钟佳玲
- 作品数:3 被引量:3H指数:1
- 供职机构:中国医学科学院肿瘤医院更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 组织蛋白酶D对大肠癌侵袭与转移的影响
- 目的通过二维凝胶电泳筛选T3、T4期大肠癌,淋巴结转移组与非转移组差异表达蛋白,经过质谱鉴定出33个差异表达蛋白,组织蛋白酶D是其中差异比较明显的蛋白之一。本研究的目的在于探讨组织蛋白酶D对大肠癌侵袭与转移的影响。方法采...
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- 文献传递
- 利用pTet-Off系统研究NAIF1对食管癌细胞系EC9706生物学行为的影响
- 2011年
- 目的:利用pTet-off可诱导表达系统将NAIF1重组质粒导入食管癌EC9706中进行生物学行为影响研究。方法:构建pTRE2-NAIF1质粒,与PTK-Hyg质粒共转染入可诱导表达细胞系TF93(由EC9706构建而得),经筛选并鉴定获得稳定可诱导表达克隆。以此克隆采用MTT法检测细胞增殖、流式细胞术(FCM)检测细胞周期、Transwell小室法检测细胞迁移和检测细胞黏附能力的改变。结果:经筛选并鉴定获得了稳定的可诱导表达TF93-pTRE2-NAIF1克隆。NAIF1在体外可以抑制EC9706细胞增殖、导致G0/G1期细胞阻滞、抑制其迁移和黏附能力。结论:NAIF1能抑制食管癌细胞系EC9706的恶性生物学行为,为食管癌的基因治疗提供了可能的新靶点。
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- 关键词:食管癌EC9706
- 人细胞核诱导凋亡因子1在大肠杆菌中的表达、纯化及多克隆抗体制备被引量:3
- 2010年
- 目的:构建人核凋亡诱导因子1(NAIF1)原核表达质粒,在大肠杆菌中表达及纯化NAIF1融合蛋白,制备兔抗NAIF1多克隆抗体,并对其特性进行初步鉴定。方法:PCR法获得人NAIF1序列并将其克隆到原核表达载体pET-32a中,重组表达质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达蛋白,经变性、Ni+柱亲和纯化、复性后得到纯化的重组人NAIF1蛋白,免疫大耳白兔,制备兔抗人NAIF1多抗血清,以ELISA和Westernblot方法检测其效价和特异性。结果:成功获得了高纯度的人NAIF1重组蛋白和高效价的兔抗人NAIF1多抗血清,ELISA检测多抗效价达到1∶500000,Westernblot检测证明多抗特异性良好。结论:获得了高纯度的人NAIF1重组蛋白和兔抗人NAIF1多抗血清,为后续针对NAIF1基因功能的研究提供了重要实验材料。
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- 关键词:原核表达蛋白纯化多克隆抗体