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艾灸对实验性类风湿性关节炎家兔滑膜组织NLRP3炎性小体激活因素Cathepsin-B 、ROS水平的影响 被引量:11 2022年 目的观察艾灸对类风湿性关节炎(RA)的抗炎消肿作用,研究艾灸对实验性RA家兔滑膜NLRP3 mRNA、组织蛋白酶B (Cathepsin-B )mRNA的表达和活性氧(ROS)含量的影响,探索艾灸对RA中NLRP3炎性小体激活状态的影响。方法日本大耳白兔24只,按体质量、性别分层,随机分为空白对照组(简称空白组)、RA模型组(简称模型组)、艾灸治疗组(简称艾灸组),每组8只。将弗氏完全佐剂(FCA)按0.5 mL/kg体质量剂量注入模型组、艾灸组动物双膝关节腔内。同法将等量的无菌生理盐水注入空白组动物作为对照。艾灸治疗艾灸组动物双侧“肾俞”“足三里”,每穴各5壮,每日1次。6 d为1个疗程,共治疗3个疗程,疗程之间休息1 d。治疗后观测各家兔左、右膝关节周长,治疗后第21天进行膝关节滑膜组织取材,采用RT-PCR法检测各组家兔膝关节滑膜组织中NLRP3 mRNA、Cathepsin-B mRNA的表达;采用ROS检测试剂盒检测各组家兔膝关节滑膜组织中ROS的含量。结果造模后白兔双膝关节周长较空白组明显增高(P<0.01);艾灸治疗后白兔双膝关节周长较模型组显著下降(P<0.05)。与空白组比较,模型组的NLRP3 mRNA、Cathepsin-B mRNA的表达和ROS荧光强度均显著升高(P<0.01);而与模型组比较,艾灸组的NLRP3 mRNA、Cathepsin-B mRNA的表达和ROS荧光强度均降低明显(P<0.05)。结论艾灸对实验性RA家兔膝关节滑膜炎症过程具有明显的抑制作用;艾灸“肾俞”“足三里”穴通过下调Cathepsin-B 的表达和抑制ROS的生成从而抑制NLRP3的激活可能是艾灸治疗RA改善其病理过程的机制之一。 陈俊 刘华辉 路晓清 席东来 王燚 杨慎峭 周海燕 马文彬 吴菲 杨馨关键词:NLRP3 艾灸 类风湿性关节炎 CATHEPSIN-B ROS 基于NLRP3炎性小体通路探讨电针对急性痛风性关节炎大鼠组织蛋白酶B 的影响 被引量:19 2021年 目的:观察电针对大鼠膝关节滑膜中组织蛋白酶B (Cathepsin-B )的影响,探讨电针治疗急性痛风性关节炎的机制。方法:60只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、药物组和电针组,每组15只。采用左膝关节腔注射0.2 mL尿酸钠晶体混悬液法建立急性痛风性关节炎大鼠模型。药物组予秋水仙碱灌胃治疗(0.3 mg·kg^(-1)·d^(-1)),电针组予左侧"三阴交""足三里"电针治疗,10 min/次,1次/d,共1周。用Coderre步态分级标准对各组大鼠进行步态评分;HE染色观察大鼠左膝关节滑膜组织的形态学变化;Western b lot法检测大鼠左膝关节滑膜Cathepsin-B 的表达;实时荧光定量PCR法检测大鼠左膝关节滑膜组织中NOD样受体蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-18 mRNA的表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠左膝关节滑膜有明显炎性浸润,步态评分以及Cathepsin-B 蛋白和NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β、IL-18 mRNA表达水平显著增高(P<0.01)。与模型组比较,药物组炎性浸润程度较轻,电针组稍次之;药物组和电针组步态评分以及Cathepsin-B 蛋白和NLRP3、 ASC、Caspase-1、IL-1β、IL-18 mRNA表达水平均显著降低(P<0.01,P<0.05)。与药物组比较,电针组Caspase-1、IL-18 mRNA表达水平增高(P<0.05)。结论:电针可能是通过降低膝关节滑膜中Cathepsin-B 的活性来抑制NLRP3炎性小体的激活,从而治疗急性痛风性关节炎。 谯童茜 唐成林 邱丽 赵丹丹 吴梦佳 安荟羽 马翔 万小凤关键词:急性痛风性关节炎 电针 组织蛋白酶B 醒脑静注射液对急性心肌梗死患者血清中IL-1β、TGF-β1、溶酶体酶Cathepsin-B 的含量影响研究 被引量:1 2016年 目的:探讨醒脑静注射液对急性心肌梗死患者血清中IL^(-1)β、TGF-β1、溶酶体酶Cathepsin-B 的含量的影响。方法:收集安丘市人民医院收治的急性心肌梗死患者60例,随机分为对照组和实验组,各30例,对照组患者给予西医常规治疗,实验组患者在对照组基础上给予醒脑静注射液静滴,两组均治疗2周,治疗前后,对所有患者的血清TGF-β1、IL^(-1)β、Cathepsin-B 、CRP含量、血浆D-D、FIB 水平及心功能进行检测。结果:治疗后,与对照组比较,1实验组患者的血清IL^(-1)β、TGF-β1含量明显较低,差异具有统计学意义(P<0.05);2实验组患者的血清Cathepsin-B 含量明显较低(P<0.05);3实验组患者的血清CRP含量明显较低(P<0.05);4实验组患者的血浆D-D、FIB 含量明显较低(P<0.05);5实验组患者的LVEF明显较高,LVEDd和LVESd均明显较低(P<0.05)。结论:醒脑静注射液能够显著降低急性心肌梗死患者血清TGF-β1、IL^(-1)β、Cathepsin-B 、CRP含量及血浆D-D、FIB 水平,改善患者的心功能,对临床有指导意义。 