赵景川
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 供职机构：浙江理工大学生命科学学院新元医药生物技术研究所更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 靶向肝癌细胞的嵌合AAV建库及筛选
- 2012年
- 采用Shuffling的方法,将AAV1-9 Cap基因序列进行改组,筛选出高效靶向肝癌细胞的嵌合AAV载体。以pAAV-MCS载体为骨架,构建出含AAV2ITR和Rep2序列的pAdB载体,在此基础上,构建含有嵌合Cap序列的pARC载体库,用于转染293细胞,并加入5型腺病毒(Ad5),包装出嵌合AAV病毒。然后将包装出的嵌合AAV病毒与Ad5共感染BEL7402肝癌细胞,经过三轮筛选后,初步筛选出可以靶向肝癌细胞的嵌合AAV。最后将筛选出的AAVRep2嵌合Cap基因的融合片段连接到pMD18-T载体上,构建出pARC-T载体,与AAV-EGFP质粒共转染293细胞,并加入Ad5,包装出病毒基因组含EGFP基因、病毒外壳为嵌合Cap的AAV病毒(cAAV-EGFP),并用其感染BEL7402细胞,观察绿色荧光的表达。最后观察到绿色荧光表达,证明筛选出了靶向BEL7402肝癌细胞的嵌合AAV。
- 赵景川严巧灵钱其军
- 关键词：SHUFFLING靶向肝癌细胞
