长春理工大学生命科学技术学院生物工程系
- 作品数：6 被引量：13H指数：2
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- 抗汉城病毒荧光单克隆抗体的制备及初步应用
- 2022年
- 目的制备抗汉城病毒(Seoul virus,SEOV)荧光单克隆抗体(单抗),并初步应用于Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗原液的病毒灭活验证。方法以SEOV L-99株灭活病毒原液为免疫原,采用小鼠杂交瘤细胞融合技术,筛选抗SEOV特异性单抗杂交瘤;小鼠体内诱生法制备单抗腹水,蛋白A亲和层析纯化单抗,并以蛋白质印迹法鉴定其特异性;间接ELISA测定单抗效价和相对亲和力;纯化单抗采用搅拌法标记异硫氰酸荧光素,并分别采用直接免疫荧光法与小鼠脑内接种法对Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗原液进行病毒灭活验证。结果共筛选出4株特异性抗SEOV L-99株杂交瘤1D5、2E3、3A4及5B7。蛋白质印迹法鉴定4株单抗均与SEOV L-99株核衣壳蛋白发生特异性反应;间接ELISA测定腹水效价为3.13×10^(-8)~1.25×10^(-7);相对亲和力顺序为1D5>3A4>2E3>5B7;纯化抗体纯度>95%;异硫氰酸荧光素标记1D5株单抗的结合比率为3.4;直接免疫荧光法与小鼠脑内接种法检测盲传3代的Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗原液,病毒灭活验证结果一致。结论成功筛选到高效价特异性抗SEOV单抗,并制备成荧光单抗,可用于Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗生产工艺中的病毒灭活验证。
- 张雨薇彭言峰刘双军陈子杨韩德明李景良常军亮
- 关键词：肾综合征出血热
- 改革细胞生物学实验教学 培养学生创新能力
- 2012年
- 实验教学是细胞生物学课程的重要组成部分,我们在细胞生物学实验中进行了实验教学的探索与改革,通过调整实验教学内容体系;引入辅助教学手段;建立完善的成绩评定体系等几个方面的改革,培养了学生的创新意识兴趣,从而达到提高学生综合素质的目的。
- 葛淑敏
- 关键词：细胞生物学教学改革
- 原核分子伴侣素系统中关键“标签肽”的分子设计
- ＜正＞如何保持特定蛋白质的稳定性是蛋白质研究与应用中的关键问题。分子伴侣素chaperonin（Cpn）是稳定蛋白质的重要因子,大肠杆菌的GroEL/ES系统是研究最透彻的分子伴侣,被广泛用于稳定蛋白质。但该系统的蛋白质...
- 郭育魏炳旭栗慧超李晅王壹高乐
- 文献传递
- 流感病毒在MDCK细胞上灭活验证方法的筛选及应用
- 2025年
- 目的筛选流感病毒在MDCK细胞上的灭活验证方法,并应用于流感病毒灭活前后样品的检测,以期为流感疫苗质量检测提供可靠的方法。方法将适应MDCK细胞的B/Yamagata(BY)、B/Victoria(BV)、H1N1、H3N24种型别的流感病毒分别稀释为10、1、0.1、0.01、0.001、0.0001 lgCCID50/mL后,接种于MDCK细胞,分别采用换液法(吸附1.5 h后弃掉病毒培养液,再加入病毒培养液,每3 d传代1次,共传3代)、补液法(吸附1.5 h后直接补加病毒培养液,每3 d传代1次,共传3代)及《欧洲药典》法(每4 d传代1次,共传3代)培养,每天观察细胞病变(cytopathic effect,CPE)情况,收获各代次病毒液,检测血凝素(hemagglutinin,HA)滴度,确定最佳灭活验证方法。采用最佳灭活验证方法检测流感病毒灭活前后样品。结果换液法和补液法均可在0.1~1 lgCCID50/mL滴度范围内检测到流感病毒,《欧洲药典》法可在1~10 lgCCID50/mL滴度范围内检测到流感病毒,且补液法测得的HA滴度高于其他两种方法,因此,确定补液法为最佳灭活验证方法。采用补液法检测流感病毒灭活前样品均为阳性,灭活后样品均为阴性。结论补液法是流感病毒在MDCK细胞上的最佳灭活验证方法,可用于流感疫苗质量的检测。
- 吕原李臣锋杨越隋丽娜李爽吴业红王清爽张雪梅
- 关键词：流感病毒流感疫苗MDCK细胞病毒灭活
- 紫蘑菇多糖的提取及体外抗肿瘤活性研究被引量：2
- 2008年
- [目的]试验优化了紫蘑菇多糖的提取条件,探讨了紫蘑菇多糖对人宫颈癌细胞、肝癌细胞的增殖抑制作用。[方法]采用正交试验,MTT比色法测定。[结果]试验成功提取了紫蘑菇多糖,试验结果显示紫蘑菇多糖对人宫颈癌细胞、肝癌细胞均具有一定的抑制作用。[结论]试验为真菌多糖的提取及抗肿瘤活性研究奠定了基础。
- 葛淑敏于源华张艳飞
- 关键词：人宫颈癌细胞肝癌细胞
