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α-catenin/GST融合蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备被引量：2: 2001年; 目的　制备α catenin多克隆抗体 ,为深入研究其功能和探讨其与肿瘤等疾病的相关性提供工具。方法　PCR扩增编码人α cateninC 端 45 5个氨基酸的DNA片段 ,DNA重组入原核表达质粒pGEX 4T 3,转化大肠杆菌JM10 9菌株 ,异丙基 β D硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导产生GST α catenin融合蛋白。GST Sepharose亲和层析纯化可溶性融合蛋白 ,免疫新西兰白兔 ,制备抗血清。通过ELISA、免疫荧光细胞化学和SP免疫组织化学法鉴定血清特异性和效价。　结果　成功地构建了pGEX 4T 3 α Cat表达载体 ,转化JM10 9后可高效表达融合蛋白GST α catenin(α Cat)。免疫兔产生的α Cat多抗可特异检测人体组织和细胞中α Cat表达及定位情况。　结论　α catenin抗体效价高 ,特异性强 ,适合免疫组织化学。; 马忠良王冰晶林仲翔林本耀张志谦; 关键词：Α-CATENIN 融合蛋白多克隆抗体 GST

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林本耀