高树霞关键词:醒脑静注射液 急性心肌梗死 IL-1Β TGF-Β1 CATHEPSIN-B Preliminary research on the pathological role of cathepsin -B in sub cutaneous heteroplastic pancreatic carcinoma in nude mice 被引量:4 2009年 B ackground Cathespin-B (cath-B ) is an important proteolytic enzyme involved in the disease course of invasion in many types of cancer. Cath-B expression in sub cutaneous heteroplastic pancreatic carcinoma in nude mice has not b een studied. We investigated the role of cath-B in a model of heteroplastic pancreatic carcinoma in B ALB /c nude mice. Methods Thirty-two six-week-old female B ALB /c nude mice were equally divided into four groups. PANC-1 cells were inoculated sub cutaneously in the left axillary region. B esides volume, weight of sub cutaneous tumor, and change in b ody weight, cath-B expression in each group was measured b y immunohistochemical staining, PCR and Western b lotting. Its relationship to microvessel density (MVD), CD44v6, and placenta growth factor (PLGF) was also examined. CA-074Me, a specific inhib itor of cath-B , was injected intraperitoneally (i.p.) at different stages of tumor growth in group B and C. Gemcitab ine (GEM), was also injected (i.p.) in group D to compare anti-tumor efficacy with CA-074Me. Results Expression of cath-B at different levels was related to tumor growth, MVD, and PLGF expression. In group A (control group), cath-B expression was enhanced more than that seen in other groups. CA-074Me clearly inhib ited cath-B expression and tumor growth in group B . There was no difference b etween group C and D with respect to anti-tumor effect. Conclusions Cath-B correlates with the growth and angiogenesis of tumors, b ut not with the adhesion induced b y CD44v6. CA-074Me clearly inhib ited cath-B expression and demonstrated an anti-neoplastic and anti-angiogenesis effect. ZHANG Chong SUN Jia-bang LIU Da-chuan CUI Ye-qing LIU Shuang SUN Hai-chen关键词:CATHEPSIN-B 大鼠脑外伤后溶酶体酶Cathepsin-B 和D的表达 被引量:12 2006年 目的研究大鼠脑外伤后溶酶体酶cathepsin -B 和-D是否被激活及其不同时段表达变化,阐述其与凋亡执行因子caspase-3表达的关系,并探讨对脑外伤诊断及形成时间的意义。方法采用自由落体打击法建立脑外伤动物模型,并对模型及对照样本进行免疫荧光、双标和激光共聚焦检测,结果用SPSS10.0软件处理。结果脑外伤后1hcathepsin -B 表达即增加,4~8d达高峰,脑外伤后32d仍处于高表达水平;cathepsin -D的表达于脑外伤后12h增加,4~8d达高峰,32d的表达仍然高于12h的表达水平。脑外伤初期,cathepsin -B 和-D阳性细胞与caspase-3阳性细胞重叠较少,脑外伤后6h开始增加,32d仍然有很多阳性细胞重叠。结论脑外伤后cathepsin -B 和-D被激活,其激活在脑外伤早期可能抑制细胞凋亡执行因子caspase-3的激活,之后(6h后)则与caspase-3起协同作用,共同促进细胞死亡;cathepsin -B 和-D表达的时程变化对于脑外伤的法医学诊断和中晚期的时间推断有参考意义。 