唐杰
- 作品数：8 被引量：33H指数：3
- 供职机构：安徽医科大学药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 鬼针草总黄酮对急性炎症的保护作用及可能机制研究被引量：19
- 2013年
- 目的:研究鬼针草总黄酮(TFB)对急性炎症的保护作用与可能机制。方法:二甲苯诱导急性小鼠耳肿胀,检测耳肿胀度和血清TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8含量;氟氏完全佐剂诱导佐剂性关节炎(AA)大鼠原发性炎症,检测足肿胀度和血清TNF-α、IL-1、IL-2、IL-6、IL-8含量,HE染色观察炎症关节病理学变化,免疫组织化学法检测关节软骨组织ASIC1a蛋白。结果:小鼠急性耳肿胀和AA大鼠原发性炎症中,模型组动物血清TNF-α、IL-1、IL-6和IL-8含量均明显升高,TFB(100、200mg/kg)灌胃给药能降低小鼠耳肿胀度和血清TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8含量,TFB(67、133mg/kg)可以升高AA大鼠血清IL-2的含量。TFB灌胃给药可以使AA大鼠关节炎性细胞减少,改善病理变化。在AA大鼠原发性炎症中模型组大鼠关节软骨组织ASIC1a表达明显升高,TFB(67、133mg/kg)组ASIC1a的表达明显降低。相关性分析结果显示,AA大鼠原发性炎症中ASIC1a与血清TNF-α、IL-1、IL-8含量呈正相关。结论:TFB对急性炎症具有保护作用,其抗炎机制可能与调节炎症介质释放有关。
- 林梅英陈飞虎葛金芳唐杰倪文琳
- 关键词：鬼针草总黄酮急性炎症
- pEGFP-C2-ASIC2a真核表达载体的构建及其在大鼠关节软骨细胞中的表达
- 2014年
- 目的通过构建真核表达pEGFP-C2-ASIC2a质粒,转染大鼠关节软骨细胞,建立ASIC2a在关节软骨细胞中过表达的模型,观察ASIC2a mRNA及其蛋白在细胞中的表达。方法从大鼠脑组织中提取目的基因ASIC2a,并用EcoRⅠ和KpnⅠ进行双酶切,同时用这两种酶双酶切质粒pEGFPC2,将其酶切产物按常规方法连接并转化入大肠杆菌DH5a,挑单克隆菌进行培养,提取质粒,再通过双酶切鉴定及测序后,用Lipofectamine 2000将所构建质粒转染入关节软骨细胞,在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达,使用RT-PCR和Western blot法检测ASIC2a mRNA和蛋白表达,以鉴定模型建立成功与否。结果进行双酶切鉴定目的条带清晰准确,转染后可在荧光显微镜下观察到绿色荧光表达,通过RT-PCR可发现mRNA转录,Western blot法可发现目的蛋白表达。结论成功构建重组pEGFP-C2-ASIC2a表达载体,将用于进一步观察ASICs对软骨细胞的影响。
- 倪文琳唐杰潘春晓葛金芳陈飞虎
- 关键词：PEGFP-C2软骨细胞基因表达蛋白表达
- 牙周病临床指标间多因素回归分析
- 1996年
- 牙周病临床指标间多因素回归分析蒋勇，唐杰，吴缨，汪发贵牙周病系指包括牙龈炎在内的牙齿支持组织的慢性进行性破坏性疾病，病因十分复杂，迄今未能完全阐明。其发病率高，对患者危害大，因而早期的预防和治疗就显得尤其重要。目前国内外许多学者都在探索采用无创伤法进...
