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抑癌基因p27^(Kip1)及其Ser^(10)突变体对HepG_2细胞周期和增生的影响被引量：2: 2004年; 目的:p27kip1氨基端第10号位置的丝氨酸(Ser10)磷酸化位点是该蛋白分子中最重要的磷酸化位点,探讨人工诱变该位点丝氨酸为丙氨酸(S10A)后对肝癌细胞株HepG2细胞周期以及细胞增生的影响.同时比较野生型p27kip1和Ser10突变型p27kip1基因转染对肝癌细胞株HepG2细胞周期和增生的影响. 方法:应用脂质体转染法将含人野生型和突变型p27kip1质粒DNA瞬时转染HepG2细胞,免疫细胞化学检测p27kip1蛋白的表达和细胞内分布,流式细胞计数仪分析细胞周期变化. 结果:野生型和突变p27kip1蛋白转基因后HepG2细胞均可以G0期阻滞,且突变型的阻滞作用强于野生型(P<0.05),细胞生长受到抑制.无血清培养96 h同步化于G0期,野生型和突变型p27kip1均分布于细胞核;而在20mL/L血清继续培养8 h后野生型向细胞质转运而主要分布于细胞质, 突变型仍然滞留于细胞核. 结论:p27kip1的过度表达可明显抑制HepG2细胞的增生, p27kip1Ser10磷酸可能介导其细胞核外转运的重要分子机制.; 管晓翔陈龙邦张爱华王靖华德伟; 关键词：肝癌细胞株抑癌基因细胞周期突变体

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南京医科大学第四临床医学院小儿肾脏病研究中心