贵州医科大学基础医学院多媒体机能学实验室
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
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- 白细胞介素-11及其受体在新生缺氧缺血性脑病大鼠模型中的表达
- 2023年
- 目的探讨白细胞介素-11(IL-11)和IL-11受体蛋白(IL-11Rα)在缺氧缺血性脑病(HIE)新生大鼠模型中的表达。方法7日龄Sprague-Dawley新生大鼠分为假手术组(Sham组9只)和模型组(HIE组21只),HIE组行右颈动脉结扎、8%O2+92%N2的低氧环境缺氧2 h建立HIE模型,Sham组不结扎和不缺氧;造模48 h后观取两组各6只大鼠观察翻正反射、负趋地性试验和Longa评分等短期行为学表现,之后麻醉处死大鼠取脑组织HE染色、观察大鼠大脑皮层及海马组织学改变;于造模后6 h取Sham组3只大鼠,HIE组于造模后6、12、24、48、72 h时各取3只大鼠取脑组织,采用免疫印迹(Western blot)法IL-11、IL-11Rα和糖蛋白130(GP130)的表达。结果与Sham组比较,HIE组大鼠翻正反射、负趋地性试验时间显著延长(P<0.01),Longa评分升高;与Sham组比较,HIE组大鼠脑干组织结构不清晰、脑细胞丢失、海马和皮层细胞坏死严重;HIE模型大鼠脑组织IL-11的表达呈现先降低后升高,与Sham组比较,在72 h时差异有统计学意义(P<0.05);IL-11Rα和GP130的表达趋势为先增后减,与Sham组比较,IL-11Rα和GP130在24 h时明显升高(P<0.01或P<0.01)。结论HIE模型新生大鼠神经功能缺损,脑组织损伤明显,内源性IL-11及其受体可能参与新生大鼠缺氧缺血性脑损伤疾病的发生及发展过程。
- 左丁冯占辉王筱雅陈惠心胡颖张金娟杨清叶兰
- 关键词：新生大鼠神经保护白细胞介素-11
- hUC-MSC在成神经分化过程中的趋化迁移研究被引量：1
- 2021年
- 目的探究人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSC)向神经样细胞的分化,并对其分化的神经样细胞的趋化作用进行研究。方法检测hUC-MSC细胞表面的标记;无血清的诱导培养基[含2%二甲基亚砜(DMSO)和200μmol/L丁羟基茴香醚(BHA)]诱导其向神经细胞分化,并进行神经细胞特异性标志物神经上皮干细胞蛋白(nestin)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)的免疫荧光染色检测,并对分化的成神经诱导过程中的形态变化进行鉴定。此外,不同分化状态的hUC-MSC,在加入500μL含有20 ng/mL浓度的基质细胞衍生因子(stromal Cell-derived Factor-1α,SDF-1α)的不含血清的L-DMEM培养基,利用倒置相差显微镜下拍照,统计迁移至室膜下方的细胞数。结果成功分离出hUC-MSC,行流式细胞仪检测结果显示MSC:CD71+、CD29+,而CD34-、CD45-符合MSC的生物学特征。对不同诱导时间的hUC-MSC免疫荧光结果的统计学分析,nestin的表达呈现出先增高后降低的趋势,NSE在诱导期和维持前期均为阴性,在整个过程中末期才开始表达,到维持48 h时有62.5%的细胞表达,维持72 h时有76.5%的细胞表达。不同成神经分化状态的hUC-MSC迁移能力不同,诱导30 h,细胞向SDF-1α的趋化迁移能力达到最强。结论hUC-MSC具有易分离并扩增培养的生物特性,能诱导分化成为成神经细胞,并且具有一定的迁移能力,该研究能为中枢神经系统细胞的移植提供理论基础。
- 李晨卞凯鹏熊英张丽娟匡梦岚王岚王恒许键炜
- GW0742对凝血酶诱导的体外血脑屏障破坏的保护作用
- 2024年
