许永星
- 作品数:1 被引量:3H指数:1
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- 死亡相关蛋白(DAP-5)在庆大霉素诱导的人肾小管上皮细胞凋亡过程中的表达变化及机制被引量:3
- 2015年
- 目的建立庆大霉素诱导人肾小管上皮细胞(HK2)凋亡模型;观察死亡相关蛋白5(DAP5)在HK2凋亡过程中的表达变化,并探讨其与PI3K/Akt/m TOR通路之间的关系。方法以3.2mg/ml庆大霉素作用于HK2,应用琼脂糖凝胶电泳观察凋亡细胞DNA条带,流式细胞仪测定细胞凋亡率。采用Western blotting法观察DAP5与Akt、p-Akt表达的改变,应用雷帕霉素阻断PI3K/Akt/m TOR通路后观察DAP5的表达变化。结果庆大霉素作用24h后HK2细胞即出现凋亡,凋亡率随时间延长而增加,24、36、72h的凋亡率分别为5.9%,23.0%,49.9%(P<0.05)。与此同时,细胞DAP5活化裂解生成DAP5/p86,且表达逐渐增加(P<0.05)。在凋亡的同时p-Akt蛋白的表达水平也逐渐增加(P<0.05),应用雷帕霉素阻断PI3K/Akt/m TOR通路后,裂解产生的DAP5/p86减少(P<0.05)。结论庆大霉素可诱导HK2细胞发生细胞凋亡,凋亡率随时间的延长而增加。在诱导HK2细胞凋亡过程中DAP5裂解活化产生DAP5/p86,且这一过程可能是经过PI3K/Akt/m TOR途径来完成的。
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- 关键词:庆大霉素凋亡肾小管上皮细胞