张迎春 作品数:7 被引量:13 H指数:3 供职机构: 华中科技大学同济医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家杰出青年科学基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
DVL-1 cDNA重组质粒在N2a细胞中的瞬时表达 目的将鼠dishevelled-1(DVL-1)cDNA重组质粒转染到培养的鼠成神经瘤细胞N2a,建立瞬时表达系统,为研究Wnt信号途径在阿尔茨海默病(AD)发病中的作用提供实验基础。方法用常规分子生物学方法扩增、纯化D... 王海红 曲忠森 张迎春 王建枝关键词:阿尔茨海默病 WNT信号途径 文献传递 cdk-5过度表达对大鼠tau蛋白磷酸化及空间记忆的影响 被引量:4 2003年 Alzheimer病(AD)中,异常过度磷酸化的tau蛋白会导致细胞骨架的异常并与神经元的死亡有关.在体外,细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶5(cdk-5)能在大多数AD相关位点磷酸化tau蛋白.旨在整体水平研究cdk-5过度表达对大鼠微管相关蛋白tau的磷酸化及空间记忆的影响.结果显示,在大鼠海马区转染 cdk-5基因,24h后其局部表达增加,并使得抗体tau-1显色减弱,PHF-1和12e8显色增强,提示tau蛋白在Ser199/202,Ser396/404和Ser262/356位点过度磷酸化.此外,在水迷宫测试中,cdk-5转染鼠寻找安全平台所需时间比对照鼠明显延长,而转染后48 h cdk-5的表达较 24h时下降,同时伴有tau蛋白磷酸化程度的下降和空间记忆能力的改善.这些结果提示整体水平的cdk-5的过度表达会导致大鼠的空间记忆损伤,而过度磷酸化的tau蛋白可能参与了该病理过程. 廖晓梅 张迎春 汪义朋 王建枝关键词:TAU蛋白 空间记忆 ALZHEIMER病 磷酸化 神经原纤维缠结 不同培养条件对海马器官型脑片培养中tau蛋白表达特性的影响 [目的]:探讨长时程海马器官型脑片培养过程中不同温度、不同培养基及不同鼠龄对细胞骨架蛋白tau的表达影响,并根据tau的表达特性,建立一种较好的老年性痴呆的组织模型。[方法]:研究选用出生后1周、2周、4周和8周的Wis... 廖晓梅 张迎春 王建枝文献传递 不同培养基对海马脑片活性及微管相关蛋白tau表达的影响 被引量:5 2005年 目的探讨在不同培养基条件下,不同年龄大鼠的海马脑片在长期培养过程中的活性改变及微管相关蛋白tau表达的动态变化。方法制备1、2、4和8周龄雄性Wistar大鼠海马脑片(400μm),分别使用minimumessentialmedium(MEM)和Dulbecco'smodifiedeaglemedium:nutrientmixture(DMEM/F12)两种不同的培养基进行培养。在培养的21d内以乳酸脱氢酶(LDH)法监测不同培养基条件下海马脑片活性的改变,并在不同时间点选取脑片以免疫印迹法检测tau蛋白含量的改变。结果在海马脑片的长期培养过程中,两种培养基对脑片活性的影响差异无显著性,而培养基DMEM/F12可使脑片中的tau蛋白更持久、更高量地稳定表达,尤其是2和4周龄鼠源海马器官型脑片。结论选取2或4周龄大鼠,应用培养基DMEM/F12更适合于脑片水平tau蛋白的相关研究,在此基础上可望建立阿尔茨海默病理想研究模型。 张迎春 廖晓梅 王建枝关键词:海马 脑片 乳酸脱氢酶 DVL-1 cDNA重组质粒在N2a细胞中的瞬时表达 被引量:2 2004年 目的 将鼠dishevelled 1(DVL 1)cDNA重组质粒转染到培养的鼠成神经瘤细胞N2a ,建立瞬时表达系统 ,为研究Wnt信号途径在阿尔茨海默病 (AD)发病中的作用提供实验基础。方法 用常规分子生物学方法扩增、纯化DVL 1cDNA重组质粒 ,用紫外分光技术检测纯化质粒的纯度 ;用脂质体介导法将重组质粒转染入培养的鼠成神经瘤细胞N2a,用免疫印迹、免疫荧光法从蛋白质水平检测转染和表达效果。结果 质粒酶切电泳结果显示 :鼠DVL 1cD NA重组质粒PCS2 +MT MDVL1扩增和纯化成功 ,纯度达到要求 ;免疫印迹、免疫荧光结果显示外源鼠DVL 1cDNA重组质粒在鼠成神经瘤细胞N2a中获得表达 ,基因转染和表达率为 5 7 6 %。结论 成功将鼠DVL 1cDNA重组质粒转染到培养的鼠成神经瘤细胞N2a中 ,并获得瞬时表达。 王海红 曲忠森 张迎春 王建枝关键词:CDNA 重组质粒 N2A细胞 肿瘤 阿尔茨海默病 STAT3信号转导系统介导了CNTF对大鼠尾壳核出血后的神经保护作用 被引量:1 2004年 目的研究睫状神经生长因子(CNTF)在中枢神经元抗损伤中的作用及机制。方法对尾壳核出血大鼠进行CNTF治疗,观察海马信号转导和转录激活蛋白3(STAT3)含量及阳性神经元分布的变化。结果CNTF能显著增加尾壳核出血大鼠海马STAT3阳性神经元数量、海马STAT3含量。结论CNTF能通过促进STAT3的表达增强中枢神经元的抗损伤能力。 张蕲 张迎春 廖晓梅 田青 胡茂琼 王建枝关键词:CNTF STAT3 温度对不同年龄大鼠海马器官型脑片长期培养中细胞活性和tau蛋白表达的影响 被引量:3 2005年 探讨在海马器官型脑片的长期培养过程中,温度对不同年龄大鼠的海马脑片细胞活性和tau蛋白表达的影响,并以此为依据建立一种研究tau相关疾病的模型.选用出生后1周、2周、4周和8周的Wistar大鼠制备海马器官型脑片,培养温度分别为34℃和37℃,培养时间为21d,在培养过程中,检测培养基中的乳酸脱氢酶的含量以判断脑片的活性,采用免疫印迹技术检测细胞骨架蛋白tau的含量的变化.结果如下:(1)温度对海马脑片的细胞活性影响:34℃较37℃能在较长的时间内保持细胞活性,而在同一培养温度时,不同年龄鼠的脑片的细胞活性变化趋势一致;(2)温度对海马脑片的tau蛋白表达的影响:成年鼠(4周和8周)的海马脑片tau蛋白在34℃时能维持较长时间的稳定表达,而在37℃时tau的表达量随培养时间的延长而显著下降,且随鼠龄的增加,这种影响越明显.温度对1周和2周龄乳鼠的海马脑片tau蛋白的表达无影响.结论为:34℃培养条件下,4周和8周龄大鼠制备的海马器官型脑片能更长时间维持脑片的活性和tau蛋白的稳定表达,从而可望成为研究与tau蛋白相关疾病(如老年性痴呆)的理想模型. 廖晓梅 张迎春 王建枝关键词:温度 乳酸脱氢酶 TAU蛋白