Trizol法抽提细胞总RNA,RT-PCR获得心肌营养素1基因,与克隆载体PMD18-T-Vector连接,转化TOP10感受态细菌,阳性克隆经鉴定正确后,PCR扩增心肌营养素1基因,EcoRI和BamHI双酶切,T4DNA连接酶连接,构建pEGZ-CT-1的反转录病毒载体。经PCR及酶切鉴定,测序表明心肌营养素1基因成功插入pEGZ-Term载体。pEGZ-CT-1载体的构建,为转基因细胞的制备和移植治疗心肌梗死奠定了基础。
- 吕海军张学光王如兴陈永井张稷杨丽华李肖蓉
- 关键词:心室肌细胞心肌营养素1反转录病毒
- 骨髓间充质干细胞向心肌细胞的诱导分化及心肌梗死治疗的实验研究
- 目的:骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)是造血基质细胞的祖先细胞,在特定条件下可向成骨细胞、成软骨细胞、肌腱、脂肪细胞、血管内皮细胞及神经细胞样细胞分化,且易于获得及扩增,是细胞替代治...
- 张稷
- 关键词:骨髓间充质干细胞诱导分化心肌细胞心肌梗死
- 文献传递
- 经静脉移植人脐血间充质干细胞在鼠损伤脊髓的表达及神经功能修复被引量:3
- 2007年
- 目的:采用Brdu免疫组化标记技术观察经静脉移植人脐血间充质干细胞进入损伤脊髓组织的表达情况,探讨其促进损伤脊髓神经功能恢复的作用。方法:实验于2003-10/2005-03在苏州大学生物技术研究所干细胞实验室完成。①选取健康成年Wistar大鼠60只,随机数字表法分为假手术组、模型对照组、干细胞移植组,20只/组。脐血标本来自苏州大学附属第一医院产科,产妇及其家属均签署知情同意书。②自脐带抽取新鲜脐带血50~60mL,分离培养人脐血间充质干细胞,调整细胞浓度为5×109L-1待用。在细胞移植前48h,体外进行Brdu标记。③模型对照组、干细胞移植组大鼠采用重物压迫法建立脊髓损伤模型。麻醉后取俯卧位,于T11节段处行背后方正中切口,剥离椎旁肌,咬除T11棘突及椎板,显露4mm×5mm硬脊膜,将55g重砝码放置于硬脊膜表面1min,然后逐层缝合伤口。假手术组仅显露硬脊膜,然后缝合伤口。④造模后5d,干细胞移植组大鼠自后肢大隐静脉缓缓注入人脐血间充质干细胞悬液0.2mL~0.3mL(1×106个)。模型对照组、假手术组给予等量生理盐水。⑤分别于细胞移植后1d、1,2,3周,采用BassoBeatlieBresnahan(BBB)评分法和斜板试验法测定各组神经功能情况。于细胞移植后1,3周制作冰冻切片,检测各组脊髓组织内脐血间充质干细胞的分布情况。结果:①神经功能检测结果:脊髓损伤细胞移植后3周内,模型对照组、干细胞移植组大鼠后肢运动功能均有所恢复,但干细胞移植组恢复较快,于术后1周BBB评分和斜板试验结果即明显优于模型对照组[(10.71±6.24),(5.13±3.36)分,t=2.39,P<0.05;(51.67±5.22),(46.63±3.72)度,t=3.39,P<0.01],并维持至术后3周[(17.29±4.03),(11.25±5.01)分,t=3.89,P<0.01;(65.77±8.06),(57.05±4.61)度,t=4.07,P<0.01]。②脊髓组织中人脐血干细胞的鉴定:假手术组、模型对照组脊髓组织中未见Brdu阳性表达区。干细胞移植�
- 张洪涛杨惠林曲静张稷孟斌张志刚唐天驷徐耀增姜为民
- 关键词:间质干细胞
- 骨髓间充质于细胞向心肌细胞的诱导分化及心肌梗死治疗的实验研究
- 张稷
- 关键词:诱导分化
- 体外诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的实验研究被引量:1
- 2007年
- 目的:采用5-氮胞苷(5-aza)诱导骨髓间充质干细胞(M SCs)为心肌样细胞,对比分析诱导细胞与正常心肌细胞表型的差异,从而分析5-aza的诱导效应。方法:分离培养大鼠骨髓M SCs,通过检测不同浓度的5-aza诱导后M SCs表面CD 45、CD 54、CD 90分子的表达并与正常心肌细胞表型进行比较,以观察5-aza对间充质干细胞体外分化诱导的影响和作用。结果:5-氮胞苷能有效地诱导间充质干细胞分化为心肌样细胞,诱导后的细胞表面均表达M H C和desm in分子。浓度为10μm ol/L的5-aza诱导组细胞表型更接近于心肌细胞。结论:M SCs在体外条件下经5-aza诱导可以分化为心肌样细胞,10μm ol/L的诱导浓度为最优浓度。
- 张稷吴家林范志海吕海军李肖蓉张学光
- 关键词:骨髓间充质干细胞心肌细胞分化
- 呼吸机依赖受体肺移植术后撤机策略探讨(附6例报告)被引量:4
- 2007年
- 目的:探讨呼吸机依赖的终末期肺病受体肺移植术后机械通气撤离的条件、时机、技术方案。方法:通过回顾2002年9月~2006年6月间共6例呼吸机依赖受体的临床资料,并结合有关文献进行分析。结果:6例呼吸机依赖受体肺移植术后平均13.5天成功撤机,术后随访时间1 ̄4年,平均生存期(21.33±3.48)个月。结论:控制感染、气道管理、强化营养、前列腺素E1应用、呼吸肌锻炼、序贯通气、心理护理等是提高撤机成功率的重要保证。
- 何毅军朱艳红陈静瑜吴波郑明峰张稷
- 关键词:肺移植机械通气
- 人脐血MSCs的分离培养及向神经的诱导分化被引量:3
- 2006年
- 目的探讨人脐血中分离所得到间充质干细胞(MSCs)向神经组织细胞诱导分化的实验条件。方法淋巴细胞分离液分离正常人脐血单个核细胞,利用差速消化法通过多次传代得到MSCs,流式细胞仪测定细胞表型。取2至4代的MSCs加入含有维甲酸(RA)与神经生长因子(NGF)的诱导分化培养基将其定向诱导,免疫细胞化学染色检测诱导后的MSCs神经元和神经胶质细胞标志的表达。结果脐血MSCs每传一代,细胞数量增加约2~3倍。流式细胞仪检测,脐血MSCs不表达CD34,表达CD25、CD29、CD105、CD106。诱导后的细胞不仅形态类似神经元和神经胶质细胞,而且表达神经丝蛋白200(NF)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)。结论从人脐血中可以分离得到与骨髓相似的MSCs,并且能够在体外分化为神经元样和神经胶质细胞样细胞。
- 曲静张稷於葛华孙万平张洪涛惠国桢张学光
- 关键词:人脐血间充质干细胞诱导分化神经元样细胞
- 蛋白质组分析技术在医学研究中的应用被引量:2
- 2005年
- 吴家林张稷
- 关键词:生物信息学质谱双向电泳