国家自然科学基金(81070500) 作品数:12 被引量:64 H指数:4 相关作者: 余章斌 韩树萍 朱春 郭锡熔 胡晓山 更多>> 相关机构: 南京医科大学 徐州市中心医院 徐州市妇幼保健院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省医学重点人才培养基金 南京市医学科技发展项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
1岁以下小儿不典型川崎病的诊断与治疗 被引量:6 2014年 目的探讨1岁以下小儿不典型川崎病的诊断与治疗方法。方法选取2009年1月~2013年12月在本院心内科进行住院治疗的不典型川崎病患者共60例,男39例,女21例,年龄均<1岁。另选择同期治疗的典型川崎病患者30例作为对照组,月龄(9.8±0.1)个月,比较两组患者临床表现差异,影像学和实验室诊断差异,观察治疗效果。结果60例不典型川崎病患者,均符合诊断标准中I项人数为6例,符合2项人数为30例,符合3项人数为20例,符合4项人数为3例,符合超过4项者1例。心脏彩超结果发现,心脏血流异常38例(63.3%),冠脉扩张43例(71.6%),冠状动脉增厚17例(28.3%);X线片结果显示,肺纹理增粗35例(58.3%),肺野斑点12例(20,0%),其他13例(21.7%)。通过一段时间的治疗后发现,0.5~5d均发热消退;心脏彩超检测显示,冠脉扩张人数降低到13例(21.6%),与治疗前比较有显著性差异(x^2=4.13,P=0.035);超声心动图显示冠状动脉均有不同程度的恢复;X片显示肺纹理增粗和肺野斑点人数明显下降,与治疗前比较有显著性差异(x^2=8.06,P=0.001);实验室检查各项指标均有明显改善,与治疗前比较有显著性差异(P<0.05),患儿平均住院(9.1±1.2)d。结论1岁以下不典型川崎病患儿的临床表现不明显,与典型川崎病具有明显区别,通过影像学和实验室检测可以辅助诊断。经过治疗后,可以达到较好的治疗效果。 孙军 王娟 余章斌关键词:不典型川崎病 基因表达谱芯片筛选室间隔缺损胎儿心肌组织差异表达基因 被引量:7 2011年 目的利用基因芯片技术观察室间隔缺损(VSD)胎儿心肌组织基因谱表达的变化,对其可能的分子机制进行初步分析。方法病例组为孕中期VSD胎儿,对照组为同胎龄无心脏畸形的难免流产的胎儿,取胎儿心室心肌组织,提取其总RNA,采用安捷伦4×44k人全基因组表达谱芯片观察其心肌组织基因表达谱的变化,对基因芯片数据进行处理和生物信息学分析,差异基因信号通路分析,并用实时PCR方法验证芯片结果。结果芯片筛选发现VSD胎儿心肌组织与正常胎儿心肌组织差异表达基因1 490个,表达差异2倍、3倍、4倍以上的基因数分别为1 314个、157个、19个;信号通路分析差异基因得到18个具有统计学意义的信号通路,其中包括与心脏发育密切相关的信号通路,如:Notch、PI3K/AKT、MAPK信号通路;随机挑选表达差异的5个基因进行验证,结果表明定量PCR检查结果与芯片筛选结果基本相符。结论 VSD胎儿心肌组织与正常胎儿心肌组织差异表达基因与心脏发育密切相关的信号通路(Notch、PI3K/AKT、MAPK信号通路)有关,这为先天性心脏病发生机制的研究奠定了良好的基础。 余章斌 韩树萍 朱春 董小玥 郭锡熔关键词:室间隔缺损 心肌组织 基因芯片 miR-19b转基因小鼠的构建及表型分析 被引量:2 2013年 目的:构建心肌细胞特异性过表达miR-19b的转基因小鼠,并对其进行表型分析。方法:先确定载体插入的酶切位点,根据CloneEZRPCR Cloning Kit重组原理设计相应引物,以小鼠基因组为模板克隆出带有miR-19b前体序列(pre-miR-19b)的目的片段,利用重组酶连接到带有alpha-MHC启动子的载体上。将所得载体线性化后,采用显微注射方法注射到小鼠胚胎干细胞内。