张伟 作品数:6 被引量:27 H指数:3 供职机构: 赛默飞世尔科技(中国)有限公司 更多>> 发文基金: 国家质检总局科技计划项目 更多>> 相关领域: 生物学 理学 轻工技术与工程 机械工程 更多>>
创新数据非依赖性采集用于复杂基质目标蛋白质的定量分析 被引量:6 2014年 数据非依赖性采集( DIA)是随着定量蛋白质组学而建立的质谱扫描技术。 DIA能够获得扫描范围内所有母离子及二级子离子信息,不会造成低丰度离子信息的丢失,同时突破了高分辨质谱二级定量的通量限制。本研究基于静电场轨道阱Q-qIT-OT三合一质谱,发展了经典DIA方法以及WiSIM-DIA和Full MS-DIA两种全新DIA方法,并对Hela细胞全蛋白中添加的10条低浓度肽段进行定量分析,考察方法的线性、重现性和灵敏度。结果表明,3种方法的定量限均低至amol (14~435 amol),并展示出良好的线性和定性确证可靠性。其中,WiSIM-DIA基于超高分辨一级监测定量,与经典DIA优势互补;Full MS-DIA的选择窗口仅3 amu,能够直接进行搜库鉴定,实现了数据依赖性采集( DDA)和DIA的统一,摆脱了DIA依赖于DDA建立谱图库的局限性。 张伟 Reiko Kiyonami 江峥 陈伟关键词:蛋白质组学 一小时蛋白质组:基于Q-OT-qIT质谱系统的蛋白质组学快速鉴定 被引量:2 2014年 随着“一小时酵母蛋白质组”的实现,短梯度下实现蛋白质组深度覆盖成为可能.利用全新Q-0T-qlT三合一质谱系统进行“一小时蛋白质组”分析与优化.50min有效梯反,单次实验分别从1μg和50 ng HeLa全蛋白中鉴定到20860和14100条肽段,对应到3865和2877个非冗余蛋白,而目前的文献报道至少需要2~3h.同时,考察了Q-OT-qlT碎裂模式、检测方法、最大注入时间和自动增益控制等参数对蛋白质组快速分析的影响,证明了不同采集方法间的互补性,阐述了不同扫描参数对鉴定结果的影响.此外,还讨论了Q-OT-qIT的并列运行原理和扫描组合模式,为不同实验目的和样本类型的蛋白质组快速分析奠定了基础. 张伟 顾培明 江峥 明红 陈伟关键词:蛋白质组学 交联聚乙烯基吡咯烷酮快速前处理方法结合液相色谱-串联质谱分析红葡萄酒中酪蛋白过敏原 被引量:4 2013年 建立了红葡萄酒酪蛋白过敏原的质谱分析方法。选择专一性SRM离子对,建立3种亚型酪蛋白α-S1,α-S2,β的质谱定性与定量方法;利用交联聚乙烯基吡咯烷酮(PVPP)处理红葡萄酒有效提取蛋白,并直接快速酶解,使前处理缩短到2 h以内。结果表明,酪蛋白的回收率提高到80%以上,检出限达10μg/L。 张伟 贺艳 刘伟 吴智渊 江峥 许泓 王勇为 张裕君 郑文杰关键词:红葡萄酒 酪蛋白 前处理 液相色谱-串联质谱 定量蛋白质组学质谱采集技术进展 被引量:16 2014年 质谱是定量蛋白组学的主要工具。近年来随着定量蛋白质组学研究的深入,传统质谱定量技术面临着复杂基质干扰、分析通量限制等诸多问题。而最近一系列质谱新技术的发展,包括同步母离子选择(SPS)、质量亏损标记、平行反应监测(PRM)、多重累积(MSX)和多种全新数据非依赖性采集(DIA)等,为解决目前蛋白质组学在相对定量和绝对定量分析方面的局限提供了有效途径。本文对定量蛋白质组学目前遇到的瓶颈问题进行了分析,总结了质谱定量采集技术的最新进展,并评述了这些新技术的特点以及在定量蛋白质组学应用中的优势。 张伟关键词:定量蛋白质组学 基于静电场轨道阱Orbitrap的蛋白质组学技术突破与应用进展 2013年至今,静电场轨道阱Orbitrap技术不断突破,发展了诸多针对蛋白质组学的创新应用,解决了传统蛋白质组学定性定量的诸多难题。基于Q-OT-qIT三合一(Tribrid)质谱结构的动态扫描管理技术,利用多极离子通... 张伟关键词:ORBITRAP 文献传递