- 蒋勇唐杰吴缨汪发贵
- 关键词：牙周病地诺前列酮
- 酸性条件下神经生长因子对大鼠关节软骨细胞酸敏感离子通道1a表达的影响被引量：1
- 2015年
- 目的:pH 6.0培养条件下观察神经生长因子(NGF)对大鼠关节软骨细胞酸敏感离子通道1a(ASIC1a)基因和蛋白表达的调控作用及其机制。方法:体外提取培养原代大鼠膝关节软骨细胞,酸性环境下观察细胞NGF高亲和力受体TrkA的表达情况;不同浓度NGF刺激观察ASIC1a的表达变化;10 ng/m L NGF刺激不同时间胞外信号调节激酶(ERK1/2)及c-fos磷酸化的时效关系,阻断ERK1/2(PD98059 30μmol/L)后观察cfos磷酸化水平和ASIC1a的表达;RT-PCR检测ASIC1a基因的表达,Western Blot检测Trk-A、ASIC1a、ERK1/2、p-c-fos蛋白的表达。结果:在酸性环境下NGF的高亲和力受体Trk-A表达比正常环境可高出3倍,ASIC1a的表达随着NGF的浓度升高而升高,10 ng/m L时趋于稳定;NGF刺激后,ERK1/2及c-fos活化增强,4 h达到最大水平;阻断了ERK1/2之后,p-c-fos和ASIC1a蛋白表达下降,差异具有显著性(P<0.01)。结论:在酸性环境下,NGF促进了大鼠关节软骨细胞ASIC1a表达的上调,并且ERK1/2信号通路的活化可能参与了这一过程。
- 唐杰胡伟吴繁荣葛金芳潘春晓高文凡陈飞虎
- 关键词：关节软骨细胞酸敏感离子通道神经生长因子胞外信号调节激酶
- ASIC1a对大鼠关节软骨细胞基质代谢及MAPK信号通路表达的影响被引量：3
- 2014年
- 目的研究ASIC1a(acid-sensing ion channel 1a)对大鼠关节软骨细胞基质代谢及MAPK信号通路表达的影响。方法 SD大鼠关节软骨细胞分离、培养与鉴定,建立软骨细胞ASIC1a表达沉默模型。将软骨细胞分为正常组(pH7.4)、pH 6.0酸化组、以及ASIC1a特异性阻滞剂PcTx-1、表达沉默组和非特异性阻滞剂Amiloride处理的酸化组,对二甲基亚甲蓝分光法检测大鼠关节软骨细胞培养上清中GAG的含量,氯胺T法检测Hyp的含量,ELISA法检测MMP-2、TIMP-2的含量,Western blot法检测酸化及阻断ASIC1a后ERK1/2、p38 MAPK磷酸化蛋白的表达。结果激活ASIC1a明显抑制大鼠关节软骨细胞GAG、Hyp和TIMP-2代谢水平(P<0.01),对MMP-2的代谢水平降低抑制作用较弱(P<0.01),且ASIC1a能引起ERK1/2、p38 MAPK磷酸化水平升高,阻断ASIC1a后,磷酸化水平升高受到明显抑制(P<0.01)。结论 ASIC1a参与了酸诱导的大鼠关节软骨细胞基质代谢的失衡,其机制可能与激活ERK1/2和p38MAPK磷酸化有关。
- 张礼菊胡伟唐杰吴繁荣葛金芳陈飞虎吴建贤
- 关键词：关节软骨细胞基质代谢丝裂原激活蛋白激酶羟脯氨酸糖胺聚糖
- siRNA沉默ASIC1a基因对佐剂性关节炎大鼠关节软骨细胞凋亡的影响研究被引量：5
- 2012年
- 目的:探讨小分子干扰RNA(siRNA)技术诱导佐剂性关节炎(adjuvant-induced arthritis,AA)大鼠关节软骨细胞中ASIC1a表达沉默对细胞凋亡的影响。方法:通过化学合成法合成特异性荧光短链ASIC1asiRNA-FAM,使用Lipo-fectamine 2000转染试剂盒将ASIC1asiRNA转染入关节软骨细胞,采用荧光显微镜、流式细胞术、实时荧光定量PCR(q-RT-PCR)及WesternBlot法检测siRNA转染效率及其对ASIC1amRNA和蛋白表达的抑制作用。同时采用An-nexin-V/PI流式细胞术检测各组细胞凋亡情况。结果:ASIC1asiRNA能成功转入软骨细胞,转染后AA大鼠关节软骨细胞中ASIC1amRNA表达显著低于对照组(P<0.01),最大抑制率为85.4%;Western Blot结果显示,转染特异性siRNA后ASIC1a蛋白表达明显低于对照组(P<0.01)。Annexin-V/PI流式细胞术结果表明,与模型组相比,siRNA-3转染引起ASIC1a表达沉默后AA大鼠软骨细胞凋亡明显减少。结论:siRNA介导的AA大鼠关节软骨细胞ASIC1a表达沉默模型是研究酸敏感离子通道对软骨细胞代谢影响的可靠模型,siRNA-3转染对胞外酸化刺激条件下AA大鼠关节软骨细胞凋亡的保护作用可能与其调节的表达有关。
