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- 利用离心种植构建组织工程膀胱的方法
- 本发明提供了一种利用离心种植构建组织工程膀胱的方法。该方法包括:利用离心种植设备制备膀胱脱细胞基质‑种子细胞悬浮液结构;将膀胱脱细胞基质‑种子细胞悬浮液结构放置于离心机中,离心机按照指定转速离心运转指定时间;将离心后的膀...
- 符伟军
- 一种改良的组织工程膀胱支架材料及其制备方法
- 本发明提供了一种改良的组织工程膀胱支架材料及其制备方法,该方法利用天然生物材料及合成纳米材料,在组织工程膀胱制备中增加细胞粘附,促进细胞有序形成组织。具体是以猪膀胱黏膜层去细胞基质作为基本的组织工程膀胱支架材料,在猪膀胱...
- 田虹郭婷婷祁娜李文娇
- 灌注脱细胞系统制备全膀胱脱细胞基质并联合脂肪干细胞构建组织工程膀胱的研究
- 2023年
- 目的应用自行设计的灌注脱细胞系统制备全膀胱脱细胞基质(BAM),并探讨采用脂肪干细胞(ADSCs)构建组织工程膀胱的可行性。方法本研究于2020年10月至2021年4月进行。采用自行设计的膀胱灌注脱细胞系统,按照灌注液流动方向和不同脱细胞液作用时间的不同,制订4种不同的脱细胞方案(分别为A、B、C、D组)。其中A组和B组均以膀胱组织的尿道口作为灌注液的流出道,C组和D组剪去膀胱顶部部分组织以膀胱顶部开口作为灌注液的流出道。A组和C组采用1%Triton X-100作用6 h,1%十二烷基硫酸钠(SDS)作用2 h;B组和D组采用1%Triton X-100作用7 h,1%SDS作用1 h。另设正常膀胱组作为对照,其组织为直接取材的天然膀胱组织,不需要灌注和冷冻保存。通过HE、DAPI、Masson三色染色和阿尔新蓝染色,以及试剂盒定量分析以筛选出快速且高效的脱细胞方案,制备全膀胱支架。以制备的BAM为支架材料,ADSCs为种子细胞构建组织工程膀胱,HE和DAPI染色观察ADSCs在BAM上的分布情况。结果HE和DAPI染色结果显示C组未见明显的细胞核残留,Masson三色染色和阿尔新蓝染色结果表明C组的胶原结构和糖胺聚糖得到较好保留。C组膀胱壁厚度与正常膀胱组[(975.44±158.62)μm与(1064.49±168.52)μm]差异无统计学意义(P>0.05)。C组DNA含量[(43.59±4.59)ng/mg]明显低于正常膀胱组、A组、B组和D组[分别为(532.50±26.69)、(135.17±6.99)、(182.49±13.69)、(84.00±4.38)ng/mg],差异均有统计学意义(P<0.05)。C组胶原含量[(10.98±0.29)μg/mg]和糖胺聚糖含量[(2.30±0.18)μg/mg]与正常膀胱组[(11.69±0.49)μg/mg和(2.36±0.09)μg/mg]比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。扫描电镜检查结果显示A~D组制备的BAM表面可见大量的孔隙结构,利于细胞黏附。分离培养ADSCs,流式细胞术鉴定证实CD90和CD29阳性表达,CD45和CD106阴性表达。活/死细胞双染色法和CCK-8检测证实C组制备的BAM无细胞毒性�
- 肖树伟符伟军王鹏超赵健凌争云安子彦符舟洋张旭
- 关键词:膀胱膀胱脱细胞基质脂肪干细胞