再将所得的重组胚胎干细胞移植入假孕的C57BL/6J雌鼠子宫内,在所得的子代,即Founder小鼠中采用特异的引物鉴定出转基因小鼠,并选出相应的品系,进行表型分析。结果:成功构建miR-19b转基因小鼠,且miR-19b转基因小鼠舒张期室间隔厚度、舒张期左室游离壁厚度以及射血分数均有升高。结论:心肌特异性过表达miR-19b可以导致心脏肥大。 胡晓山 余章斌 李萌萌 朱金改 朱春 韩树萍关键词:转基因小鼠 心脏肥大 心血管疾病 长链非编码RNAs与心脏发育及心血管系统相关疾病的关系 被引量:1 2014年 长链非编码RNAs(lncRNAs)是生物体内转录本长度超过200 nt的RNA分子,它们并不编码蛋白,但参与了X染色体沉默,基因组印记以及染色质修饰,转录激活,转录干扰以及核内运输等多种重要的调控过程。近年研究表明,lncRNAs与心脏发育及心血管系统相关疾病密切相关,一些特异的lncRNAs有可能为心血管系统相关疾病的诊断和治疗提供新的靶点和研发新的药物。 刘雪华 余章斌关键词:心脏发育 孕期母血清miRNA-19b诊断胎儿先天性心脏病的初步评价 被引量:1 2015年 目的探讨孕期母血清miRNA在胎儿先天性心脏病(CHD)诊断中的临床价值。方法选取2009年7月-12月27例我院孕中期CHD胎儿孕妇为研究对象,同时收集27例与病例组在孕妇年龄、胎儿孕周基本匹配的胎儿无畸形的孕妇作为对照组,采用Real—timePCR检测miRNA-19b的表达水平,采用ROC曲线下面积(are aunder the curve,AUC),对miRNA-19b诊断CHD胎儿的准确性进行初步评价。结果通过检测孕期母血清miRNA-19b的表达水平,结果表明胎儿CHD病例组孕妇血清miRNA-19b水平显著高于对照组(P〈0.01),对miRNA-19b预测胎儿CHD的准确性进行分析,结果表明AUC分别为0.79。结论孕期母血清miRNA-19b可以预测胎儿CHD的发生风险,作为胎儿CHD的诊断标志物。 沙莉 朱莎莎 余章斌 韩树萍关键词:诊断标志物 基于表达谱芯片和下一代测序技术筛选先天性心脏病胎儿心肌组织差异表达的miRNA 被引量:2 2011年 目的 联合采用表达谱芯片和下一代测序技术同时高通量筛选先天性心脏病胎儿心肌组织表达差异的miRNA.方法 实验组为孕中期先天性畸形胎儿,对照组为同胎龄无心脏畸形的难免流产的胎儿,取胎儿心室心肌组织,联合采用Agilent Human 2.0 microRNAs表达谱芯片和SOLiD下一代测序技术同时观察心肌组织microRNA的表达变化,数据采用生物信息学方法进行分析,并用实时PCR方法验证芯片结果.结果 通过差异miRNA筛选,发现先天性心脏畸形组在表达谱芯片和下一代测序中共同差异的24个miRNA,生物信息学预测到1 606个靶基因,靶基因Gene Ontology分析表明其中与细胞进程、代谢过程、生物调控相关的靶基因为主,Pathway显著性分析表明,部分靶基因为生物信号通路中的关键因子;随机挑选共同表达差异的4个miRNA进行验证,结果表明定量PCR检测结果与芯片与下一代测序共同筛选结果基本相符.结论 这些在先天性心脏病中异常表达的miRNA为研究先天性心脏病分子水平上的发病机制提供了重要的线索,将有可能为心脏相关疾病的诊断和治疗提供新的靶点和研发新的药物. 余章斌 韩树萍 白云飞 朱春 董小玥 郭锡熔关键词:先天性心脏病 微小RNAS 微小RNA与磷酸肌醇-3激酶/蛋白激酶B信号通路在心脏发育中的作用 2012年 微小RNA具有调控细胞增殖、分化和生物体生长发育等功能。磷酸肌醇.3激酶/蛋白激酶B信号通路在细胞增殖、分化和器官组织发育也起重要作用。了解微小RNA与磷酸肌醇-3激酶/蛋白激酶B信号通路分别在心脏发育中的作用及两者之间关系将有助于进一步地阐述心脏发育畸形及其相关疾病的发病机制。 