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文献类型

  • 3篇期刊文章
  • 2篇会议论文
  • 1篇学位论文

领域

  • 5篇农业科学
  • 4篇生物学

主题

  • 5篇基因
  • 4篇亚单位
  • 4篇克隆
  • 3篇转录
  • 3篇转录分析
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  • 3篇基因克隆
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  • 2篇基因组
  • 2篇基因组DNA
  • 2篇CDNA克隆
  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白酶
  • 1篇蛋白酶体
  • 1篇毒性
  • 1篇血白细胞
  • 1篇全长CDNA
  • 1篇外周

机构

  • 3篇吉林大学
  • 3篇甘肃农业大学
  • 1篇中国农业科学...

作者

  • 6篇付保忠
  • 3篇孙晓义
  • 3篇谭业平
  • 3篇卢强
  • 2篇孙晓义
  • 2篇王雯慧
  • 2篇谭业平
  • 2篇卢强
  • 2篇李伟
  • 2篇李伟
  • 1篇邓洪宽
  • 1篇刘相叶
  • 1篇付宝权
  • 1篇祝艳蕾

传媒

  • 2篇水产学报
  • 1篇大连水产学院...
  • 1篇中国畜牧兽医...

年份

  • 2篇2009
  • 3篇2008
  • 1篇2007
6 条 记 录,以下是 1-6
排序方式:
鲤鱼蛋白酶体激活因子PA28-β亚单位基因克隆、鉴定及时空转录分析
PA28-α和PA28-β可被IFN-γ诱导,可以激活20S蛋白酶体前体,使之产生抗原肽被MHC Ⅰ类分子识别呈递给细胞毒性T细胞,因此在MHC Ⅰ类抗原呈递中具有重要作用。编码PA28-α和PA28-β的基因PMSE1...
付保忠
关键词:基因克隆
文献传递
鲤外周血白细胞蛋白酶体激活因子PA28β全长cDNA的克隆、鉴定及其差异表达分析被引量:1
2008年
采用基因文库筛选方法,克隆了鲤外周血白细胞蛋白酶体激活因子PA28βcDNA,对其序列进行了分析,同时利用半定量反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测了不同外界因子刺激下鲤外周血白细胞PA28β的表达情况。结果显示,用DD-RTPCR的方法获得差异显示片段A18,经地高辛标记作为探针对有丝分裂原刺激的鲤外周血白细胞cDNA文库进行核酸杂交筛选,从0.8×104个重组噬菌体中,经过两轮筛选获得阳性克隆。序列分析表明,该阳性克隆长1175bp,含有一个大小为735bp编码244个氨基酸的完整开放阅读框,为编码鲤鱼蛋白酶体激活因子PA28β的全长cDNA。系统发生分析其与已报道的斑马鱼蛋白酶体激活因子PA28β亲缘关系最近,基因序列的同源性达95%。分离培养鲤外周血白细胞,在不同条件下经PHA和ConA刺激后,利用Trizol提取总RNA,根据得到的PA28β全长cDNA序列和鲤鱼-βactin序列设计引物,利用RT-PCR方法对鲤外周血白细胞PA28β进行差异表达分析,结果表明:经有丝分裂原刺激后前期(4h)白细胞中PA28β的表达量明显增大,但随着时间推移(12h、24h)表达增加量有所降低,并不随时间的延长而持续增加。在刺激的和正常的白细胞中PA28β表达趋势都成抛物线图,不同的是经刺激的比正常的PA28β的表达量提前达到峰值。首次报道鲤蛋白酶体激活因子PA28β的全长cDNA序列,鲤PA28β的cDNA序列GenBank注册号为EU255233,并对其进行差异表达分析,这些结果可为PA28β在鱼类免疫应答中的作用研究提供参考和依据。
付保忠卢强谭业平孙晓义李伟刘相叶邓洪宽
关键词:CDNA克隆差异表达分析
鲤蛋白酶体激活因子PA28α亚单位基因组DNA的克隆及序列分析
2007年
PA28α can activate the latent 20S proteasome together with PA28β,playing an important role in the processing of MHC class I antigen.PMSE1 gene encoding this activator has been characterized and documented in mammals,whereas,few reported among piscine.In the present study,two pairs of primer were designed and synthesised according to the full-length cDNA sequence of proteasome activator PA28α subunit which we had found in common carp.Using PCR two specific gene fragments of PA28α subunit were amplified from total genomic DNA extracted from the spleen of common,PCR