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薛征

作品数：1 被引量：0H指数：0
供职机构：中国医学科学院基础医学研究所更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

合作作者

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇体外

机构

  • 1篇山东大学
  • 1篇中国医学科学...

作者

  • 1篇关洪斌
  • 1篇石秉炀
  • 1篇董文吉
  • 1篇杨奔
  • 1篇闫月敏
  • 1篇薛征
  • 1篇王娟
  • 1篇王娟

传媒

  • 1篇医学分子生物...

年份

  • 1篇2010
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶AKT2的体外激酶活性分析
2010年
目的 建立蛋白激酶AKT2体外磷酸化检测体系.方法 构建携带AKT2 cDNA编码区的pLNCX2逆转录病毒重组载体,包装重组病毒,转导293A细胞,G418筛选得到稳定表达组成型活化的AKT2细胞株,应用免疫沉淀获得蛋白激AKT2;将核基质结合蛋白SATB1的1～204的氨基酸序列及其47位丝氨酸的突变体S47A、S47D,分别与GST基因融合表达载体pGEX4T-1进行重组,经测序鉴定后转化大肠埃希菌BL-21,IPTG诱导表达经亲和纯化得到GST-SATB1 1-204、GST-SATB1 1-204 S47A和GST-SATB1 1-204 S47D融合蛋白;利用免疫沉淀的AKT2磷酸化GST-SATB1融合蛋白,应用免疫印迹检测其是否被磷酸化.结果 细胞表达的蛋白激酶AKT2能高效的将野生型SATB1 1-204 磷酸化,而不能磷酸化其两种突变体.结论 成功建立了一个蛋白激酶体外磷酸化系统.
王娟王娟关洪斌闫月敏石秉炀杨奔薛征
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