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李金红
作品数:
2
被引量:4
H指数:2
供职机构:
辽宁省农业科学院
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相关领域:
生物学
农业科学
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合作作者
霍岩
锦州医科大学
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机构
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文献类型
2篇
中文期刊文章
领域
1篇
生物学
1篇
农业科学
主题
1篇
幼胚
1篇
玉米
1篇
玉米幼胚
1篇
农杆菌
1篇
农杆菌介导
1篇
农杆菌介导法
1篇
抗虫
1篇
抗虫基因
1篇
基因
1篇
高粱
1篇
GATEWA...
机构
2篇
辽宁省农业科...
2篇
锦州医科大学
作者
2篇
李金红
1篇
霍岩
传媒
1篇
饲料研究
1篇
农药
年份
1篇
2017
1篇
2016
共
2
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玉米幼胚农杆菌高效转化体系的构建
被引量:2
2017年
研究以携带有CYP71E1-PMDC141[含β-葡萄糖苷酸酶基因(GUS)]质粒的EHA105菌株侵染玉米优良自交系A188幼胚,经7 d共培养,统计GUS基因的转化效率,对农杆菌介导玉米幼胚的外植体大小、农杆菌浓度、侵染时间和热预处理时间等影响因子进行优化。结果表明,幼胚为1.0~1.2 mm时,GUS基因的转化效率最高为35.3%;农杆菌菌液的侵染浓度为OD_(660)=0.8时,GUS基因的转化效率最高为46.8%;侵染时间为5 min时,GUS基因的转化效率最高为46.4%;43℃热预处理3 min时,GUS基因的转化效率最高为45.4%。因此选择幼胚1.0~1.2 mm、菌液浓度OD_(660)=0.8、侵染时间5 min及43℃热预处理3 min作为GUS基因最佳转化条件。
霍岩
李金红
付莉
关键词:
农杆菌介导法
玉米
幼胚
高粱抗虫基因CYP71E1表达载体的Gateway技术构建
被引量:2
2016年
[目的】探讨高梁HCN途径关键酶CYP71EI基因对玉米幼苗抗螟虫的影响,为培育抗玉米螟新品种奠定基础。[方法】以高梁自交系BTx623幼苗总RNA为模板,反转录成cDNA,利用聚合酶链式反应(PCR)扩增出1854bp的CYP71E1基因全长。利用基于位点特异性重组的Gateway技术,通过TOPO克隆将该基因克隆到入门克隆(vCRw8/GW/TOP00),在LR克隆酶作用下将入门克隆重组到表达载体(pMDC141)中。【结果】成功构建pMDC141-CYP71E1表达载体并将构建好的表达载体导人农杆菌EHA105,PCR和测序表明所构建的载体及获得的工程菌与预期的完全一致。【结论】Gateway克隆技术与传统的克隆方法相比具有阳性克隆率高、快速、灵活等优点。
霍岩
李金红
付莉
关键词:
高粱
GATEWAY
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