王前
- 作品数:17 被引量:10H指数:2
- 供职机构:中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金:中国科学院仪器设备功能开发技术创新项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程生物学医药卫生文化科学更多>>
- 地中海富盐菌乙酰化修饰研究
- 蛋白质翻译后修饰,是细胞调节自身生理生化功能的一种重要手段。迄今,已知的翻译后修饰有400多种。乙酰化分为两类:N-末端α位的乙酰化修饰和内部ε位的赖氨酸乙酰化修饰,前者为不可逆修饰,后者是一种可逆修饰,在细胞的生命活动...
- 刘景芳姜雄健王前赵大贺韩静周坚罗元明向华
- 关键词:乙酰化生理功能
- 基于显微操作的单细胞分选方法被引量:6
- 2018年
- 本文利用激光共聚焦显微镜成像清晰的优势,结合显微操作系统,将视野下看到的目的细胞直接用微吸管挑选出来,实现单细胞分选等功能。由于是在可视条件下进行的分选,细胞分选纯度可达100%。本方法是一种适用于样品量少、样品组成复杂、需要特性表达分选或定位分选的单细胞分选方法。
- 张晓兰李春立樊峥孙树涛赵彤梁静南王前刘一苇
- 关键词:细胞分选显微操作激光共聚焦显微镜
- 高通量超薄切片染色单元及液路式自动染色装置
- 本发明属于透射电镜技术领域。本发明提供了一种高通量超薄切片染色单元,包括:染液槽、染液槽壁、染液槽底部、防护槽、防护槽壁;所述染液槽是由染液槽壁构成的三面密闭上面开放的空间;所述防护槽是由防护槽壁构成三面密闭上面开放的空...
- 梁静南李春立罗元明樊峥赵彤张晓兰王前孙树涛
- 文献传递
- 转移式高通量超薄切片染色仪
- 本发明属于透射电镜技术领域。本发明提供了一种转移式高通量超薄切片染色仪,包括:支撑平台;支撑柱,所述支撑柱在支撑平台中心位置并固定在支撑平台上;瓶盖平台,所述瓶盖平台的中心位置固定在支撑柱的另一端;漂洗池、染色瓶A和染色...
- 梁静南色日格楞罗元明李春立樊峥赵彤孙树涛王前张晓兰
- 文献传递
- 一种磁吸式载网架装置
- 本实用新型涉及一种磁吸式载网架装置。该装置包括架体、磁体和疏水层。装置利用磁力作用可将多个镍网的外环同时吸附在架体上,进而能够实现对镍网的批量操作(如漂洗、免疫标记、染色等);此外,通过疏水层的疏水作用,可使镍网在不同液...
- 梁静南刘一苇王前姜周思诺代星梁好罗元明李春力樊峥赵彤孙树涛张晓兰
- 文献传递
- 蛋白类生物药N-端降解状态的检测方法
- 本发明属于质谱检测蛋白N‑端降解状态技术领域。本发明提供了蛋白类生物药N‑端降解状态的一种检测方法,包括以下步骤:取待检测蛋白溶液,还原烷基化反应后;用三乙基碳酸氢铵(TEAB)换液,加入稳定同位素标记试剂,室温反应,加...
- 王前罗元明刘景芳梁静南樊峥李春立张晓兰赵彤孙树涛
- 地中海富盐菌PhaE蛋白乙酰化修饰对其功能的影响
- 2017年
- 【目的】研究地中海富盐菌PHA合酶(Pha EC)中Pha E亚基乙酰化修饰对其功能的影响,探讨乙酰化修饰对菌体生理代谢的调控作用。【方法】蔗糖密度梯度离心收集PHA颗粒,质谱鉴定颗粒结合蛋白Pha E的乙酰化位点。将乙酰化位点(赖氨酸,K)分别突变为精氨酸(R)(模拟去乙酰化)或谷氨酰胺(Q)(模拟乙酰化),利用同源双交换原理,将突变后的基因原位敲入基因组。以野生型为对照,检测突变对菌体生长、葡萄糖消耗和PHA合成能力的影响。利用Western blot检测PHA颗粒上Pha E的含量,进一步分析乙酰化修饰对蛋白功能的影响。【结果】在Pha E蛋白105位和170位赖氨酸(K)2个位点检测到乙酰化修饰。利用遗传操作系统将突变的基因原位敲入,共得到6种突变株。发酵结果表明,任何一种单突变对菌体生长及PHA合成的影响均不明显。但当2个位点同时突变成精氨酸(K105R/K170R)时,突变株生长及合成PHA的能力均受到明显抑制,2个位点同时突变成谷氨酰胺(K105Q/K170Q)则无明显影响。进一步的Western blot结果表明,突变成精氨酸的双突变株的PHA颗粒上,Pha E蛋白的含量相较于野生型约降低了一半。【结论】Pha E蛋白的去乙酰化能够导致菌株利用葡萄糖合成PHA的能力显著降低,其可能原因是降低了Pha E与PHA颗粒或PHA颗粒上Pha C的结合能力,从而降低了Pha EC合酶的活性。
- 姜雄健王前刘桂明赵大贺刘景芳向华
- 关键词:乙酰化突变嗜盐古菌
- 高通量超薄切片染色单元及液路式自动染色装置
- 本实用新型属于透射电镜技术领域。本实用新型提供了一种高通量超薄切片染色单元,包括:染液槽、染液槽壁、染液槽底部、防护槽、防护槽壁;所述染液槽是由染液槽壁构成的三面密闭上面开放的空间;所述防护槽是由防护槽壁构成三面密闭上面...
- 梁静南李春立罗元明樊峥赵彤张晓兰王前孙树涛
- 一种流式细胞仪的新型废液收集系统
- 本实用新型涉及细胞、微生物等颗粒的分析和分选技术领域,尤其涉及一种流式细胞仪的新型废液收集系统。该废液收集系统包括顺次连通的废液收集桶、水汽过滤暂存装置和干式真空泵,所述水汽过滤暂存装置包括一个或多个串联连通的透明抽滤瓶...
- 赵彤梁静南陈宇亮孙树涛刘一苇李春立张晓兰樊峥王前
- 文献传递
- 一种利用PIP对生物材料染色的方法
- 本发明公开了一种利用PIP对生物材料染色的方法。本发明公开的利用PIP对生物材料染色的方法,包括利用PIP或包括PIP的试剂对生物材料染色完成所述生物材料的染色,PIP的化学结构式如式Ⅰ所示;该生物材料可为微生物,如噬菌...
- 梁静南刘一苇赵彤孙树涛樊峥李春立张晓兰王前