江苏省科技支撑计划项目(BE2008308)
- 作品数：4 被引量：15H指数：3
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- 相关机构：南京农业大学更多>>
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- 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程化学工程更多>>
- 内生多黏类芽孢杆菌纤溶酶的纯化及其体外溶栓作用被引量：3
- 2010年
- 植物内生菌株EJS-3发酵液经离心除菌,硫酸铵分级沉淀,Hiprep phenylFF疏水层析,RESOURCEM Q离子交换层析和Sephacryl S-300HR凝胶过滤,获得电泳纯的多黏芽孢杆菌纤溶酶(PPFE-I),聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测定其分子质量为63kD,高效液相色谱法(HPLC)鉴定其纯度为94.1%。每升发酵液中可获得1.6mg活性蛋白,每毫克蛋白活力达2096IU,纯度提高了14.5倍,回收率为3.3%。纯化后的纤溶酶PPFE-I具有明显的体外溶栓作用。
- 吕凤霞姚正颖别小妹赵海珍王煜郭瑶陆兆新
- 关键词：植物内生菌纤溶酶溶栓作用
- 脂肪酶催化猪油合成L-抗坏血酸脂肪酸酯工艺条件被引量：5
- 2010年
- 研究一种L-抗坏血酸脂肪酸酯酶法合成的新途径。以廉价的猪油和L-抗坏血酸作为反应底物,探讨酶法合成L-抗坏血酸脂肪酸酯的工艺条件。结果表明,在该酶促反应中,混合有机溶剂体系中底物转化率高于相应纯有机溶剂体系中的转化率,最佳反应体系为30%叔戊醇:70%异辛烷(V/V)。研究各反应因素对转化率的影响,确定最适反应条件为底物L-抗坏血酸与复合猪油甲酯的物质的量比为1:10、酶量10%、温度55℃、反应时间24h,转化率可达到(52.7±2.8)%。
- 张宇吕凤霞赵海珍刘建伟别小妹陆兆新
- 关键词：脂肪酶猪油酶法合成
- 内生多粘类芽胞杆菌纤溶酶基因PPFE-I在大肠杆菌中融合表达及活性分析被引量：2
- 2010年
- 以内生多粘类芽胞杆菌EJS-3基因组DNA为模板,PCR扩增PPFE-I基因,并克隆到pMD19-T载体上,构建克隆载体pMD-PPFE-I,经测序正确后,将PPFE-I基因克隆至表达载体pET-DsbA上构建重组表达质粒pET-DsbA/PPFE-I,将其转化至E.coli BL21(DE3),在IPTG诱导下实现了融合蛋白DsbA-PPFE-I的表达,表达产物酶活性达228IU/mL。表达产物用SDS-PAGE和Western blotting进行鉴定。SDS-PAGE电泳检测表明融合蛋白主要以可溶形式表达,占菌体总蛋白的18.4%。Western blotting结果表明在相应分子量处有一条特异性条带,证实该蛋白为DsbA-PPFE-I融合蛋白。表达产物通过Ni亲和柱、凝血酶酶切及Sephadex G-100等步骤进行分离纯化,并用MALDI-TOF质谱对重组酶进行了鉴定。纯化后的表达产物在纤维蛋白平板上表现出明显的纤溶活性。
- 吕凤霞陆兆新别小妹林谦张充曹林郭瑶汤彦翀
- 关键词：内生菌纤溶酶
- L-抗坏血酸脂肪酸酯抗氧化活性被引量：6
- 2011年
- 从羟基自由基体系、超氧阴离子自由基体系、二苯苦味肼基自由基体系及还原力测试等方面研究L-抗坏血酸脂肪酸酯(VC脂肪酸酯)体外抗氧化活性,并将其添加到猪油和大豆油当中,评价其抗氧化效果。结果表明,在一定的质量浓度范围内,VC脂肪酸酯对羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基均有较好的清除效果,还原能力也较强,并呈一定量效关系,其抗氧化活性与L-抗坏血酸棕榈酸酯相当。VC脂肪酸酯在猪油中的添加质量分数为0.2%,100℃下强制氧化20h时,猪油的过氧化值为42.8 meq/kg,具有明显的抗氧化活性;在大豆油中添加质量分数0.2%,强制氧化14 h时,大豆油的过氧化值为11.9 meq/kg,其抗氧化能力大于TBHQ,与L-抗坏血酸棕榈酸酯接近,说明VC脂肪酸酯是一种有潜力的食品抗氧化剂。
- 刘建伟赵海珍吕凤霞别小妹张充陆兆新彭杨
- 关键词：猪油抗氧化活性
