申永超
- 作品数：5 被引量：10H指数：3
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- PFOA染毒对胎盘11β-HSD2活性的影响
- 2017年
- 目的评价孕期PFOA染毒对胎鼠生长发育及胎盘11β-HSD2活性的影响。方法将孕期为11d(GD11)的18只SD雌性大鼠,随机分为3组给予不同剂量的PFOA(0,5,20mg·kg-1),连续灌胃7d,在GD19d处死孕鼠取胎鼠。对胎鼠的体长、体重以及胎盘的重量进行测量,放射性TLC薄层扫描检测胎盘11β-HSD2的酶学活性,Westen Blot检测胎盘11β-HSD2的表达。结果 PFOA染毒后,对胎鼠的数量没有显著的影响;对胎鼠的体重称量、胎鼠体长、胎盘的重量测量发现:染毒组与对照组比较均有统计学意义(P<0.01);通过酶学检测发现:在PFOA低剂量和高剂量组,11β-HSD2对皮质酮的灭活能力逐渐下降,高剂量组胎盘中11β-HSD2活性显著性降低(P<0.01)。结论 PFOA染毒后可以导致胎鼠宫内发育不良,影响胎盘11β-HSD2的活性。
- 武玉芝李洪志邢宇申永超赵冰海
- 关键词：宫内生长受限PFOA胎盘
- 糖尿病肾病小鼠肾组织与细胞中miR-92b表达及其对纤维化的影响被引量：4
- 2019年
- 目的观察糖尿病肾病(DN)小鼠及人肾小管上皮细胞中微小RNA 926(miR-92b)的表达变化,并探讨其对肾纤维化的影响与机制。方法 (1)小鼠实验:选取8周龄雄性小鼠12只,随机分为Dia组6只和Con组6只,Dia组腹腔内一次性注射STZ溶液,5个月后即制备成功DN模型; Con组注射等量柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。取两组小鼠肾组织,采用RT-PCR法检测miR-92b表达,Western blotting法检测磷脂酰肌醇-3激酶-蛋白激酶(PI3K/Akt)相关蛋白Akt、p-Akt和纤维链接蛋白(FN)蛋白表达。(2)细胞实验:培养人肾小管上皮细胞株HK-2,分为高糖组、低糖组、高渗对照组,分别用25 mmol/L右旋葡萄糖、5 mmol/L右旋葡萄糖、25 mmol/L左旋葡萄糖刺激24 h,采用RT-PCR法检测miR-92b表达,Western blotting法检测PI3K/Akt信号通路相关蛋白Akt、p-Akt和FN蛋白表达。将HK-2细胞分为DG组、HG组、HG+miR-92b组和HG+Neg组,DG组用25 mmol/L左旋葡萄糖刺激24 h,HG组、HG+miR-92b组和HG+Neg组用25 mmol/L右旋葡萄糖刺激24 h;然后采用细胞瞬时转染技术,将miR-92b转染至HG+miR-92b组细胞中,将miRNEG对照转染至HG+Neg组细胞中,HG组、DG组不转染。转染24 h后收集细胞,采用Western blotting法检测Akt、p-Akt和FN蛋白表达。结果与对照组相比,糖尿病肾病模型组小鼠肾组织和细胞中miR-92b的表达量降低,p-Akt/Akt和FN/β-actin相对蛋白表达量升高(P均<0. 05)。与DG组相比,p-Akt/Akt和FN/β-actin相对蛋白表达量在HG组HK-2细胞中增高(P均<0. 05);与HG组相比,HG+92b组p-Akt/Akt和FN/β-actin相对蛋白表达量均降低(P均<0. 001)。结论 DN小鼠及细胞中miR-92b表达水平降低,PI3K/Akt信号通路被激活和FN mRNA表达水平升高,过表达miR-92b可抑制PI3K/Akt信号通路、降低FN蛋白表达,从而减轻纤维化。
- 申永超蔡胜艳董天庞晨杨伟振
- 关键词：糖尿病肾病蛋白激酶B磷酸化AKT肾纤维化
- miR-1与糖尿病心肌肥大的相关性被引量：3
- 2017年
- 目的探讨糖尿病心肌病心肌肥大与miR-1表达量之间的关系。方法给C57BL/6小鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ),建立糖尿病心肌病心肌肥大模型,8周后取心脏组织并称其重量,提取RNA并逆转录,用qRT PCR检测miR-1的表达,检测糖尿病模型小鼠心脏组织中的相关靶基因BNP和ANP并确定糖尿病心肌病心肌肥大模型建立成功。培养大鼠心肌细胞H9C2细胞,对细胞进行高糖和低糖处理,24h后收集细胞,提取RNA并逆转录,用qRT PCR检测miR-1的表达。收集正常人血清,1型和2型糖尿病病人血清以及1型糖尿病心肌肥大病人血清,检测血清中miR-1的表达。Western blot检测高糖和低糖处理24h的H9C2细胞中p-Akt和AKT的表达。向H9C2细胞中加入Akt抑制剂LY294002,qRT PCR检测miR-1的表达量。结果 qRT PCR检测发现糖尿病心肌肥大小鼠心脏组织中的miR-1的表达降低,高糖处理的H9C2细胞中miR-1的表达降低,1型糖尿病心肌肥大病人血清中的miR-1的表达降低。Western blot检测发现高糖处理的H9C2细胞中pAkt和AKT的表达升高,当加入Akt抑制剂LY294002时,qRT PCR检测发现miR-1的表达量升高。结论糖尿病心肌肥大时,miR-1起到了关键作用,并且糖尿病心肌肥大的心脏组织中PI3K-Akt信号通路明显抑制了miR-1的表达。
- 左魁阳陈梦茜邢宇申永超金秀东
- 关键词：PI3K-AKT信号通路微小RNA-1