余章斌 郭锡熔关键词:微小RNA 信号通路 心脏发育 miR-19b沉默对P19细胞分化及线粒体功能的影响 被引量:2 2015年 目的:通过沉默微小RNA-19b(miR-19b)研究miR-19b对P19细胞分化及线粒体功能的影响。方法:转染miR-19b沉默质粒与空载质粒进入P19细胞建立起稳定的细胞系;线粒体功能分析用以检测细胞凋亡;诱导分化P19细胞,实时定量荧光PCR检测miR-19b沉默后细胞分化关键基因表达水平。结果:Target Scan 5.1软件及双荧光素酶报告基因系统共同证实,Wnt1为miR-19b在P19细胞中发挥作用的靶点(P<0.05);测定第0、4、6、8、10、12天c Tn T、NKX2.5、GATA4等基因的核酸表达量显示,心肌分化相关标志基因逐渐增高,miR-19b沉默组明显低于对照组(P<0.05);于分化第10天检测线粒体功能,发现miR-19b沉默组线粒体DNA拷贝数的相对含量高于对照组,其活性氧水平显著低于对照组,ATP水平也高于对照组(均P<0.05)。结论:miR-19b沉默可抑制细胞凋亡,抑制心肌细胞分化。 刘雪华 朱莎莎 余章斌 朱春 李萌萌 韩树萍 胡晓山 朱金改 彭宇竹关键词:P19细胞 线粒体 分化 早期综合护理对妊娠期糖尿病患者血糖的影响 被引量:37 2015年 目的观察早期综合护理干预对妊娠期糖尿病产妇血糖控制的影响。方法选取120例患有妊娠期糖尿病患者作为研究对象,随机将患者分为对照组60例和观察组60例。对照组患者给予合理使用胰岛素治疗和产科常规护理;观察组患者在给予合理使用胰岛素治疗和产科常规护理的基础上,对其增加饮食、运动和心理辅导等综合护理措施。在对干预后4周、8周和12周时的空腹血糖(FPG)、餐后2h血糖(2hPG)和糖化血红蛋白(HbA1c)水平进行观察和分析。结果在干预4周、8周和12周后两组患者FPG、2hPG和HbA1c水平均较干预前下降,差异均有显著统计学意义(P<0.05)。同时发现,干预后对应时间点观察组患者FPG、2hPG和HbA1c水平较对照组更低,差异均有显著统计学意义(P<0.05)。结论早期综合护理干预对控制妊娠期糖尿病患者的血糖有较好的临床意义,有一定的推广应用价值。 耿中群 刁雪芹 曹海伟 张志敏 余章斌关键词:早期综合护理干预 妊娠期糖尿病 空腹血糖(FPG) MicroRNA-19b过表达通过Wnt/β-catenin通路对P19细胞的影响 被引量:4 2014年 目的MicroRNA(miR)-19b是通过芯片筛选出与心脏发育高度相关的-种miRNA,本研究旨在研究miR-19b通过Wnt/β-catenin信号通路对P19细胞的影响。方法生物信息学软件预测miR-19b潜在靶基因;双荧光素酶报告基因验证miR-19b是否作用于Wnt的预测靶点;脂质体2000转染miR-19b过表达质粒与空载质粒进入P19细胞;CCK-8法检测细胞增殖活性;磷脂酰丝氨酸外翻分析检测细胞凋亡;Westernblot检测Wntl表达水平;实时定量-聚合酶链反应(PCR)检测miRNA-19b表达水平。结果TargetScan5.1软件预测Wntl为miR-19b在P19细胞中发挥作用的潜在靶点,双荧光素酶报告基因进行了验证,miR-19b过表达显著降低了靶基因Wnt的活性(P〈0.05);miR-19b过表达降低了wnt信号通路中Wntl和B—catenin的表达水平,两者水平表达一致,于第2天至第10天均有统计学差异(P均〈0.05)。与空载对照组相比,miRNA-19b可促进P19细胞的增殖(各时间点P〈0.05),并且抑制其凋亡(P〈0.05)。结论miR-19b可能通过Wnt/β-catenin信号通路促进P19细胞的增殖,抑制凋亡,为其以后用于心脏发育的进一步研究奠定基础。 刘雪华 秦大妮 朱莎莎 李萌萌 余章斌 韩树萍 胡晓山 朱金改 朱春 彭宇竹关键词:MICRORNA P19细胞 WNT通路