- 目的探讨GW0742对凝血酶诱导的体外血脑屏障破坏的保护作用。方法选取新生3~7日龄的SD大鼠若干,提取原代脑微血管内皮细胞(BMEC)及星形胶质细胞(AC)。于体外构建BMEC单层培养模型和BMEC+AC共培养模型,分为BMEC单层培养模型组、BMEC+AC共培养组及Blank组(只加培养基);取体外血脑屏障(BBB)共培养模型,分为Control组和脑出血组(ICH组),Control组加入完全培养基处理,ICH组加入40 u/mL凝血酶处理,分别处理12 h模拟体外ICH模型,并通过4 h渗漏试验、荧光素钠通透性试验评价BBB及ICH模型的通透性。另取BBB共培养模型大鼠分成5个组:Control组、ICH组,以及GW0742低、中、高剂量组(1.25、2.50、5.00μmol/L),给药24 h后采用Western blotting检测MMP-9、ZO-1、Occludin蛋白表达。结果4 h渗漏试验结果显示:与Blank组比较,BMEC单层培养组能维持一定的液面差;与BMEC单层培养组比较,BMEC+AC共培养组能维持较好的液面差。荧光素钠通透性试验结果显示各组通透性为:Blank组>BMEC单层培养组>BMEC+AC共培养组。荧光素钠通透性试验结果显示:与Blank组比较,BMEC单层培养组在0.5、1.0、2.0 h时通透性降低(P<0.05);与BMEC单层培养组比较,BMEC+AC共培养组在0.5、1.0、2.0 h时通透性降低(P<0.05)。4 h渗漏试验结果显示:与Control组相比,ICH组液面差降低,通透性增加。荧光素钠通透性试验结果显示:与Control组比较,ICH组在0.5、1.0、2.0 h时通透性增加(P<0.05)。细胞形态学观察结果显示:与Control组比较,ICH组内皮细胞形态明显皱缩、拉长;与ICH组比较,给药组内皮细胞形态未见明显皱缩、拉长,呈剂量依赖。与Control组比较,ICH组MMP-9蛋白相对表达量升高(P<0.05),ZO-1、Occludin蛋白相对表达量降低(P<0.05);与ICH组比较,GW0742高剂量组MMP-9蛋白相对表达量降低(P<0.05),ZO-1、Occludin蛋白相对表达量升高(P<0.05)。结论GW0742对凝血酶诱导的血脑屏障破坏具有保护作用,�
- 汪朝云陈琴王筱雅熊英张金娟张晴冯占辉叶兰
- 关键词：血脑屏障MMP-9ZO-1OCCLUDIN
- 重组人白细胞介素-11对新生大鼠缺氧缺血性脑病的作用
- 2022年
- 目的探讨重组人白细胞介素-11(rhIL-11)对新生大鼠缺氧缺血性脑病(HIE)的作用。方法48只7日龄Sprague-Dawley(SD)新生大鼠均分为假手术(Sham)组、HIE组、HIE+0.9μg/kg rhIL-11组及HIE+3.6μg/kg rhIL-11组,每组12只;HIE各组新生大鼠行右颈动脉结扎术后于8%O_(2)和92%N_(2)的低氧气体中缺氧2 h建立HIE模型,Sham组仅暴露右侧颈动脉、不结扎和不缺氧;缺血缺氧造模1 h,各rhIL-11组新生大鼠侧脑室注射rhIL-11,HIE组和Sham组大鼠予等体积生理盐水;造模成功48 h,对4组新生大鼠进行短期行为学测试(翻正反射、负趋地性试验及神经功能缺陷评分);处死新生大鼠取脑组织,测定4组新生大鼠的脑梗死体积和脑组织含水量。结果建立HIE模型48 h后,与HIE组比较,0.9μg/kg rhIL-11组和3.6μg/kg rhIL-11组新生大鼠翻正反射和负趋地性试验时间减少、神经功能缺陷评分降低(P<0.05或P<0.01);与HIE组比较,3.6μg/kg rhIL-11组新生大鼠脑梗死体积减少(P<0.01);脑组织含水量结果表明高剂量rhIL-11减轻脑含水量(P<0.05),与HIE组比较,差异有统计学意义。结论rhIL-11对新生大鼠HIE引起的脑损伤具有神经保护作用。
- 左丁冯占辉肖美王筱雅汪朝云熊英张晴叶兰
- 关键词：神经保护新生大鼠重组人白细胞介素-11脑含水量
