陈建玲
- 作品数:11 被引量:57H指数:3
- 供职机构:广东省职业病防治院更多>>
- 发文基金:广州市医药卫生科技项目广州市科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学更多>>
- 伏马毒素B1时间分辨免疫荧光检测试剂盒的研制被引量:3
- 2013年
- 目的:为快速检测食品中的伏马毒素B1(fumonisin B1,FB1),制备抗FB1的单克隆抗体并利用该抗体研制基于时间分辨免疫荧光分析方法的检测试剂盒。方法:在建立抗伏马毒素B1单克隆杂交瘤细胞株的基础上,采用小鼠腹腔注射法生产大量腹水,经Protein A亲和层析柱分离纯化、透析后得到单克隆抗体,利用所得抗体建立间接竞争性时间分辨免疫荧光分析试剂盒并优化各参数:线性范围、检出限及与黄曲霉毒素(aflatoxins,AFB1)、呕吐毒素(deoxynivalenol,DON)和载体蛋白BSA等的交叉反应性;对试剂盒稳定性采用37℃破坏实验;采用3个浓度的加标回收试验确定回收率;对19份样品及FB1玉米盲样进行检测,并同时用市售ELISA试剂盒进行验证。结果:所研制试剂盒的最低检出浓度为2ng/mL,检测线性范围为2~512ng/mL,线性方程2为Y=-0.644X+12.872(R=0.998),50%抑制浓度为10.07ng/mL,加标提取后,玉米样品3个加标水平的回收率在78.32%~116.76%之间,与AFB1、DON和BSA均无交叉反应性,试剂盒常温下可保存315d以上。结论:本研究建立了快速、敏感检测FB1的时间分辨免疫荧光检测试剂盒。
- 陈建玲李文学董志宁陈雯朱伟
- 关键词:单克隆抗体时间分辨免疫荧光试剂盒
- 吡格列酮对KKAy小鼠胰岛素敏感性的影响及机制被引量:1
- 2014年
- 目的观察吡格列酮(Pio)对胰岛素抵抗状态KKAy小鼠胰岛素敏感性的影响,并探讨其可能的机制。方法将16只8周龄的雄性KKAy小鼠随机分成2组:胰岛素抵抗模型组和Pio干预组,每组8只,另以8只同周龄的雄性C57BL/6J小鼠为模型对照组,3组小鼠均饲喂AIN93G饲料,Pio组在饲料中添加Pio,干预12周,测定Pio对小鼠血糖、血清胰岛素水平、葡萄糖耐量、胰岛素耐量等方面的影响,通过ELISA实验测定Pio对小鼠血清脂联素和瘦素水平的影响,通过Real time PCR实验测定Pio对小鼠附睾脂肪组织的脂联素和瘦素mRNA水平的影响,通过Western blot实验测定Pio对小鼠肝脏和附睾脂肪组织中过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)蛋白、胰岛素受体底物1(IRS1)及蛋白激酶B(PKB/AKT)的磷酸化水平的影响。结果 Pio干预可降低KKAy小鼠血糖、血清胰岛素水平,改善胰岛素耐量和葡萄糖耐量,升高血清脂联素水平,降低瘦素水平,同时增加附睾脂肪组织脂联素的mRNA表达水平。Pio干预可使KKAy小鼠肝脏和附睾脂肪组织中PPARγ蛋白、IRS1和AKT磷酸化水平均升高。结论 Pio可改善KKAy小鼠胰岛素抵抗,增加小鼠胰岛素敏感性,这些作用可能与Pio增加肝脏及附睾脂肪组织的PPARγ蛋白表达,从而激活胰岛素信号转导通路的蛋白有关。
- 吴锦银陈思凡李文学陈建玲朱伟冯翔
- 关键词:吡格列酮胰岛素抵抗过氧化物酶增殖物激活受体Γ胰岛素受体底物1
- 广州某茶叶市场普洱茶中多种生物毒素污染现状调查被引量:37
