王瑞菊
- 作品数:5 被引量:0H指数:0
- 供职机构:河北师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:河北省自然科学基金河北省高等学校科学技术研究指导项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 利用蛋白质组学解析油菜素内酯信号传导的分子机理
- 油菜素内酯(brassinosteroids,简称BR)是主要的植物生长调节激素之一,参与调节了细胞的伸长和分化等许多植物生长发育过程。为了解析BR信号传导的分子机理,我们利用2D-DIGE的蛋白质组学方法找到了一批BR...
- 王瑞菊张宝文刘朦朦李艳婕王小龙汤文强
- 关键词:油菜素内酯信号传导蛋白质组学
- 文献传递
- 水稻OsDREB1A的原核表达及重组蛋白活性分析
- 2017年
- OsDREB1A是水稻冷信号传导途径中重要的转录因子。本研究将水稻日本晴OsDREB1A基因通过双酶切方法连接至MSC-TOPOII载体,并重组构建到表达载体PGEX-4T-1,获得融合蛋白表达质粒PGEX-4T-1-OsDREB1A,转化表达菌E.coli BL21(DE3)Condon Plus,诱导表达后通过亲和层析柱Glutathione agarose 4B纯化获得了分子量大小正确的OsDREB1A-GST融合蛋白,EMSA检测发现低温18℃诱导纯化的融合蛋白可以在体外成功结合CRT/DRE顺式元件。为进一步研究OsDREB1A在冷信号传导中的生物学功能奠定了基础。
- 霍晨敏商建秀王瑞菊
- 关键词:水稻原核表达凝胶阻滞分析
- 野生稻CBF/DREB1转录因子的鉴定与生物信息学分析
- 2024年
- 低温冷害是限制栽培稻地域分布和产量的重要因素之一,严重影响我国的粮食安全。以CBF/DREB1为核心的C-重复结合因子-冷调节基因(CBF-COR)途径是水稻适应低温的重要信号传导途径。基于稻属9种植物的全基因测序结果和隐马尔可夫模型(HMM)搜索,共鉴定出71个CBF/DREB1基因序列。所有基因均无内含子,由单个外显子组成。大部分DREB1s呈弱酸性,所有DREB1s亲水性平均值<0。进化树分析进一步将其分为3个组:DREB1A/1B/1H、DREB1C/1E/1F/1G和DREB1D/1I/1J,各组成员除AP2保守结构域和侧翼序列外,其他保守基序组成差别较大。适应性进化分析粳亚种和其他水稻的直系同源基因对,发现OsDREB1A/ObDREB1A、OsDREB1D/OnDREB1D、OsDREB1I/OsIDREB1I和OsDREB1J/OsIDREB1J四对基因非同义替换/同义替换(Ka/Ks)值均>1,受到正选择压力。旁系同源基因之间启动子顺式元件种类和数量差异较大,直系同源基因的启动子顺式元件种类和数量很相似。对日本晴、93-11和东乡野生稻7 d幼苗4℃冷处理2 h的实时荧光定量PCR分析发现早期冷响应基因可分为激活型(DREB1A/1B/1C/1E/1F/1G/1H)和抑制型(DREB1D/1I/1J)。在日本晴、93-11和东乡野生稻冷激活型基因中,DREB1B/1G/1H均是冷处理后响应最快的一级冷响应因子,且启动子均含有至少一个拷贝的CAMTA转录因子结合元件CM2(CCGCGT)。OrDREB1B/1C/1E/1F/1G/1H在东乡野生稻4℃冷处理4 h后的表达量均高于栽培稻同源基因的表达量。9种稻属植物的CBF/DREB1基因亚家族的分子进化分析结果为低温抗性基因的挖掘和利用提供了前期基础。
- 霍晨敏袁敏张宝文王瑞菊
- 关键词:野生稻启动子分析
- 蛋白激酶BIN2的纯化及活性分析
- 2017年
- BIN2是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在油菜素内酯(BR)信号转导中发挥重要作用。为了获得具有激酶活性且不带标签的BIN2蛋白,将BIN2基因构建到带eXact标签的pPAL8表达载体上,获得BIN2基因的原核表达载体eXact-BIN2,转化大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)。摸索合适的诱导条件后成功诱导出51 kD的eXact-BIN2蛋白。经eXact纯化介质纯化并切除标签,获得质量较高、不带标签的BIN2蛋白。该BIN2蛋白具有较高的激酶活性,能够在体外磷酸化MBP-BZR1蛋白。
- 袁敏齐玉荣王瑞菊
- 关键词:磷酸化蛋白激酶蛋白纯化
- 利用蛋白质组学解析油菜素内酯信号传导的分子机理
- 油菜素内酯(brassinosteroids,简称BR)是主要的植物生长调节激素之一,参与调节了细胞的伸长和分化等许多植物生长发育过程.为了解析BR信号传导的分子机理,我们利用2D-DIGE的蛋白质组学方法找到了一批BR...
- 王瑞菊张宝文刘朦朦李艳婕王小龙汤文强
- 关键词:油菜素内酯信号传导蛋白质组学