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氨基酸对禾粟链霉菌生物合成ε-聚赖氨酸的影响被引量：1: 2011年; 为了探索氨基酸对Streptomyces graminearus LS-B1以葡萄糖发酵生产ε-聚赖氨酸(ε-PL)的影响,分别在发酵过程中添加了16种常见氨基酸。研究结果表明,苯丙氨酸(Phe)、精氨酸(Arg)、酪氨酸(Tyr)、甘氨酸(Gly)、天冬酰胺(Asn)、色氨酸(Try)6种氨基酸对ε-PL合成有一定的促进作用,其中在发酵初始添加Phe且添加浓度为3mmol/L时效果最佳,使产量提高了20%～30%,达到0.488g/L。代谢流量分析(MFA)显示,添加Phe改变了ε-PL合成的代谢流量分布,抑制了磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)向莽草酸途径的通量,从而使其更多的流向了ε-PL合成途径。; 廖莉娟赵福林陈旭升李树唐蕾毛忠贵; 关键词：Ε-聚赖氨酸氨基酸苯丙氨酸

植物/微生物源活性蛋白协同纤维素酶水解木质纤维素的研究进展被引量：7: 2010年; 综述了微生物源活性蛋白(水解酶和酶促因子)和植物源活性蛋白(水解酶和酶促因子)分别应用于木质纤维素-糖平台的研究进展,总结了植物/微生物源活性蛋白协同纤维素酶水解木质纤维素的作用机制,并对由植物/微生物源活性蛋白组合构建经济高效的纤维素酶水解体系进行了展望。; 孙付保毛忠贵张建华唐蕾张宏建; 关键词：木质纤维素水解酶

Genome shuffling技术改造ε-聚赖氨酸重组菌Streptomyces sp. Feel-1被引量：4: 2012年; 利用Genome shuffling技术对1株融合重组菌Streptomyces sp.Feel-1产ε-聚赖氨酸(ε-PL)进行了育种研究。首先对Feel-1进行了甲基磺酸乙酯(EMS)诱变,以甘氨酸(Gly)和S-2-氨乙基-L-半胱氨酸(AEC)作为抗性指标进行筛选,得到4株正向突变株,ε-PL摇瓶产量分别为1.78 g/L、1.89 g/L、1.85 g/L、1.86 g/L,比原始菌株Feel-1(1.60 g/L)分别提高了11.3%、18.1%、15.6%、16.3%;然后将这4株产量提高株作为出发菌库,采用双亲灭活法进行了3轮递推式原生质体融合(Genome shuffling),最终得到了3株产量大幅提高的重组菌,摇瓶产量分别为2.42 g/L、2.35 g/L和2.37 g/L,比原始菌株分别提高了51.3%、46.9%和48.1%;选择其中1株(G3-67)进行补料分批发酵,192 h时ε-PL产量达到32.2 g/L。; 刘春梅李树董传亮赵福林毛忠贵; 关键词：Ε-聚赖氨酸原生质体融合发酵

融合重组菌Streptomyces sp.FEEL-1产ε-聚赖氨酸的发酵培养基优化: 2013年; 对Streptomyces sp.FEEL-1产ε-聚赖氨酸的发酵培养基(M3G)中的6种主要成分进行了PB-CCD的响应面优化。PB实验表明,酵母粉、KH2PO4和MgSO4对ε-PL产量影响显著,结合最陡爬坡试验和中心组合实验构建出各因素的最佳浓度:葡萄糖50 g/L,酵母粉7.54 g/L,(NH4)2SO45 g/L,KH2PO41 g/L,K2HPO42.48 g/L,MgSO42 g/L,ZnSO40.03 g/L,FeSO40.03 g/L,该条件下ε-PL摇瓶产量能达1.62 g/L。在此基础上对微量元素ZnSO4,FeSO4进行了单因素实验的优化,发现ZnSO4对ε-PL产量几乎没有影响,而0.06 g/L的FeSO4则可以进一步使ε-PL产量提高至1.73 g/L,较M3G培养基提高了57.2%。在5 L发酵罐中进行控制pH的分批发酵,ε-PL产量达到8.76 g/L,较其在M3G培养基提高了41.1%。; 王靓李树毛忠贵赵福林; 关键词：培养基

冷冻及加热法去除ε-聚赖氨酸发酵液中的蛋白被引量：4: 2012年; ε-聚赖氨酸(ε-PL)发酵液中蛋白的去除是ε-PL提取工作中重要的一环。以ε-PL和蛋白的相对质量含量为衡量指标,比较了冷冻和加热两种去除蛋白的方法,结果表明加热处理去蛋白的效果要优于冷冻处理。优化了加热处理条件:pH6.0、温度80℃、加热时间15min。在此条件下,蛋白去除率达83%且ε-PL基本没有损失。采用SDS-PAGE电泳对热处理去蛋白效果进行了鉴定,结果表明发酵液中蛋白分子量分布在6.64万以下,只有少量1.43万以下的小分子蛋白不能加热去除。研究建立的加热处理ε-PL发酵液的方法对蛋白的去除具有一定的指导意义。; 艾婷婷陈旭升李树董传亮毛忠贵; 关键词：Ε-聚赖氨酸冷冻 SDS-PAGE电泳

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江南大学生物工程学院发酵与生态工学研究室