国家自然科学基金(81071406)
- 作品数：4 被引量：15H指数：2
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- 巨噬细胞过表达miR-125b促进其凋亡被引量：8
- 2016年
- 目的探讨肺结核患儿外周血单个核细胞(PBMC)中miR-125b和靶基因Raf1原癌基因丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(RAF1)表达;观察miR-125b对巨噬细胞凋亡和细胞活力的调节。方法收集和分离肺结核患儿和健康儿童的PBMC,采用荧光定量PCR检测miR-125b和RAF1的mRNA表达水平,Western blot法检测RAF1的蛋白水平。THP-1巨噬细胞分别转染miR-125b模拟物(miR-125b mimic)、阴性对照模拟物(NC-mimic)、miR-125b抑制物(miR-125b inhibitor)以及阴性对照抑制物(NC-inhibitor),共培养48 h;利用Western blot法检测THP-1巨噬细胞中RAF1表达,异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双染色结合流式细胞术检测细胞凋亡,CCK-8法检测细胞活力。结果在结核患儿PBMC的miR-125b表达下调,RAF1的mRNA和蛋白水平都升高。在THP-1巨噬细胞中过表达miR-125b时,RAF1表达下调,促进巨噬细胞凋亡,降低细胞活力;在THP-1巨噬细胞中miR-125b表达被抑制时,RAF1表达升高,抑制巨噬细胞凋亡,提高细胞活力。结论结核患儿PBMC中miR-125b水平降低,上调THP-1巨噬细胞miR-125b水平促进巨噬细胞凋亡并抑制细胞活力。
- 于光远詹学张祯祯李娅莎
- 关键词：THP-1巨噬细胞
- 循环血微小RNA与结核
- 2015年
- 结核是严重危害人们健康的重大公共问题。早期诊断结核有利于控制结核的传播和降低结核的死亡率。目前常用的诊断方法存在假阳性和假阴性,并有敏感度和特异性不高、价格昂贵、耗时等缺点。微小RNA(micro RNA,mi RNA)是近十多年来新兴的生物标记物,多项研究表明mi RNAs与疾病密切相关,在疾病的进展中发挥着重要作用。通过对结核感染后mi RNA的表达谱变化以及mi RNA诊断结核的特异度和敏感性进行分析,能够找到一种快速、无创、有效的早期诊断结核的分子指标,为临床结核诊治以及结核感染机制研究提供一种新的思路。本文就结核感染后循环血mi RNA的表达水平变化以及其诊断结核的特异度和敏感性进行综述。
- 周梦瑶詹学
- 关键词：结核生物学标记微小核糖核酸
- 外周血hsa-miR-342-5p诊断儿童结核的特异度和灵敏度被引量：1
- 2015年
- 目的评估外周血hsa-miR-342-5p检测对早期诊断儿童结核的价值。方法收集初治涂片阳性、涂片阴性结核患儿,肺炎患儿和正常儿童各20例,采集静脉血,TRIzol法提取外周血总RNA,q RT-PCR检测hsa-mi R-342-5p在各组间的相对表达水平,ROC曲线分析hsa-mi R-342-5p诊断儿童结核的特异度和灵敏度。结果 hsa-mi R-342-5p在涂片阳性结核、涂片阴性结核患儿、肺炎患儿和正常儿童四组间的差异具有统计学意义(F=21.94,P=0.00)。与正常儿童相比,hsami R-342-5p在涂片阳性结核、涂片阴性结核和肺炎患儿中的表达水平均下调,差异有统计学意义(P均<0.01);与肺炎患儿相比,hsa-mi R-342-5p在涂片阳性结核、涂片阴性结核患儿中的表达也明显下调,差异有统计学意义(P<0.01)。对于区分涂片阳性结核和肺炎,hsa-mi R-342-5p的特异度和灵敏度性均为90%;而区分涂片阴性结核和肺炎,其特异度和灵敏度分别为65%和100%。结论外周血hsa-mi R-342-5p有望成为新的分子指标用于儿童结核的早期诊断。
- 周梦瑶詹学张祯祯
- 关键词：微小RNA生物标志结核儿童
- 肺结核患儿外周血单个核细胞中microRNA表达的初步研究被引量：6
- 2013年
- 目的探讨肺结核患儿与健康儿童外周血单核细胞中microRNA表达水平的差异及在儿童肺结核中的诊断价值。方法提取肺结核及健康儿童外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中RNA,进行microRNA芯片检测,筛选出差异表达的microRNA,并用实时荧光定量PCR进行验证,运用t检验对结果进行分析,对目标microRNA进行生物信息学初步分析。结果通过microRNA芯片检测到21个差异表达的microRNA,15个表达上调,6个表达下调,最终选取6个microRNA(hsa-miR-193a-3p、hsa-miR-144、hsa-miR-342-5p、hsa-miR-31、hsa-miR-33a、hsa-miR-142-3p)。经实时荧光定量PCR验证,与正常组相比,肺结核患儿PBMC中hsa-miR-193a-3p、hsa-miR-144表达上调(P<0.05),hsamiR-342-5p、hsa-miR-31表达下调(P<0.05)。生物信息学初步分析提示4种microRNA在结核与宿主细胞相互作用的相关信号通路中可能有发挥一定的作用。结论与成人肺结核中microRNA表达相比,儿童肺结核有其特异表达的microRNA,并可能参与结核病发生、发展的相关的一些信号通路,可作为儿童肺结核潜在的诊断价值。
- 杨先涛张祯祯詹学朱朝敏
- 关键词：儿童肺结核MICRORNA外周血单个核细胞
