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四川农业大学动物医学院动物生物技术研究中心
作品数:
1
被引量:14
H指数:1
发文基金:
国家自然科学基金
“九五”国家科技攻关计划
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相关领域:
农业科学
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犬病
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四川农业大学
作者
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徐志文
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王勤
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2003
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伪狂犬病病毒Fa株gE基因的克隆与序列的比较分析
被引量:14
2003年
根据已发表的伪狂犬病病毒(PRV)的基因序列,设计合成一对引物PCL1和PCL2,以PRVFa株的DNA为模板成功地扩增得到预期的长约1 7kb的特异片段,经酶切鉴定,初步确定为gE基因。将扩增产物经KpnⅠ、EcoRⅠ消化形成粘末端克隆到pUC18质粒,得到了明显大于载体的重组质粒PpgE。重组质粒PpgE经酶切鉴定为含有PRV的gE基因,测序PpgE得到完整的gE基因片段,并与4株不同来源的毒株进行了比较分析。5毒株的gE同源性比较分析发现毒株间同源性最低也高达97%,这体现了gE基因的保守性。分析还表明Fa与TNL同源。同时99%的高同源性也显示Fa、Ea、SH可能是同一毒株。gE序列在1040-1410碱基的高同源性区域作为PRV的PCR检测或作为核酸探针是非常重要的。
王勤
郭万柱
徐志文
汪铭书
王小玉
关键词:
伪狂犬病
病毒
GE基因
克隆
PCR扩增
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