江苏省高校自然科学研究项目(10KJA530014)
- 作品数：2 被引量：9H指数：1
- 相关作者：韦萍徐虹姚忠王浩琦杨敬更多>>
- 相关机构：南京工业大学更多>>
- 发文基金：江苏省高校自然科学研究项目国家重点基础研究发展计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：化学工程生物学更多>>
- Ca^(2+)对枯草芽孢杆菌γ-谷氨酰转肽酶活性和热稳定性的影响被引量：1
- 2011年
- γ-谷氨酰转肽酶(γ-glutamyltranspeptidase,GGT)可将γ-谷氨酰基从酰基供体催化转移至相应的受体上,形成新的γ-谷氨酰基化合物。今针对GGT稳定性差的缺陷,采用添加Ca2+的方法对其进行稳定化。研究了Ca2+对枯草芽孢杆菌GGT活性及热稳定性的影响。以4 mmol·L-1 CaCl2于37℃下处理30 min后,GGT的热稳定性得到了显著改善,且随温度升高Ca2+处理的效果更明显;测定了Ca2+处理后GGT酰基化反应动力学常数Km、Vmax和反应活化能Ea,其值分别为0.23 mmol·L-1,0.015 mmol·L-1·min-1和10.50 kJ·mol-1。与未经Ca2+处理时相比,酰基化反应米氏常数和反应活化能显著降低;GGT的失活反应活化能Ed为60.47 kJ·mol-1,与未加Ca2+时(50.42 kJ·mol-1)相比明显提高。表明Ca2+能提高GGT的活性和热稳定性,有效缓解酶的受热失活。
- 宋希文肖彦羚周治姚忠徐虹韦萍
- 关键词：Γ-谷氨酰转肽酶热稳定性CA2+反应动力学活化能
- 介孔二氧化钛固载γ-谷氨酰转肽酶的制备及性质被引量：8
- 2011年
- γ-谷氨酰转肽酶(GGT)在临床诊断和生物催化方面具有重要的应用价值。本文以介孔氧化钛晶须为载体进行GGT的固定化,考察了载体结构特性、吸附时间和给酶量对固定化效果的影响,并对固定化酶的催化特性及其稳定性进行了研究。结果显示,以最可几孔径为30nm的介孔TiO2为载体,载体载酶量可达5.07mg·g-1。在给酶量为18.99 U·g-1时,经室温吸附2.5h,固定化酶活性回收率可达73.05%。固定化酶的pH稳定性和热稳定性均显著优于游离酶,在4℃下保温贮藏60d、转化22个批次后,固定化酶活力仍可保持初始值的71.30%。经测定,游离酶和固定化酶的米氏常数Km分别为0.79mmol·L-1和1.05mmol.L-1,酰基化反应活化能分别为13.59 kJ·mol-1和15.42 kJ·mol-1;固定化GGT的失活反应活化能Ed为92.80 kJ·mol-1,相比于游离酶(49.61 kJ·mol-1)有明显的增加。
- 秦丹华姚忠王浩琦肖易凡杨敬徐虹韦萍
- 关键词：Γ-谷氨酰转肽酶固定化介孔二氧化钛酶学性质
