北京市自然科学基金(7042060) 作品数:9 被引量:15 H指数:2 相关作者: 郭佳 黄建华 吕海燕 马林 王瑶 更多>> 相关机构: 中国人民解放军总医院 更多>> 发文基金: 北京市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
放疗诱导BALB/c小鼠肾癌细胞的凋亡 被引量:1 2006年 目的研究放射治疗诱发BALB/c小鼠Renca肾癌细胞凋亡的特点及其调控机制,为肿瘤放射治疗提供实验依据。方法采用Annexin-V-FITC/PI法流式细胞仪检测不同剂量放疗后细胞凋亡率,建立BALB/c小鼠肾癌细胞肿瘤种植模型,采用PV免疫组织化学法检测肿瘤石蜡切片P53的表达及ELISA试剂盒检测细胞因子IL-2、IFN-γ的表达。结果①在一定照射剂量范围内,Renca细胞的凋亡率随剂量的增加而升高。②放疗组突变型P53蛋白表达率为(30.17±0.88)%,肿瘤组为(24.22±0.68)%,两组间有显著的统计学差异。③放疗组小鼠脾细胞分泌IL-2为(167.56±13.13)pg/mL,为肿瘤组小鼠分泌量(83.69±1.37)pg/mL的2倍,两组间有显著的统计学差异。放疗组小鼠脾细胞分泌IFN-γ为(1482.47±47.91)pg/mL,约为肿瘤组小鼠分泌量(211.02±35.98)pg/mL的7倍,两组间有显著的统计学差异。结论放疗可诱发Renca细胞凋亡,P53蛋白可能涉及本实验中的细胞凋亡通路。 郭佳 黄建华 吕海燕 王瑶 杨军 马林 胡亚卓 林星石 金婷 杨若佳 王秋华关键词:放疗 凋亡 白介素-2 Γ-干扰素 放射治疗对小鼠肾癌细胞凋亡和Bcl-2与Bax蛋白表达的影响 2007年 目的:观察放射治疗对BALB/c小鼠肾癌的抑制作用及对Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。方法:建立BALB/c小鼠的肾癌细胞移植瘤放射治疗模型;HE染色测定肿瘤细胞死亡面积;采用免疫印迹法(Western blot法)检测肿瘤组织的凋亡相关蛋白表达。结果:放疗组小鼠移植瘤生长速度较肿瘤对照组明显减慢。放疗组小鼠肿瘤组织中抗凋亡蛋白Bcl-2表达下调,促凋亡蛋白Bax表达上调。结论:经放射治疗后,小鼠肿瘤生长受到明显抑制,可能与放疗引发肿瘤细胞凋亡相关蛋白表达变化相关。 王瑶 黄建华 吕海燕 郭佳 杨军 马林放射治疗荷肾癌小鼠肿瘤生长抑制与脾细胞及肿瘤组织IL-2,IFN-γ和IL-10的关系 被引量:6 2009年 目的:观察放射治疗对BALB/c小鼠肾癌移植瘤的抑瘤作用与细胞因子IL-2,IFN-γ和IL-10表达分泌的关系.方法:建立BALB/c小鼠的Renca肾癌细胞移植瘤放射治疗的模型;采用ELISA试剂盒检测小鼠脾淋巴细胞的细胞因子IL-2,IL-10和IFN-γ分泌水平.RT-PCR法检测肿瘤组织IL-2,IL-10和IFN-γ基因的表达水平.结果:治疗组小鼠肾癌移植瘤生长速度较肿瘤对照组明显减慢.放疗组小鼠脾细胞分泌IL-2,IFN-γ及肿瘤组织IL-2,IFN-γ的表达较肿瘤对照组明显升高,IL-10较肿瘤对照组降低.