- 双层蚕丝支架复合脂肪干细胞构建的组织工程膀胱补片用于膀胱修复重建的效果
- 2022年
- 目的探讨双层蚕丝支架复合脂肪干细胞(ADSCs)构建的组织工程膀胱补片在膀胱修复重建中的效果。方法2020年5月至2021年3月利用家蚕蚕茧获得丝素蛋白(SF)水溶液,制备由丝素蛋白膜和丝素蛋白海绵组成的双层蚕丝支架。分离培养大鼠ADSCs,并对ADSCs表面标志物(CD29、CD90、CD45、CD106)进行流式细胞鉴定。将ADSCs种植在双层蚕丝支架上构建组织工程膀胱补片。将36只雄性SD大鼠按随机数字表法分为组织工程膀胱补片组(SF-ADSCs组,15只)、双层蚕丝支架组(SF组,15只)、对照组(6只)。SF-ADSCs组和SF组分别将组织工程膀胱补片和双层蚕丝支架包埋于大鼠的大网膜,以促进移植物血管化。包埋7 d后,两组分别处死3只大鼠,行HE和免疫荧光染色检查评估血管化情况。SF-ADSCs组(12只)和SF组(12只)于膀胱顶部切除超过50%的膀胱组织,保留三角区和输尿管开口,分别采用大网膜包埋后的组织工程膀胱补片和双层蚕丝支架修补膀胱缺损;对照组在充分暴露膀胱组织后随即关闭切口。术后4周,SF-ADSCs组和SF组分别随机取6只大鼠,观察膀胱组织的大体形态,行膀胱造影检查观察膀胱壁形态,移植物取材后行HE和Masson's 3色染色、免疫荧光染色检查观察膀胱壁组织再生情况。术后12周,3组均行尿动力学检查,均行上述检查比较膀胱组织形态学、组织再生情况的差异。结果流式细胞实验结果显示,分离的细胞阳性表达CD29和CD90,未见CD45和CD106显著表达。大体观察和扫描电镜结果证实制备的双层蚕丝支架不仅具备利于细胞种植的孔隙结构,还具备良好的韧性利于手术缝合。大网膜包裹后,SF-ADSCs组血管样结构的数量[(43.50±2.66)个]和面积占比[(0.73±0.03)%]明显高于SF组[(24.50±3.51)个,(0.55±0.05)%],差异均有统计学意义(P<0.05)。膀胱修补术后4周,SF-ADSCs组和SF组移植物组织学染色可见大量双层蚕丝支架降解碎片;术后12周�
- 肖树伟符伟军王鹏超赵健凌争云安子彦符舟洋张旭
- 关键词:膀胱丝素蛋白脂肪干细胞
- 基于生物材料和脂肪间充质干细胞的组织工程膀胱研究
- 研究目的先天性和后天性的膀胱疾病(例如膀胱外翻、神经源性膀胱、恶性肿瘤和外伤等)均有可能导致膀胱解剖性或功能性缺损,常须手术来保护肾脏和膀胱功能,严重的甚至需行膀胱全切尿流改道术,严重影响患者的生活质量。膀胱切除术后的肠...
- 肖树伟
- 关键词:脱细胞基质丝素蛋白脂肪间充质干细胞血管化
- 利用离心种植构建组织工程膀胱的方法
- 本发明提供了一种利用离心种植构建组织工程膀胱的方法。该方法包括:利用离心种植设备制备膀胱脱细胞基质‑种子细胞悬浮液结构;将膀胱脱细胞基质‑种子细胞悬浮液结构放置于离心机中,离心机按照指定转速离心运转指定时间;将离心后的膀...
- 符伟军
- 间充质干细胞在组织工程膀胱中的研究进展
- 2018年
- 组织工程膀胱为泌尿系统的结构和功能重建提供了技术支持,种子细胞的选择为该领域的关键问题.间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)具有极强的体外扩增与多向分化潜能,为一种具有前景的种子细胞来源.本文就MSC在组织工程膀胱中的最新研究进展作一综述.