张延波 陈溪萍 陶陆阳 秦正红 李生兴 杨丽 杨菊 张运阁 刘冉关键词:溶酶体 苏云金芽胞杆菌Cry毒素蛋白抗蚜活性评价及其作用机理研究 苏云金芽胞杆菌(B acillus thuringiensis,B t)在其芽胞形成阶段产生的Cry毒素,是一类对多种农林害虫具有特异杀虫活性的毒素蛋白。cry基因已被广泛用于构建抗虫转基因作物,成为农业生产中防治鳞翅目、鞘... 张斌武关键词:苏云金芽胞杆菌 CATHEPSIN-B 共生菌 大鼠脑缺血再灌注后溶酶体组织蛋白酶B 表达的动态变化 被引量:2 2009年 目的:探讨大鼠脑缺血再灌注后溶酶体组织蛋白酶B (Cathepsin-B ,CB )在不同时段表达变化。方法:将60只SD大鼠随机分为正常组(10只),假手术组(10只)和脑缺血再灌注组(40只),线栓法制备大脑中动脉梗死模型(MCAO),免疫组化和RT-PCR法分别检测Cathepsin-B 的蛋白和mRNA表达。结果与正常组和假手术组比较,模型组大鼠脑缺血再灌注后1hCathepsin-B 的蛋白和mRNA表达明显增强,6h达高峰,48h仍保存高水平。结论:Cathepsin-B 在大鼠脑缺血再灌注后表达增强,可能在神经元凋亡中发挥着重要的作用。 龚晓燕 张智博 刘柳青 彭旭 陈本阳关键词:脑缺血再灌注 溶酶体 大鼠脑外伤后自噬/溶酶体途径相关蛋白表达的研究 目的:研究自噬/溶酶体途径在脑外伤后激活情况,并对其在神经损伤修复中的作用进行探讨。
方法:采用自由落体法建立大鼠脑外伤(traumatic b rain injury,TB I)模型,透射电镜法观测损伤区及其周边... 张延波关键词:脑外伤 溶酶体酶 神经损伤修复 CATHEPSIN-B 文献传递 SiRNA下调组织蛋白酶B 抑制甲状腺乳头状癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力 2025年 目的探究小干扰RNA下调组织蛋白酶B (Cathepsin B ;CTSB ;CB )对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞的增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法将TPC-1细胞分成空白对照组、SiRNA-1组(转染CB -siRNA-1);SiRNA-2组(转染CB -siRNA-2);SiRNA-3组(转染CB -siRNA-3);NC组(转染NC-siRNA),通过Western b lot法检测CB 表达;通过CCK-8、平板单克隆实验、细胞划痕实验及Transwell实验检测细胞增殖、迁移及侵袭能力。结果Western b lot结果显示,实验组CB 表达较空白组及阴性对照组明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。沉默CB 后细胞增殖、迁移及侵袭能力明显减弱,差异有统计学意义(P<0.05)。结论本实验证实利用SiRNA沉默CB 后,TPC-1细胞的增殖、迁移及侵袭能力明显减弱,说明CB 可能成为PTC基因治疗的有效靶点。 黄婷婷 孙坚皓 杜君慧 吕艳春 孙琳琳 张凤英关键词:甲状腺乳头状癌 组织蛋白酶B 增殖 迁移 组织蛋白酶B /NLRP3通路对LPS诱导巨噬细胞M1/M2极化的影响 2025年 目的:评价组织蛋白酶B (CTSB )/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)通路对LPS诱导巨噬细胞极化的影响。方法:体外培养生长状态良好的RAW264.7小鼠单核巨噬细胞系,根据随机数字表法分为3组(n=6):对照组(C组)、LPS组(L组)、LPS+CA074-me(CTSB 抑制剂)组(B 组)。C组常规培养24 h,L组加入LPS浓度为1μg/ml的培养基培养24 h,B 组在LPS诱导前予以CTSB 抑制剂CA074-me 30μmol/L预处理1 h后在含LPS 1μg/ml的培养基中共培养24 h。24 h后通过显微镜观察细胞形态变化,通过采用ELISA法测定上清液IL-1β、IL-18的浓度,Western b lot检测细胞中组织蛋白酶B 前体(pro-CTSB )、成熟组织蛋白酶B (mature-CTSB )、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1(caspase-1)的表达,采用qRT-PCR法检测细胞CD32、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶1(Arg-1)、CD206 mRNA表达水平,流式细胞术检测M1型巨噬细胞表面标志物CD86和M2型巨噬细胞表面标志物CD206阳性表达率。结果:与C组相比,L组和B 组细胞形态均改变,细胞变大并出现伪足,细胞上清液中IL-1β、IL-18浓度均上升,pro-CTSB 、mature-CTSB 、NLRP3、ASC和caspase-1表达升高,CD32、iNOS mRNA表达上调,CD86阳性率、CD206阳性率均上升(P<0.01),B 组Arg-1、CD206 mRNA表达上调(P<0.01);与L组相比,B 组细胞伪足减少,形态更接近C组,细胞上清液中IL-1β、IL-18浓度下降,mature-CTSB 、NLRP3、ASC和caspase-1表达降低,CD32、iNOS mRNA及CD86阳性率下降,pro-CTSB 表达、Arg-1、CD206 mRNA表达及CD206阳性率升高(P<0.01)。结论:抑制CTSB /NLRP3通路能够减轻炎症反应,减少LPS诱导的RAW264.7细胞向M1型巨噬细胞极化,促进其向M2型巨噬细胞极化。 王宜博 代玉婷 蔡江晓 李忠林 秦伟伟 孙立新 韩伟关键词:组织蛋白酶B 脂多糖类 巨噬细胞