宋忆淑
- 作品数:23 被引量:22H指数:3
- 供职机构:吉林大学更多>>
- 发文基金:中国博士后科学基金吉林省自然科学基金长春市科技发展计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 新基因s-lap编码区的克隆及其重组表达质粒PHB/s-lap的构建被引量:2
- 2004年
- 目的 :克隆新基因 s- lap编码区序列并构建其重组表达质粒。方法 :利用逆转录聚合酶链反应 (RT-PCR )方法 ,以可见光损伤早期的培养的猪视网膜色素上皮 (RPE)细胞 ds c DNA为模板 ,扩增新基因 s- lap编码区序列 ;利用基因重组技术构建 PHB/ s- lap重组表达质粒。结果 :经测序证实获得了正确的新基因 s- lap编码区序列 ,酶切鉴定及 DNA序列分析表明已经将 s- lap基因编码区序列克隆到 PHB表达载体 ,成功地构建了 PHB/ s- lap重组表达质粒。结论 :成功地克隆了新基因 s- lap编码区序列 ,并构建了其重组表达质粒 PHB/ s- lap。
- 宋忆淑宋志宇费向东贺冰李玉新谭大鹏
- 关键词:克隆
- RPE细胞光损伤相关新基因s-lap编码区克隆及s-lap/GFP融合蛋白在B16黑色素瘤细胞中的表达与定位被引量:2
- 2005年
- 目的 克隆新基因s lap编码区序列 ,研究其编码的蛋白质在B16黑色素瘤细胞内的表达与定位。方法 分析s lapcDNA序列 ,建立视网膜色素上皮 (retinalpigmentep ithelium ,RPE)细胞光损伤模型 ,RT PCR克隆其编码区序列 ,构建了带有绿色荧光蛋白的目的基因真核表达重组质粒 pcDNA3 .1 GFP/s lap ,转染B16黑色素瘤细胞 ,观察s lap/GFP融合蛋白在B16黑色素瘤细胞内的表达与定位。结果 s lapcDNA序列含有编码10 1个氨基酸的开放读码框架 ,有 2个可能的N 糖基化位点 ,1个可能的caseinkinaseII磷酸化位点和 2个可能的PKC磷酸化位点 ;成功地克隆了s lap蛋白编码区序列 ,构建了其真核表达载体 ,荧光显微镜观察 ,在转染 pcDNA3 .1 GFP质粒的B16黑色素瘤细胞中 ,荧光呈网状分布于细胞浆内 ,而细胞核内低表达 ;在转染s lap/GFP融合基因的B16黑色素瘤细胞中 ,荧光均匀分布于整个细胞 ,尤其以细胞核内高表达。结论 新基因s lap编码的蛋白质可在B16黑色素瘤细胞中获得表达 ,并以细胞核内高表达。
- 宋忆淑李玉新费向东鲍永利谭大鹏
- 关键词:融合蛋白
- 单纯疱疹病毒Ⅰ型糖蛋白B基因疫苗的构建及细胞免疫学研究被引量:3
- 2005年
- 目的:构建、制备单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSVⅠ)糖蛋白BDNA疫苗,检测其诱导机体产生的细胞免疫应答。方法:PCR扩增编码HSVⅠgB去除N端部分信号肽序列(39bp)的基因片段(2673bp),定向插入pcDNA3载体中,构建pcDNA3gB基因疫苗并对其进行PCR、酶切及测序鉴定。于BALBc小鼠注射免疫3次,观察小鼠CD4+、CD8+T细胞亚群的变化,CFSEPI双标记的流式细胞计数法检测CTL活性。结果:双酶切分析结果为目的基因(2.7kb)和线性质粒pcDNA3(5.4kb);PCR扩增结果为特异产物(2.7kb);测序结果与GenBankgB基因序列同源性达99.5%;CTL活性增强;BALBc小鼠脾CD4+T细胞增加。结论:经鉴定证实了HSVⅠgB基因疫苗的构建;HSVⅠgB基因疫苗可以诱导较强的细胞免疫应答,应用于预防HSVⅠ的感染具有良好的前景。
- 李光源贺冰冯非孟祥俊宋忆淑王晓祺
- 关键词:单纯疱疹病毒DNA疫苗流式细胞术CFSE
- 白内障手术器械—注吸器的改进及临床应用
- 1997年
- 宋忆淑徐静茹
- 关键词:白内障白内障囊外摘除术
- 视网膜色素上皮细胞光损伤早期基因的差异表达被引量:4
- 2003年
- 目的 分离视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞光损伤早期差异表达的基因。方法 对光损伤早期培养的 RPE细胞,应用差异显示(differential display,DD)技术和银染变性 SDS-PAGE分析方法,分离差异表达的基因。结果 获得一段长为458bp新的基因序列,在GenBank登录,登录号为:AF509472。结论 在可见光对培养的RPE细胞损伤的过程中,除一些已知基因的表达外,可能还有新的基因参与了这一过程。
- 宋忆淑张晓光刘维全邹啸环
- 关键词:视网膜色素上皮细胞光损伤早期基因视网膜损伤
- 可见光照射致培养的视网膜色素上皮细胞凋亡的超微结构观察被引量:5
- 2005年
- 目的研究可见光照射导致培养的视网膜色素上皮(retinalpigmentepithelium,RPE)细胞凋亡的超微结构变化。方法以卤钨灯为光源,(1970±200)Lx的光照强度,持续光照30min为光损伤实验条件,以透射电镜观察为检测手段,观察可见光照致RPE细胞损伤的超微结构变化。结果光照后培养的RPE细胞,出现了细胞凋亡早期的特征性改变;在相同时间点,细胞表现了不同程度的损害;随着培养时间的延长,细胞出现损害的程度逐渐加重,受损的细胞数目逐渐增多。结论一定强度的可见光照射可导致培养的RPE细胞发生细胞凋亡的特征性超微结构改变,细胞受损具有非同步性及不可逆趋势。
- 宋忆淑贺冰费向东李玉新张晓光
- 关键词:光刺激色素上皮超微结构细胞凋亡
- 切疤“Z”字成形术治疗眼外毗外伤性疤痕挛缩1例
- 1997年
- 宋忆淑徐静茹
- 关键词:手术方法
- 揭取Descemet膜方法的技术改进和角膜内皮细胞培养被引量:8
- 2000年
- 宋忆淑张瑞雪邹啸环
- 关键词:角膜内皮细胞细胞培养
- 球后注射氯丙嗪应注意体位性低血压
- 1995年
- 宋忆淑刘勇
- 关键词:球后注射氯丙嗪体位性低血压青光眼
- s-lap基因序列研究背景及其与光损伤致培养的视网膜色素上皮细胞凋亡关系的研究
- 宋忆淑王桂云李玉新宋志宇王小民张晓光李铁军刘维全邹啸环
- s-lap基因序列的研究。用合成特异性引物对s-lap基因表达序列的结构和功能研究发现该序列不含内显子于光损伤的RPE细胞中表达,而正常的RPE细胞中没有表达; S-lap基因已知序列很有可能在可见光对培养的 RPE 细...
- 关键词:
- 关键词:视网膜色素上皮细胞光损伤