products cloned into pMD18-T vector.The recombinant plasmids were verified by sequencing.The PA28α subunit gene(PSME1) of common carp had been successfully cloned.The sequence results were analysized with DNAStar,DNAMAN and BLAST software.Result indicated that carp PSME1 gene encompassed 3 602 nucleotides,11 exons,10 introns,which was very similar to the known PSME1 genes of other species with the same exon/intron arrangement.Three forms are shown at intron/exon boundaries of carp PSME1 gene,exon 5/intron 5 boundary belongs to class 1(GAA/G),exon 8/intron 8 boundary belongs to class 2(TCC/AA),the rest belong to class 0.The splice sites have been well conserved through evolution,and observe the regulation of GT-AG completely.A phylogenetic analysis using PA28α and PA28β protein sequences from the GenBank verifies the presumed orthologous relationships of the carp gene to their mammalian counterparts,and reveales a closer relationship between carp PA28α and zebrafish PA28α than between carp PA28α and mammalian PA28α.Comparing with human,pig,mouse,zebrafish,the structure of carp PMSE1 gene has been also well conserved through evolution.The base number of all exons is almost stable,althongh few introns(introns 1,5,7 in carp;introns 1, 4,7,8 in zebrafish) more variable than other three mammals,especially,the base number of intron 8 in zebrafish PSME1 gene.Our studies have demonstrated the carp PMSE1 gene,moreover,we have done a further work on the
谭业平卢强孙晓义付保忠祝艳蕾付宝权
鲤白细胞介素-8基因组DNA的克隆及序列分析被引量:2
2008年
在白细胞介素-8(IL-8)cDNA全长序列的两侧——非翻译区设计一对引物,以提取的鲤脾脏基因组DNA为模板进行PCR扩增,并将扩增产物回收、纯化,连接到pMD18-T载体上,再转化到DH5α大肠杆菌感受态细胞中,并对插入片段进行测序,获得了鲤IL-8基因组DNA的全长序列。结果表明:鲤IL-8DNA全长为943 bp,由4个外显子和3个内含子组成,与已知其它物种的排列非常相近,说明在进化过程中其拼接位点非常保守,符合GT-AG规则;对系统发生的分析证明,鲤与斑马鱼的亲缘关系较近,与哺乳动物亲缘关系较远;将鲤的IL-8基因组结构与人、猪、狗、虹鳟的基因组结构进行比较,发现IL-8基因在由鱼类到哺乳动物的分子进化过程中较为保守,外显子基本保持稳定,而内含子的变化较大。
孙晓义卢强谭业平付保忠李伟
关键词:白细胞介素-8
鲤鱼蛋白酶体激活因子PA28-β亚单位基因克隆、鉴定及时空转录分析
PA28-α和PA28-β被IFN-γ诱导后,可以激活20S蛋白酶体前体,使之产生抗原肽被MHCⅠ类分子识别呈递给细胞毒性T细胞,因此在MHCⅠ类抗原呈递中具有重要作用。编码PA28-αa和PA28-β的基因PMSE1和...
付保忠卢强王雯慧谭业平孙晓义李伟
关键词:鲤鱼转录分析细胞毒性基因克隆
文献传递
鲤鱼蛋白酶体激活因子PA28-β亚单位基因克隆、鉴定及时空转录分析
PA28-α和PA28-β被IFN-γ诱导后,可以激活20S蛋白酶体前体,使之产生抗原肽被MHCⅠ类分子识别呈递给细胞毒性T细胞,因此在MHCⅠ类抗原呈递中具有重要作用。编码PA28-α和PA28-β的基因PMSE1和P...
付保忠卢强王雯慧谭业平孙晓义李伟
关键词:鲤鱼CDNA克隆转录分析
文献传递
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