张萍
- 作品数:2 被引量:8H指数:1
- 供职机构:安徽医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金:国家级大学生创新创业训练计划国家自然科学基金安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 转录因子Runx2对人乳腺癌MDA-MB-231细胞上皮-间充质转化能力的影响被引量:7
- 2019年
- 目的:建立稳定敲减Runt相关转录因子2(Runx2)表达的人乳腺癌MDA-MB-231细胞系,探讨Runx2对MDA-MB-231细胞上皮-间充质转化(EMT)、转移和侵袭能力的影响。方法:利用LV-Runx2-RNAi慢病毒载体感染MDA-MB-231细胞,构建稳定低表达Runx2的MDA-MB-231细胞株,检测比较Runx2表达水平对MDA-MB-231细胞的形态及E-cadherin、N-cadherin、β-catenin和基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达的影响。侵袭实验和软琼脂集落形成实验分析比较抑制Runx2表达对乳腺癌细胞侵袭和非锚定生长能力的效应。结果:E-cadherin蛋白表达在敲减Runx2表达的MDA-MB-231细胞中明显高于常规MDA-MB-231细胞(P<0.05),而N-cadherin、β-catenin和MMP-9蛋白表达在敲减Runx2表达的MDA-MB-231细胞中明显低于常规MDA-MB-231细胞(P<0.05)。敲减Runx2表达的MDA-MB-231细胞侵袭和非锚定生长能力明显低于常规MDA-MB-231细胞(P<0.05)。结论:在人乳腺癌MDA-MB-231细胞中抑制Runx2表达可以通过调控EMT相关蛋白的表达进而抑制乳腺癌细胞的EMT过程,从而对细胞的侵袭和转移起负调控作用。
- 张萍何晓刚徐晓丹张露刘雪刘亚坤刘亚坤姜玉汪思应
- 关键词:乳腺癌肿瘤转移上皮-间充质转化
- miR-205慢病毒表达载体的构建及其对乳腺癌细胞作用的初步研究被引量:1
- 2017年
- 目的构建micoRNA-205(miR-205)慢病毒表达载体,感染乳腺癌细胞MB231,建立稳定表达miR-205的MB231细胞株,观察其增殖能力的变化。方法酶切慢病毒载体GV369,设计并合成miR-205引物,通过PCR扩增目的基因连接到慢病毒载体上。对重组质粒双酶切鉴定,进行慢病毒hsa-miR-205的包装和滴度测定。用构建好的慢病毒感染MB231细胞,定量PCR检测细胞中miR-205表达水平的变化,MTT和划痕实验观察过表达miR-205后MB231细胞增殖和迁移能力的变化。结果测序显示,目的基因连接慢病毒载体成功。慢病毒稳定感染了MB231,定量PCR结果显示,感染hsa-miR-205的MB231中miR-205表达明显提高,MTT和划痕实验结果显示感染后MB231的细胞增殖和迁移能力受到抑制。结论成功构建了miR-205慢病毒表达载体,并建立了稳定表达miR-205的细胞株MB231,显示其可能负调控乳腺癌细胞的恶性生物学行为,为后期进一步研究miR-205的功能和机制奠定了基础。
- 范楚苓张萍孙彩虹钱晨戚博赵茹肖荣琴刘亚坤李菲菲
- 关键词:慢病毒乳腺癌细胞增殖