刘素萍
- 作品数:3 被引量:1H指数:1
- 供职机构:上海海洋大学更多>>
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- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 牙鲆变态中TRβ基因的表达及其靶向miRNA鉴定分析
- 牙鲆(Paralichthys olivaceus)主要分布在中国和日本沿海地区,是我国非常重要的海水养殖鱼类。在牙鲆变态过程中,牙鲆的形态、生理方面都发生了剧烈的变化,涵盖了许多生物学变化过程。甲状腺激素(thyroi...
- 刘素萍
- 关键词:牙鲆MIRNAS甲状腺激素受体
- 甲状腺激素受体与Drosha蛋白互作鉴定分析被引量:1
- 2017年
- 为了证明甲状腺激素受体(THR)与Drosha蛋白之间的相互作用,以HEK293细胞为材料,利用免疫共沉淀的方法获得蛋白免疫复合物,再经Western blot检测和质谱分析。结果表明,用THR抗体Western blot检测出有THR蛋白的存在,反之Drosha抗体Western blot检测有Drosha蛋白的存在;同时,THR抗体免疫沉淀后的质谱鉴定存在Drosha蛋白,Drosha抗体免疫沉淀后的质谱鉴定也存在THR蛋白,由此说明甲状腺激素受体与Drosha蛋白之间确实存在相互作用。并且,初步筛选出与两者共同作用的54个蛋白,经Go聚类分析揭示鉴定蛋白主要是细胞膜和细胞核中成分,参与细胞迁移、细胞凋亡、蛋白代谢、免疫应答、信号通路调节及转录调控等生物途径,具有核酸结合、细胞骨架结合等分子功能。
- 尚攀付元帅施志仪喻杰刘素萍
- 关键词:甲状腺激素受体免疫共沉淀质谱分析HEK293细胞
- 褐牙鲆中miRNAs与甲状腺激素受体TRβ的相互作用研究
- 2020年
- 甲状腺激素通过与其受体结合对褐牙鲆变态起重要的调控作用,而miRNAs通过结合靶基因3′-UTR在转录后水平调节靶基因的表达。为探讨miRNAs在褐牙鲆变态中的作用,通过生物信息学方法预测褐牙鲆TRβ基因3′-UTR存在的miRNAs结合位点,并利用3′-RACE方法克隆TRβ基因的3′-UTR序列,通过体外DNA重组技术构建应用于miRNAs靶向基因检测的双荧光素酶重组报告载体,利用细胞转染和双荧光素酶报告技术分析多个miRNAs与TRβ基因的作用关系。研究结果显示,克隆得到了一段长为437 bp的褐牙鲆TRβ基因的3′-UTR序列,发现3′-UTR序列上存在pol-miR-125a、pol-miR-214、pol-miR-460-5p、pol-miR-138和pol-miR-125a*的结合位点,成功构建了双荧光素酶重组报告载体,命名为pmirGLO-TRβ-3′-UTR。双荧光素酶报告分析结果表明,pol-miR-125a、pol-miR-214、pol-miR-460-5p和pol-miR-138均为作用于褐牙鲆TRβ的靶向miRNAs,而pol-miR-125a*对TRβ基因无直接的调节作用。研究结果将为后续深入研究miRNAs与TRβ在褐牙鲆变态发育中的功能及其作用机制提供基础。
- 刘素萍付元帅喻杰张俊玲施志仪
- 关键词:褐牙鲆MIRNA