结论:经放射治疗后,小鼠肿瘤生长受到明显抑制,与放疗引发小鼠脾细胞分泌IL-2,IFN-γ和肿瘤组织IL-2,IFN-γ表达分泌增强,IL-10细胞因子降低有关. 王瑶 吕海燕 郭佳 俞伟 马林 汪涛 黄建华关键词:IL-2 IL-10 IFN-Γ 肾肿瘤 放射治疗对小鼠肾癌移植瘤效应的观察 2007年 目的:观察放射治疗对BALB/c小鼠肾癌的抑瘤作用。方法:采用Annexin-Ⅴ-FITC/PI法检测不同剂量放疗后Renca细胞的凋亡率,建立BALB/c小鼠的肾癌细胞移植瘤放射治疗的模型。采用ELISA试剂盒检测小鼠脾淋巴细胞的细胞因子IL-2、IFN-γ分泌水平。结果:①在一定照射剂量范围内,Renca细胞的凋亡率随剂量的增加而升高。②放疗组小鼠移植瘤生长速度较对照组明显减慢。③放疗组小鼠脾细胞分泌IL-2及IFN-γ明显较肿瘤对照组升高。结论:放疗组小鼠肿瘤生长受到明显抑制,与放疗引发的Renca细胞凋亡和小鼠脾细胞分泌IL-2及IFN-γ能力增强有关。 王瑶 黄建华 吕海燕 郭佳 杨军 马林关键词:细胞凋亡 白介素-2 干扰素-Γ 肾肿瘤 瘤内注射树突状细胞联合放疗对小鼠肾癌TNF-α表达的影响 被引量:1 2008年 目的研究放疗增强DC疫苗治疗小鼠肾癌的作用机理。方法Renca肾癌细胞制作BALB/c小鼠皮下移植瘤模型,分别用单纯放疗、单纯DC和DC瘤内注射联合放疗等方法治疗,第28天牺牲小鼠。体外培养2×106Renca肾癌细胞,经20 Gy X射线单次照射培养24 h后,收获细胞。提取细胞和肿瘤组织蛋白,免疫组化和免疫印迹法检测治疗后肿瘤组织中TNF-α、CD3、CD11和F4/80蛋白的表达水平。结果DC瘤内注射联合放疗有效抑制肾癌细胞在BALB/c小鼠体内生长,局部放疗明显增加了肿瘤组织内TNF-α表达水平,体外培养的Renca肾癌细胞经放射线处理后TNF-α表达明显上调。结论放射线能够促进肿瘤细胞分泌TNF-α,瘤内注射DC联合放疗的增效作用与肿瘤局部产生的TNF-α表达上调密切相关。 黄建华 王瑶 吕海燕 郭佳 郭业磊 马林关键词:树突状细胞 肾癌 TNF-Α 树突状细胞免疫治疗辅助放射治疗抑制小鼠肾癌移植瘤的生长 被引量:2 2006年 目的:研究树突状细胞免疫治疗联合放射治疗对小鼠肾癌移植瘤的作用。方法:BALB/c小鼠右腋皮下注射2.5×10^6 Renca肾癌细胞制作移植瘤模型,分为无治疗对照组、单纯放疗组、单纯DC治疗组和DC联合放疗组4组进行治疗。皮下荷瘤的BALB/c小鼠,在第12~16天连续5d接受肿瘤局部放射治疗,6脉伏电子线,7Gy/次,并于第11、15、19和22天分别4次在肿瘤部位直接注射未负载肿瘤抗原的DC细胞(1×10^6/次),第28天处死小鼠。检测各组肿瘤生长速度和瘤体重量,ELISA检测小鼠脾细胞IL-2、IFN-γ、IL-4和IL-10分泌水平。结果:与单纯治疗组比较,DC联合放疗组小鼠的肿瘤生长明显缓慢,体积明显减小,脾细胞分泌的IL-2、IFN-γ和IL-4的能力显著提高,与其它各组比较均有非常显著性差异(P<0.01)。