- 赵峰周六化贾瑞鹏
- 关键词:膀胱间质干细胞
- 组织工程膀胱内形成结石的原因分析及研究进展
- 2017年
- 组织工程膀胱重建是应用合适的支架材料和细胞来源,从而修复或重建器官组织结构和功能,达到改善生活质量,延长生存时间的目的。本文查阅了近年来国内外关于组织工程膀胱中应用、成果等方面的相关文献,分析总结组织工程膀胱内形成结石的原因及研究进展,以期为组织工程膀胱的相关研究提供依据。
- 刘景刚刘致中
- 关键词:膀胱结石种子细胞
- 膀胱无细胞基质负载骨髓间充质干细胞体外构建组织工程膀胱复合物的研究被引量:3
- 2016年
- 目的:探索大鼠膀胱无细胞基质负载骨髓间充质干细胞体外构建组织工程膀胱复合物的可行性。方法:全骨髓贴壁培养法提取大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),物理和酶消化法相结合制备大鼠膀胱无细胞基质(BAMG),将分离纯化的P3代BMSCs接种在BAMG上共同培养构建组织工程膀胱复合物,HE染色观察复合物的细胞生长情况,以P3代BMSCs的单独培养做对照,绘制两组细胞生长曲线图,对比评价BAMG对BMSCs生长有无影响。结果:(1)全骨髓贴壁培养法分离培养的BMSCs经流式细胞仪检测细胞表面标志物CD29、CD44抗原表达阳性,而CD34呈阴性表达。(2)应用物理法和酶消化法相结合成功制备BAMG,HE和扫描电镜均未见细胞残留,具有完整的胶原及纤维结构。(3)BMSCs与BAMG能黏附生长,体外成功构建组织工程膀胱复合物,其生长曲线和对照组基本相同。结论:全骨髓贴壁培养法能简单有效的增殖纯化BMSCs,物理法和酶消化法相结合可以成功制备BAMG,二者体外成功构建组织工程膀胱复合物。
- 高红亮易发现
- 关键词:组织工程膀胱骨髓间充质干细胞膀胱无细胞基质
- 血管内皮生长因子纳米微球-细菌纤维素复合支架与多种细胞构建组织工程膀胱被引量:2
- 2016年
- 背景:传统膀胱修补的方法存在损伤正常器官功能、术后并发症多等问题,组织工程为膀胱修复提供了新的途径。目的:探讨血管内皮生长因子纳米微球-细菌纤维素支架复合兔舌黏膜上皮细胞及舌骨骼肌细胞构建组织工程膀胱的可行性。方法:分别制备细菌纤维素支架与血管内皮生长因子纳米微球-细菌纤维素支架,将兔舌骨骼肌细胞、舌黏膜上皮细胞依次接种至两种支架上。取6只兔,制备膀胱缺损模型,随机分两组,实验组于缺损处植入复合自体舌骨骼肌细胞、舌黏膜上皮细胞的血管内皮生长因子纳米微球-细菌纤维素支架,对照组于缺损处植入复合自体舌骨骼肌细胞、舌黏膜上皮细胞的细菌纤维素支架。植入后3个月进行膀胱造影、尿动力学及组织学检测。结果与结论:(1)造影结果:实验组可见相对完整的膀胱,对照组部分膀胱可见小面积充盈缺损。(2)尿动力学检测结果:两组的最大膀胱容量和膀胱顺应性均较植入前降低,对照组上述尿动力学参数下降幅度显著高于实验组(P<0.05)。(3)组织学检测结果:对照组修复处膀胱组织未能构建出完整的上皮细胞层,其下方仅有少量肌层形成,黏膜下方有少量微血管形成;实验组修复处膀胱组织有完整上皮细胞层形成,可见到黏膜下方有较多肌层形成,黏膜下方有较多量毛细血管形成。(4)结果表明,将血管内皮生长因子纳米微球-细菌纤维素支架与舌骨骼肌细胞、舌黏膜上皮细胞复合可构建组织工程膀胱。
- 张心如鲁文龙冯超吕向国朱卫东
- 关键词:膀胱细菌纤维素血管内皮生长因子舌上皮细胞
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- 陈方

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- 研究主题:儿童 尿道下裂 小儿 干细胞 前列腺癌
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- 作品数:83被引量:234H指数:9
- 供职机构:南京大学医学院附属鼓楼医院
- 研究主题:前列腺癌 肾细胞癌 文献复习 组织工程膀胱 肾细胞
- 戴玉田

- 作品数:337被引量:1,131H指数:16
- 供职机构:南京大学医学院附属鼓楼医院
- 研究主题:勃起功能障碍 阴茎海绵体 糖尿病性勃起功能障碍 阴茎 前列腺癌
- 张玉石

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- 研究主题:嗜铬细胞瘤 副神经节瘤 结节性硬化症 腹腔镜 肾肿瘤
- 李汉忠

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- 研究主题:嗜铬细胞瘤 前列腺癌 副神经节瘤 腹腔镜 肾肿瘤