- 2011年
- 目的:为了解广州某茶叶市场湿仓储存普洱茶中真菌毒素的污染情况,对所抽取的70份普洱茶样本中黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)、伏马毒素(fumonisin B1,FB1)、呕吐毒素(脱氧雪腐镰刀菌烯醇,deoxynivalenol,DON)和T-2毒素的浓度水平进行检测,旨在为制定有关普洱茶叶安全卫生管理规范和相关的卫生标准提供数据资料。方法:随机抽取广州某茶叶市场湿仓储存普洱茶70份,破碎、浸提、过滤后采用免疫亲和层析净化-高效液相色谱法检测AFB1,ELISA试剂盒检测FB1、DON和T-2毒素的污染情况。结果:本次调查所采70份普洱茶样品中,AFB1污染水平超出标准规定限值(5μg/kg)的有8例(11.43%),DON污染水平超出标准规定限值(1 mg/kg)的有63例(90%),FB1和T-2毒素污染水平均未超出标准规定限值(分别为1 mg/kg和100μg/kg)。结论:本调查结果提示广州市该茶叶市场中的湿仓储存普洱茶存在不同程度的AFB1及DON污染情况,而FB1及T-2毒素虽未超出标准规定的限值,但在样品中均可检出,应引起广泛重视。
- 陈建玲李文学杨光宇周志涛陈雯朱伟刘华章
- 关键词:普洱茶伏马毒素呕吐毒素T-2毒素
- 玻连蛋白促进肝癌细胞株增殖及迁移的初步研究被引量:4
- 2014年
- 目的:了解玻连蛋白(VTN)对肝肿瘤细胞株SMMC 7 721增殖和迁移能力的影响。方法:采用不同浓度VTN包被培养皿后接种、培养细胞,采用激光共聚焦显微镜观察VTN包被后细胞骨架成分微管蛋白形态的变化,用细胞增殖试剂分析VTN对细胞增殖率的影响及分析VTN对凋亡诱导剂抑制增殖作用的影响,采用Transwell侵袭实验检测VTN对细胞迁移能力的影响。结果:激光共聚焦观察结果显示VTN包被有助于促进细胞贴壁及细胞骨架蛋白形态结构的维持;VTN可促进肿瘤细胞的生长且呈剂量效应,并可减弱凋亡诱导剂对细胞增殖的抑制;Transwell侵袭实验结果显示VTN包被可促进细胞迁移。结论:体外实验条件下,VTN有助于肝癌细胞株SMMC 7 721的增殖及迁移,提示VTN在肝癌发生过程中可能具有促进肿瘤细胞增殖和迁移的生物学作用。
- 梁晓芸李文学陈建玲李军涛吴锦银杨光宇朱伟
- 关键词:肝细胞癌细胞增殖肿瘤细胞迁移
- 广州市水源水、出厂水及珠江广州河段微囊藻毒素污染现状调查被引量:3
- 2010年
- 目的了解广州市自来水厂水源水、出厂水和珠江广州河段微囊藻毒素(MCs)污染情况。方法采集广州市自来水厂水源水、出厂水和珠江广州河段水样超声破碎微囊藻毒素并过滤后采用ELISA试剂盒进行检测。结果本次调查所采水源水和出厂水各6个样品中,有2个水源水样本MCs浓度超过国家标准(1μg/L)。出厂水亦可检出MCs,但与相应的水源水相比,浓度均明显下降且没有超出标准规定的限制。珠江广州河段的16个样品检测结果提示珠江水中也存在有MCs污染,个别河段MCs浓度大于1μg/L。结论本调查结果提示广州市水源水、出厂水及珠江广州河段均存在MCs污染且个别样品浓度较高,应引起充分重视。
- 陈建玲李文学张全新周颖陈雯朱伟刘华章
- 关键词:微囊藻毒素水源水出厂水毒素污染
- 抗伏马菌素B_1单克隆抗体的制备及鉴定被引量:2
- 2012年
