叶思思
- 作品数:3 被引量:7H指数:2
- 供职机构:江苏大学药学院更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划江苏省高校自然科学研究项目更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 利用双色荧光观察分析重组家蚕杆状病毒对昆虫细胞及蚕体组织的感染被引量:4
- 2009年
- 尝试将红色荧光蛋白(RFP)作为昆虫表达体系的分子标签,克隆了rfp基因的读码框,通过Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,将该基因插入家蚕核型多角体病毒(BmNPV)中,获得重组杆状病毒BmNPV-rfp。对家蚕细胞的感染表明,rfp适于在昆虫细胞中表达,在显微镜下红色荧光很明显,说明RFP可以作为杆状病毒表达的分子标签。BmNPV-rfp和另一种插入绿色荧光蛋白基因gfp的家蚕重组杆状病毒BmNPV-gfp混合感染家蚕细胞和幼虫的实验表明,二者的荧光很少在同一细胞中发生重叠,说明昆虫细胞大多只感受1次同一来源的病毒。BmNPV-rfp、BmN-PV-gfp与AcNPV混合感染Sf21细胞的结果也证明了该推断,并且还显示AcNPV可以协助BmNPV来源的病毒基因在Sf21细胞中表达以及协助病毒增殖或产生杂交病毒,但尚未明确其机制。
- 王文兵马双双李兵叶思思高静沈卫德
- 关键词:红色荧光蛋白家蚕核型多角体病毒苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒细胞感染
- 腺病毒介导的IL-24基因抑制人脑胶质瘤细胞增殖的机制研究
- 2010年
- 目的:探讨IL-24抑制人脑胶质瘤细胞增殖的可能机制。方法:用腺病毒介导的IL-24(Ad.IL-24)及腺病毒空载体感染人脑胶质瘤细胞U251,通过荧光显微镜观察腺病毒的感染效率,RT-PCR法检测IL-24的转录水平;用MTT法、流式细胞仪检测IL-24对U251细胞增殖的影响;用蛋白质印迹方法检测神经生长因子(NGF)、酪氨酸激酶受体A(tyrosine kinase A,TrkA)的表达水平,并分析其相关性。结果:Ad.IL-24及腺病毒空载体转染U251后,RT-PCR结果显示Ad.IL-24组出现高表达电泳条带,而腺病毒空载体组则未出现电泳条带;MTT结果显示Ad.IL-24明显抑制了U251细胞的增殖,且流式细胞仪细胞周期检测发现Ad.IL-24处理组较对照组G2/M期明显延长,蛋白质印迹结果显示过表达IL-24的U251细胞中NGF及TrkA表达降低。结论:IL-24可能通过减少细胞中TrkA和NGF的表达来抑制肿瘤细胞的增殖。
- 张铁军袁志诚张严赵婷婷王青叶思思李巧玉湛利平杨勇金洁邵根宝彭琬昕龚爱华
- 关键词:白细胞介素24神经生长因子胶质瘤细胞
- 线粒体参与银杏酸诱导HepG2细胞凋亡的研究被引量:3
- 2012年
- 探讨银杏酸(Ginkgolic acids,GAs)诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的效应,初步探索其与线粒体相互作用的机制.以不同浓度的GAs作用于HepG2,MTT检测与相差显微镜观察相结合,分析GAs对细胞增殖的影响;Hochest染色观察细胞核变化;AnnexinⅤ/PI双标后流式细胞仪检测凋亡情况;Western blot检测凋亡相关蛋白(Caspase-3、Bax、Bcl-2)的表达;JC-1染色检测线粒体膜电位;DCFH-DA染色检测活性氧(ROS)生成.结果发现,GAs以时间和剂量依赖性方式抑制细胞的增殖;GAs处理诱导HepG2细胞发生凋亡:细胞核皱缩及片段化,Caspase-3活化,Bax/Bcl-2比值增加,细胞凋亡率显著上升.此外,GAs可直接与线粒体发生作用,诱导HepG2细胞线粒体外膜膜电位下降,PTP孔道开放,ROS含量升高.研究结果表明GAs能够诱导肝癌细胞的凋亡,推测其主要通过影响线粒体功能而导致细胞的凋亡.
- 叶思思高静龚爱华张严王穆彬杨小明
- 关键词:银杏酸抗肿瘤凋亡线粒体