目的比较乙型肝炎(乙肝)肝硬化组和正常组之间骨髓间充质干细胞(BMMSCs)对自体CD4+T细胞的体外免疫效应,探索BMMSCs对乙肝肝硬化患者的免疫调节机制。方法所有临床标本均为温州医科大学附属第一医院乙肝肝硬化患者(10例)骨髓和外周血,另选取健康志愿者5例(正常组)。两组CD4+T细胞与自体BMMSCs分别以1∶0、1∶10、1∶20、1∶40比例共培养,72 h后收集细胞及培养上清,用ELISA法测上清中白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-(TNF-)、转化生长因子-(TGF-)及白介素-17(IL-17)水平;实时定量PCR测胞内Treg细胞、Th17细胞特异性转录因子叉头状转录因子3(FoxP3)m RNA、维甲酸相关孤独受体t(rRORt)mRNA的表达量。结果乙肝肝硬化组1∶0培养上清中IL-6、TNF-、IL-17含量显著高于正常组(均<0.05)。与不同比例BMMSCs共培养后,IL-17、TNF-水平显著性下降(均<0.05),并随培养比例的加大更为显著。IL-6水平在1∶0、1∶10、1∶40比例肝硬化组较正常组低,差异均有统计学意义(均<0.05)。与正常组相比,乙肝肝硬化组TGF-出现显著升高,并随培养比例的增加而增加(均<0.05)。乙肝肝硬化组Fox P3m RNA的表达在1∶20、1∶40比例与正常组相比升高均更为显著(均<0.05);而ROR t m RNA的表达受到抑制,1∶10、1∶20、1∶40均出现显著性下降(均<0.05)。结论乙肝肝硬化来源的BMMSCs对自体CD4+T细胞具有负向免疫调节和抑炎作用,并可能与肝硬化炎症微环境密切相关。