结论:瘤内DC注射免疫治疗联合放疗能够有效地抑制BALB/c小鼠肾癌移植瘤生长,其效果明显好于单一方法治疗。 黄建华 李峤 王瑶 郭佳 吕海燕 扬军 马林关键词:树突状细胞 免疫治疗 肾癌 瘤内注射 树突状细胞瘤内注射联合放疗对小鼠肾癌组织Bcl-2和Bax表达的影响 被引量:1 2007年 目的:研究放疗增强树突状细胞免疫治疗小鼠肾癌的作用与机制.方法: 应用Renca肾癌细胞制作BALB/c小鼠皮下移植瘤模型,分为对照组、单纯放疗组、单纯DC组和DC联合放疗组共4组进行治疗.皮下荷瘤的 BALB/c小鼠,在接种瘤细胞后第12~16天,连续5 d接受肿瘤局部放射治疗,7 Gy 6 MeV/次,并于第11、15、19和22天分别4次在肿瘤部位直接注射未负载肿瘤抗原的DC细胞,1×10^6/次,第28天处死小鼠.检测各组肿瘤生长速度和质量.利用免疫印迹法(Western blot法)检测肿瘤组织的相关凋亡蛋白表达.结果:接受不同治疗的小鼠体内肿瘤质量明显不同,未治疗组为(5.3±0.8) g, 单纯DC组(4.5±0.7) g,单纯放疗组(2.8±0.3) g, DC联合放疗组(1.1±0.7) g, 经Wilcoxon-Mann-Whitney秩和检验,DC联合放疗组与单纯治疗组和对照组之间差异均有统计学意义,P<0.01.DC联合放疗组肿瘤组织中抗凋亡蛋白Bcl-2表达下调,促凋亡蛋白Bax表达上调.结论:瘤内注射DC联合放疗比单一方法明显提高抑制Renca肾癌细胞在BALB/c小鼠的生长,其增效作用涉及肿瘤细胞的凋亡机制. 黄建华 吕海燕 张爱群 王瑶 郭佳 扬军 马林 李峤关键词:原癌基因蛋白质类 免疫印迹法 放射线治疗对小鼠肾癌肿瘤坏死因子-α表达的影响 被引量:1 2009年 目的:观察放射治疗对BALB/c小鼠肾癌抑制作用及对TNF-α表达的影响。方法:用Renca肾癌细胞制作BALB/c小鼠皮下移植瘤模型,放疗组小鼠在种瘤第12~16天,连续5d进行肿瘤局部放射,第28天处死小鼠,取肿瘤组织测量,分析治疗效果。体外培养2×106Renca肾癌细胞,经20GyX射线单次照射培养24h后,收获细胞。提取细胞和肿瘤组织蛋白,免疫印迹法检测治疗后肿瘤组织和细胞中TNF-α蛋白的表达水平。结果:放射治疗组有效抑制肾癌细胞在BALB/c小鼠体内生长,局部放疗明显增加了肿瘤组织内TNF-α表达水平,体外培养的Renca肾癌细胞经放射线处理后TNF-α表达明显上调。结论:放射线能够促进肿瘤细胞分泌TNF-α,并且与肿瘤局部产生的TNF-α表达上调密切相关。 吕海燕 黄建华 王瑶 郭佳 郭业磊 俞伟 马林关键词:肾肿瘤 放射疗法 肿瘤坏死因子-Α 小鼠树突状细胞亚群与T细胞关系的研究进展 被引量:4 2006年 树突状细胞(dendritic cells,DCs)是目前已知机体内功能最强的专职性抗原提呈细胞,其最大特点是能够显著刺激初始型T细胞(naive T cells)增殖,是机体免疫反应的始动者。近年来,随着对小鼠DCs研究的不断深入开展,本文在此对DCs亚群与T细胞之间相互关系的研究取得的进展综述如下。 郭佳 黄建华关键词:树突细胞 T淋巴细胞 小鼠