赵善成
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- 一种SUMO-Heparinase Ⅰ融合酶的可溶性表达与纯化被引量：1
- 2016年
- 克隆自肝素黄杆菌(Flavobacteriumheparinum)的肝素酶Ⅰ(Heparinase Ⅰ,EC4.2.2.7)广泛应用于低相对分子质量肝素(LMWH,low molecular weight heparin)制备研究。然而,该酶在大肠杆菌表达体系中易形成包涵体,限制了其大量应用。将可溶性配体SUMO(small ubiquitin-like modifier,小泛素类似修饰蛋白质)与C端带有6×His标签的肝素酶基因片段N-端融合表达,菌体总蛋白质和可溶性蛋白质SDS-PAGE电泳表明,N端融合SUMO的肝素酶Ⅰ可溶性表达比率显著提高;通过镍-亲和柱层析得到均一纯化的融合肝素酶Ⅰ,融合酶酶学性质表明该融合酶可直接应用于肝素降解而无需切除SUMO标签,为肝素酶Ⅰ的广泛应用提供了良好的技术基础。
- 赵善成王振程咏梅陈敬华
- 关键词：可溶性表达
- 肝素化单壁碳纳米管的制备、表征及生物相容性
- 2014年
- 背景:碳纳米管具有独特的结构和理化性质,在药物载体、生物传感器及生物材料等领域应用前景广阔,但其疏水性强,易缠绕聚集,并且具有一定的细胞毒性,致生物相容性差。目的:制备肝素化单壁碳纳米管,探讨表面肝素化对碳纳米管水溶性及生物相容性的影响。方法:采用共价接枝的方法制备肝素化单壁碳纳米管,通过红外光谱进行表征;考察肝素化单壁碳纳米管在水溶液中的分散情况和稳定性;硫酸咔唑显色测定单壁碳纳米管表面的肝素多糖接枝量;测定抗Ⅹa因子活性和活化部分凝血酶时间研究肝素化单壁碳纳米管的血液相容性,用MTT法研究10,20,40 mg/L肝素化单壁碳纳米管浸提液与小鼠骨髓干细胞的相容性。结果与结论:肝素被成功接枝到单壁碳纳米管表面,肝素接枝量为257.53 mg/g;肝素化单壁碳纳米管在水溶液中分散良好,具有很好的悬浮稳定性;肝素化单壁碳纳米管抗Ⅹa因子活性为36.53 U/mg,具有明显的抗栓活性,能显著延长绵羊血浆活化部分凝血活酶时间,表现出显著的抗凝活性;肝素化单壁碳纳米管细胞毒性低,并对细胞增殖具有一定的促进作用。表明肝素化不仅能提高碳纳米管在水溶液中的分散性和稳定性,而且赋予其良好的血液相容性和细胞相容性。
- 彭一清陈荆晓滕丽萍赵善成程咏梅邓超陈敬华
- 关键词：碳纳米管抗凝血血液相容性细胞相容性活化部分凝血酶时间
