郭超凡
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
- 供职机构：新疆大学生命科学与技术学院生物资源基因工程重点实验室更多>>
- 发文基金：科技基础性工作专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 新疆出血热病毒糖蛋白Gc不同区段抗原DNA疫苗诱导小鼠的免疫应答被引量：4
- 2017年
- 目的 构建新疆出血热病毒（Xinjiang hemorrhagic fever virus,XHFV）糖蛋白两个区段抗原的DNA疫苗,并观察其免疫应答效果.方法 分别将XHFV YL04057株糖蛋白Gc上的两个抗原区段GcⅠ（1 229~1 349 aa）和GcⅡ（1 443~1 566 aa）编码的DNA序列插入真核表达载体pVAX1中,构建真核质粒pVAX1-GcⅠ和pVAX1-GcⅡ;经酶切和测序鉴定,质粒免疫小鼠,通过T细胞增殖试验、细胞因子含量测定和ELISA法检测抗体对其诱导的免疫应答效果进行评价.结果 经双酶切鉴定和测序证实重组质粒构建正确;实验组小鼠IgG产生水平与pVAX1对照组相比有明显升高;pVAX1-GcⅠ和pVAX1-GcⅡ免疫组小鼠血清中的抗体效价均高于1：3 200;pVAX1-GcⅡ免疫组的小鼠脾脏T淋巴细胞增殖明显,IFN-γ的表达水平也高达160.27 pg/ml,与对照组相比,差异有统计学意义（P〈0.01）.结论 成功构建XHFV糖蛋白两个区段抗原DNA疫苗,靶抗原在体内可有效表达;各免疫组均激起了较强的体液免疫及细胞免疫应答,pVAX1-GcⅡ实验组免疫原性和免疫效果较好,可将其作为新疆出血热病毒的候选疫苗.
- 汪梅芳郭超凡朱华兵陈丽娟张渝疆孙素荣
- 关键词：新疆出血热病毒糖蛋白DNA疫苗
- 新疆出血热病毒糖蛋白2个抗原区段DNA疫苗诱导小鼠免疫应答研究
- [目的]构建新疆出血热病毒(XHFV)糖蛋白2 个抗原区段的DNA 疫苗,并观察其免疫应答效果.[方法]分别将XHFV 糖蛋白Gc 上的2 个区段aa 180-300 和aa 407-530 编码的DNA 序列插入真核表...
- 汪梅芳郭超凡朱华兵陈丽娟孙素荣
- 关键词：新疆出血热病毒抗原表位DNA疫苗
- 新疆出血热病毒Gc抗原片段抗原性及免疫原性分析被引量：3
- 2019年
- 目的表达纯化新疆出血热病毒(XHFV)糖蛋白的2个结构域GcⅠ和GcⅡ,研究其免疫原性及对小鼠免疫应答的影响.方法构建pET28a-GcⅠ和pET32a-GcⅡ原核表达质粒,分别转化大肠杆菌BL21,并优化rGcⅠ和rGcⅡ蛋白的表达和纯化条件.采用蛋白质印迹法(Western Blot)和酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测融合蛋白的抗原性.通过蛋白免疫和核酸初免-蛋白加强免疫2种方式免疫BALB/c小鼠,将小鼠按随机数字表法分为5组:pVAX1-GcⅠ+rGcⅠ组、pVAX1-GcⅡ+rGcⅡ组、rGcⅠ组、rGcⅡ组和生理盐水组(对照组),每组7只.采用间接ELISA检测小鼠血清抗体效价,同时通过脾T淋巴细胞增殖实验和细胞因子含量测定对免疫效果进行评价.结果纯化获得融合蛋白rGcⅠ和rGcⅡ,两者能与绵羊阳性血清反应,具有较好的抗原性.3次免疫小鼠后,各实验组小鼠血清中的IgG水平明显高于对照组(均P<0.001),血清抗体效价均达到1:12800以上,其中rGcⅡ和pVAX1-GcⅡ+rGcⅡ组脾细胞培养上清中Th2型细胞因子白细胞介素-4(IL-4)的质量浓度明显高于对照组[(79.97±7.47)ng/L比(24.29±3.81)ng/L,(61.43±9.27)ng/L比(24.29±3.81)ng/L,均P<0.01];pVAX1-GcⅡ+rGcⅡ组Th1型细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)的质量浓度最高,与对照组比较差异具有统计学意义[(42.46±2.60)ng/L比(20.33±1.67)ng/L,P<0.001],并显示出明显的抗原特异性脾T淋巴细胞增殖(P<0.001).结论纯化后的重组蛋白rGcⅠ和rGcⅡ具有较好的免疫原性,可使被免疫机体T淋巴细胞趋向于Th2效应,且pVAX1-GcⅡ联合重组蛋白GcⅡ的抗原特异性免疫效果较好,有望作为防治XHFV的候选疫苗.
- 张敬媛汪梅芳郭超凡朱华兵李轶杰张渝疆孙素荣
- 关键词：新疆出血热病毒糖蛋白免疫原性
