李菁菁
- 作品数:10 被引量:22H指数:2
- 供职机构:河北医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金:河北省自然科学基金国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- FAK和ILK介导骨桥蛋白诱导的血管平滑肌细胞黏附和迁移被引量:9
- 2006年
- 黏着斑激酶(FAK)和整合素偶联激酶(ILK)是整合素信号途径中的重要信号转导分子,为阐明两者在血管平滑肌细胞(VSMC)黏附和迁移中的作用,以骨桥蛋白(OPN)作为VSMC黏附和迁移的诱导剂,检测其对FAK和ILK磷酸化以及对两者之间结合的影响.在此基础上,用FAK磷酸化特异性抑制剂黏着斑相关非激酶(FRNK)或ILK反义RNA分别阻断FAK磷酸化或ILK表达,进一步探讨两者在VSMC黏附和迁移中所起的作用.结果显示,OPN诱导可促进FAK磷酸化,诱导10min后FAK磷酸化水平升高到对照组的2·4倍;与此同时,ILK的磷酸化受到抑制,30min降至对照细胞的44·6%.OPN诱导FAK磷酸化的同时使FAK与ILK的结合减少.外源性FRNK在VSMC中的过表达显著降低FAK的磷酸化水平,促进ILK磷酸化和FAK与ILK之间的结合,抑制VSMC的黏附和迁移.用ILK反义RNA抑制ILK表达使VSMC在OPN上的黏附增加1·8倍,迁移细胞数降低45·5%.结果提示,FAK和ILK介导OPN诱导的VSMC黏附和迁移过程,两者通过对同一刺激信号产生不同的磷酸化变化而对VSMC的黏附和迁移产生不同的影响.
- 李菁菁温进坤韩梅
- 关键词:FAKILK迁移血管平滑肌细胞
- Src介导骨桥蛋白诱导的血管平滑肌细胞黏附和迁移过程被引量:2
- 2006年
- 为阐明酪氨酸激酶Src在整合素被骨桥蛋白(OPN)激活所触发的细胞黏附和迁移信号途径中所起的作用,应用Src特异性抑制剂PP2阻断Src,观察OPN诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)黏附和迁移活性的改变,并利用免疫沉淀检查PP2对整合素下游信号分子黏着斑激酶(FAK)和整合素偶联激酶(ILK)磷酸化及其相互作用的影响。结果显示,PP2可明显抑制OPN诱导的VSMC黏附和伤口愈合(黏附和迁移活性分别为对照组的76.6%和33.8%);OPN可显著诱导FAK磷酸化(磷酸化水平达对照组的1.9倍),促进ILK去磷酸化,并使FAK与ILK的结合减少(降至对照组的46.4%)。10μmol/LPP2可明显抑制OPN诱导的FAK磷酸化、拮抗OPN诱导对ILK的去磷酸化作用、促进FAK与ILK之间的结合。研究结果表明,Src作为OPN-整合素-FAK信号途径中的信号分子,通过影响FAK和ILK的磷酸化以及两者之间的相互作用来调节VSMC的黏附和迁移活性。
- 李菁菁温进坤韩梅
- 关键词:血管平滑肌细胞SRC黏着斑激酶
- 鼠妇水提取物和乙酸乙酯提取物对骨桥蛋白诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响及机制被引量:1
- 2016年
- 目的观察鼠妇水提取物和乙酸乙酯提取物对骨桥蛋白(OPN)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响,探讨其作用机制。方法采用常规贴块法分离培养SD大鼠VSMC,收集对数生长期的第3-5代细胞随机分为14组,对照组常规培养,OPN组加入终浓度为20 mg/mL的OPN,鼠妇水提取物高、中、低剂量组分别加入终浓度为2、1、0.5 mg/mL的鼠妇水提取物,鼠妇乙酸乙酯提取物高、中、低剂量组分别加入终浓度为1、0.5、0.25 mg/mL的鼠妇乙酸乙酯提取物,OPN+鼠妇水提取物高、中、低剂量组分别加入终浓度为20 mg/mL的OPN及终浓度为2、1、0.5 mg/mL的鼠妇水提取物,OPN+鼠妇乙酸乙酯提取物高、中、低剂量组分别加入终浓度为20 mg/mL的OPN及终浓度为1、0.5、0.25 mg/mL的鼠妇乙酸乙酯提取物,各组均培养24 h;采用MTT法检测细胞增殖情况(OD值),采用Western boltting法检测细胞FAK蛋白相对表达量。结果 OPN组OD值及FAK蛋白相对表达量均高于其他各组(P均〈0.05);OPN+各浓度鼠妇水提取物及OPN+各浓度鼠妇乙酸乙酯提取物组OD值及FAK蛋白相对表达量均低于OPN组(P均〈0.05),各浓度组间比较差异均无统计学意义(P均〉0.05)。结论鼠妇水提取物和乙酸乙酯提取物对OPN诱导的VSMC增殖均具有抑制作用,抑制FAK胞内信号传导可能是二者共同的作用机制。
- 段哲萍于新江吴大勇李菁菁赵娟
- 关键词:血管平滑肌细胞增殖黏着斑激酶
- 鼠妇提取物可抑制ILK调节骨桥蛋白诱导的血管平滑肌细胞增殖
- 2017年
- 背景:前期实验通过MTT法及细胞划痕实验检测出鼠妇可影响血管平滑肌细胞的增殖和迁移过程,但其相关作用机制尚不清楚。目的:探讨鼠妇对于骨桥蛋白诱导的血管平滑肌细胞增殖影响的相关分子机制。方法:按常规方法培养SD大鼠胸腹主动脉血管平滑肌细胞,选取3-5代细胞用于实验。实验分为8组:对照组、骨桥蛋白组、鼠妇水提取物(0.5,1.0,2.0 g/L)+骨桥蛋白组、鼠妇乙酸乙酯提取物(0.25,0.5,1.0 g/L)+骨桥蛋白组。加入相应药物培养24 h后,收集细胞,采用Western bolt检测PCNA、ILK蛋白表达水平。结果与结论:(1)在鼠妇水提取物及乙酸乙酯提取物的作用下血管平滑肌细胞PCNA蛋白表达下降,其中0.5 g/L的鼠妇水提取物组和1.0 g/L的鼠妇乙酸乙酯提取物组抑制作用最明显,分别为骨桥蛋白组的77.8%和74.1%;(2)低质量浓度(0.5 g/L)的鼠妇水提取物抑制ILK表达作用明显,是骨桥蛋白组的81.4%;鼠妇乙酸乙酯提取物作用下血管平滑肌细胞ILK的表达水平没有明显改变;(3)结果表明,鼠妇水提取物及乙酸乙酯提取物均可抑制骨桥蛋白诱导的血管平滑肌细胞增殖,且鼠妇水提取物该作用可能与ILK蛋白通路有关。
- 段哲萍于新江李菁菁赵娟
- 关键词:骨桥蛋白质鼠妇骨桥蛋白ILK
- 任务驱动式翻转课堂在医学遗传学实验课的应用被引量:10
- 2017年
- 医学遗传学是一门重要的医学基础必修课,也是一门以实验为基础的自然科学。翻转课堂是一种新型的教学模式,提倡以学生为主体的现代教学理念。在医学遗传学实验教学中,引入翻转课堂教学模式,设置问题作为学习任务,具体实施分为任务驱动式的课前自学和学生为主的课堂内化两部分。任务驱动式翻转课堂教学有效提高学生的学习主动性和学习效率,获得了较好的教学效果。
- 雷宇华吕品赵娟李菁菁
- 关键词:医学遗传学实验教学