- 江晟陈飞虎陈寸知荣超胡伟吴繁荣葛金芳唐杰
- 关键词：关节软骨细胞细胞凋亡
- 酸敏感离子通道1a在酸诱导的大鼠关节软骨细胞自噬的作用及其机制研究被引量：7
- 2013年
- 目的研究酸敏感离子通道1a(acid-sensing ion chan-nel 1a)在体外培养的酸诱导的大鼠关节软骨细胞自噬的作用及其可能机制。方法Ⅱ型胶原酶消化法分离大鼠关节软骨细胞,鉴定后传代培养,观察在不同pH条件下诱导的细胞自噬情况以确定胞外酸化条件;将软骨细胞分为pH7.4环境下培养的正常组、pH 6.0的酸化组、以及经ASIC1a非特异性阻断剂Amiloride和特异性阻断剂PcTX1处理的酸化组,RT-PCR法检测细胞自噬基因Beclin-1 mRNA的表达,Western blot法检测自噬蛋白LC3及ERK1/2、p38MAPK磷酸化蛋白的表达,透射电子显微镜法(TEM)观察自噬小体数量的变化;通过使用ERK1/2、p38MAPK磷酸化抑制剂(PD98059、SB203580),采用RT-PCR和Western blot法观察ERK1/2及p38MAPK对酸诱导的软骨细胞自噬的影响。结果 pH 5.5和pH 6.0胞外酸化刺激均能明显升高软骨细胞自噬水平(P<0.01);与pH 7.4组比较,酸化组软骨细胞Beclin-1 mRNA及LC3、磷酸化的ERK1/2和p38MAPK蛋白表达水平均明显升高(P<0.01),且自噬小体数量增多,ASIC1a阻断剂组自噬水平及ERK1/2、p38磷酸化蛋白表达水平较酸化组明显降低(P<0.01),且自噬体数量减少;与pH 6.0组相比,ERK1/2磷酸化抑制剂处理后,Beclin-1 mR-NA和LC3蛋白的表达均下调(P<0.05,P<0.01),而p38磷酸化抑制剂组自噬水平则无明显变化。结论胞外酸化环境下能诱发软骨细胞自噬,阻断ASIC1a能明显减弱酸化诱导的软骨细胞自噬,其机制可能与抑制ERK1/2磷酸化有关。
- 张晨晨唐杰胡伟葛金芳林梅英陈飞虎
- 关键词：自噬关节软骨细胞LC3ERK1
- 酸敏感离子通道1a在酸诱导的大鼠肝星状细胞活化中的作用被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨酸敏感离子通道1a(ASIC1a)在酸诱导的大鼠肝星状细胞活化中的作用。方法:体外培养肝星状细胞株(HSC-T6)经处理后,乳酸脱氢酶(LDH)检测细胞毒性变化,RT-PCR检测ASIC1a mRNA表达,Western Blot和RTPCR分别检测Calpain、Calcineurin蛋白和mRNA表达变化,免疫细胞化学法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的变化。结果:细胞酸化处理后ASIC1a含量明显上升;随着胞外pH值的下降,LDH释放量逐渐升高,ASIC1a阻滞剂可抑制酸化诱导的肝星状细胞LDH的释放量;酸化组肝星状细胞Calpain、Calcineurin mRNA和蛋白表达水平均明显增高,ASIC1a阻断剂组Calpain、Calcineurin mRNA和蛋白表达水平较酸化组明显降低;与酸化组相比,阻断ASIC1a可以降低HSC-T6中α-SMA的表达。结论:胞外酸化环境下可诱导肝星状细胞活化,阻断ASIC1a能明显降低酸化诱导的细胞活化。
- 潘春晓唐杰王晓宇王雯刘甲莉吴繁荣陈飞虎
- 关键词：酸敏感离子通道肝星状细胞活化
