胡博 作品数:5 被引量:24 H指数:3 供职机构: 苏州大学生物医学研究院 更多>> 发文基金: 安徽省高校省级自然科学研究项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 理学 更多>>
三氧化二砷对小鼠恶性黑素瘤抑制机制的探讨 被引量:2 2008年 目的:探讨三氧化二砷(As2O3)对小鼠B16细胞实体瘤的生长抑制作用及对端粒酶活性表达的影响,旨在为临床治疗黑素瘤提供理论和实验依据。方法:以不同浓度As2O3作用的鼠黑素瘤B16细胞荷瘤小鼠,用TRAP-PAGE-银染法检测药物作用后瘤体组织端粒酶活性的表达;通过测定荷瘤小鼠瘤体大小和肿瘤组织内微血管密度来反映不同剂量As2O3的抑瘤作用。结果:As2O3能抑制鼠B16细胞实体瘤的生长,破坏肿瘤组织微血管的形成(P<0.01);As2O3能明显抑制鼠B16细胞实体瘤端粒酶的活性。结论:As2O3对于B16细胞实体瘤的生长有显著的抑制作用,这可能与其抑制肿瘤组织内微血管的形成和端粒酶表达活性有关。 黄桦 陈治文 陈正徐 胡博 王东萍关键词:黑素瘤 三氧化二砷 端粒酶 三氧化二砷抑制小鼠乳腺癌细胞MA-891生长作用及其对端粒酶活性的影响 被引量:6 2012年 目的:探讨As2O3在诱导小鼠乳腺癌细胞MA-891凋亡过程中的作用,以及对端粒酶及其亚单位mTERT mRNA活性表达的影响,为进一步进行小鼠体内实验提供理论和实验依据。方法:以小鼠乳腺癌细胞株MA-891为研究对象,将不同浓度的As2O3与MA-891细胞共培养不同时间后,MTT法检测As2O3对MA-891细胞的生长抑制作用;流式细胞术检测As2O3对MA-891细胞凋亡的影响;TRAP-PAGE-银染法检测As2O3作用后MA-891细胞中端粒酶活性的改变;RT-PCR检测As2O3对MA-891细胞鼠端粒酶逆转录酶(mTERT)的影响。结果:As2O3能显著抑制MA-891细胞生长,24,48 h的半数生长抑制浓度(IC50)分别为9.68,5.50μmol.L-1。5,10,20μmol.L-1的As2O3诱导MA-891细胞24 h后,细胞凋亡率依次为30.21%,48.26%,57.43%。5,10,20μmol.L-1的As2O3作用MA-891细胞24,48 h后,端粒酶活性显著下降,抑制程度呈明显的时间和浓度依赖性;银染条带也显示出相同结果。RT-PCR产物显示mTERT mRNA表达显著下降并呈时间和浓度依赖关系。结论:As2O3能显著抑制MA-891细胞生长、诱导细胞凋亡,可能是通过抑制细胞端粒酶及其亚单位端粒酶逆转录酶的活性而发挥作用。 石莹 胡博 郭俣 王慧 夏俊关键词:AS2O3 凋亡 端粒酶 端粒酶逆转录酶 可溶性FasL联合survivin RNA干扰诱导肺腺癌细胞凋亡 被引量:6 2007年 目的:探讨可溶性FasL(sFasL)联合survivin RNA干扰对肺腺癌细胞A549增殖和凋亡的影响。方法:构建survivin特异RNA小干扰表达载体,DNA测序,转染A549细胞。G418(geneticin)筛选稳定表达survivin RNA小干扰细胞株,荧光实时定量RT-PCR、免疫印迹(Western blot)和免疫组化法检测survivin mRNA和蛋白表达。sFasL作用于转染后细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和流式细胞仪检测细胞活性和凋亡率。结果:成功构建survivin-siRNA表达载体,筛选出稳定表达单克隆细胞。Survivin mRNA和蛋白表达分别下降76.4%(P<0.01)和84.5%,免疫组化也显示survivin下调。sFasL联合survivinRNA干扰细胞,光密度值在各时间点较siRNA组、sFasL组和对照组均明显降低(P<0.01),抑制率增加;凋亡率较siRNA组、sFasL组和对照组明显增加(P<0.01)。结论:Survivin RNA干扰表达载体可降低survivin的表达。sFasL联合survivin RNA干扰较单用sFasL或survivin RNA干扰能更有效地抑制肺腺癌细胞A549增殖,促进凋亡。 刘黎明 陈昌杰 陈正徐 胡博 段光军 胡华成关键词:细胞系 RNA干扰 细胞凋亡 三氧化二砷诱导乳腺癌细胞凋亡以及对Survivin、Caspase-3蛋白表达的影响 被引量:8 2008年 背景与目的:探讨不同浓度As2O3在诱导人乳腺癌细胞MDA_MB_231凋亡过程中的作用,并研究其对Survivin和Caspase_3蛋白表达的影响。材料与方法:将3种不同浓度的As2O3(10.0、20.0、40.0μmol/L)与MDA_MB_231细胞共培养不同时间后,采用流式细胞术检测MDA_MB_231细胞凋亡;用免疫细胞化学技术及Westernblot检测Survivin和Caspase_3蛋白的表达。各实验均设相应的对照组。结果:经10.0、20.0、40.0μmol/LAs2O3作用后,MDA_MB_231细胞凋亡率分别为(28.89±2.47)%、(46.73±3.82)%和(56.44±4.16)%,细胞凋亡率在各浓度组间的差异均具有统计学意义(P均<0.01);免疫细胞化学染色显示Survivin蛋白表达减少,而Caspase_3蛋白被激活;Westernblot条带显示Survivin蛋白表达量降低,而Caspase_3蛋白则出现被激活的小片段。As2O3上述的3种作用均存在剂量依赖关系。结论:As2O3可能通过抑制Survivin蛋白活性,激活Caspase_3蛋白的表达而诱导MDA_MB_231细胞凋亡。 夏俊 胡博 陈治文 刘黎明关键词:AS2O3 MDA-MB-231细胞 SURVIVIN CASPASE-3 As_2O_3对乳腺癌细胞的生长及端粒酶活性的影响 被引量:2 2008年 目的:探讨不同浓度As2O3对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231端粒酶及其亚单位hTERT-mRNA活性表达的影响,为临床治疗乳腺癌提供理论和实验依据。方法:将不同浓度的As2O3与MDA-MB-231细胞共培养不同时间后,MTT比色法检测As2O3对MDA-MB-231细胞的生长抑制作用;TRAP-PAGE-银染法检测As2O3作用后细胞端粒酶活性的改变;RT-PCR法测定MDA-MB-231细胞hTERT-mRNA的表达。结果:As2O3可显著抑制MDA-MB-231细胞生长,且存在浓度、时间效应关系,其24 h IC50为24.73μmol/L,48 h IC50为6.99μmol/L;用终浓度分别为10、20、40μmol/L的As2O3与MDA-MB-231细胞作用24h、48 h,银染条带显示出端粒酶活性显著下降;RT-PCR产物电泳条带显示出hTERT-mRNA的表达明显下降。结论:As2O3在体外可显著抑制MDA-MB-231细胞的生长,具有较明显的细胞毒作用;As2O3能显著抑制MDA-MB-231细胞端粒酶及其亚单位端粒酶逆转录酶的活性,且抑制作用具有明显的时间和浓度依赖关系。 胡博 陈正徐 夏俊 王东萍 高绪峰关键词:三氧化二砷 MDA-MB-231细胞 端粒酶 比色法