- 目的建立抗伏马菌素B1(FB1)的单克隆杂交瘤细胞株,制备抗FB1的单克隆抗体(McAb)。方法采用FB1-KLH偶联物小剂量长周期免疫BALB/c小鼠后,采用细胞融合方法获得分泌抗FB1的杂交瘤细胞株,采用多次亚克隆的方法建立了4株稳定分泌抗FB1抗体的杂交瘤细胞株。腹水诱生法获得大量McAb,采用抗体亚类测定试剂盒鉴定抗体的亚类,SDS-PAGE测定抗体分子量,McAb的特异性和灵敏度用间接竞争抑制ELISA。结果免疫小鼠血清检测结果显示经过5次免疫后血清的效价稳定在1×10-6,经过4次亚克隆后建立4株稳定分泌抗FB1抗体的杂交瘤细胞株,获得腹水,纯化抗体,抗体亚类属于IgG2a类,轻链为κ,轻链和重链的相对分子质量分别是55000和32000,ELISA检测抗体特异性显示可与FB1发生特异性反应,采用此抗体建立间接竞争抑制ELISA方法的线性范围在2~500ng/ml。结论制备了特异性和灵敏度较高的抗FB1单克隆抗体,为建立伏马菌素免疫学检测方法打下良好基础。
- 陈建玲李文学董志宁陈雯朱伟
- 关键词:伏马菌素B1杂交瘤细胞株单克隆抗体
- 一次性筷子、牙签及纸杯浸提液对小鼠L-929细胞的毒性作用被引量:5
- 2011年
- 目的:评价一次性筷子、牙签及纸杯浸提液对小鼠L-929细胞的毒性作用。方法:参照国家标准,制备一次性筷子、牙签及纸杯等样品浸提液,采用样品浸提液配制培养液培养小鼠L-929细胞,在光镜下观察细胞生长形态,采用细胞计数法计算细胞失贴壁率,采用WST-1法测定细胞活性并计算细胞增殖度。结果:与对照组相比,采用浸提液配制的细胞培养液培养细胞4d或7d后,各组细胞出现凋亡或坏死征象,细胞失贴壁率明显升高(P<0.05),细胞活性及细胞增殖度明显下降(P<0.05)。结论:一次性筷子、牙签及纸杯用具等能影响L-929细胞生长及增殖,可能具有潜在的毒性作用。
- 陈思凡李文学贾慧影陈建玲杨光宇朱伟
- 关键词:牙签一次性筷子一次性纸杯
- 伏马毒素B1时间分辨免疫荧光检测试剂盒的研制
- 1988年Gelderbfom等首次分离出伏马毒素(fumonisin),迄今已发现共11种伏马毒素,其中主要且毒性较大的是伏马毒素B族类(fumonisin B,FBs):FB1、FB2和FB3。伏马毒素主要污染玉米及...
- 陈建玲李文学董志宁陈雯赖关朝朱伟
- 关键词:伏马毒素荧光检测
- 大鼠骨骼肌卫星细胞的原代培养和鉴定被引量:1
- 2011年
- 目的采用组织块培养技术探索大鼠骨骼肌卫星细胞的原代培养方法。方法以成年SPF级Sprague-Dawley大鼠为研究对象,采用组织块培养法获取大鼠骨骼肌卫星细胞,并与C2C12成肌细胞进行比较,对两种细胞进行形态学研究及采用免疫荧光和免疫组织化学法测定两种细胞α-actin蛋白和Desmin蛋白的表达及分布,从而对骨骼肌卫星细胞进行鉴定。结果通过组织块培养法获取的细胞增殖旺盛,分化良好。免疫细胞荧光和免疫组织化学实验结果显示,α-actin蛋白和Desmin蛋白在两种细胞胞浆中均有分布。结论用组织块培养法获取的骨骼肌卫星细胞具有良好的增殖与分化能力,用此种方法可培养出高纯度的骨骼肌卫星细胞。
- 陈思凡李文学陈建玲杨光宇刘华章朱伟
- 关键词:骨骼肌卫星细胞
- 玻连蛋白对肝癌细胞株凋亡的抑制效应及可能的机制被引量:2
- 2014年
- 目的了解玻连蛋白(Vitronectin,VTN)对肝肿瘤细胞株SMMC 7721生长的影响及其对抗3,3'-二吲哚甲烷(3,3'-diindolylmethane,DIM)诱导SMMC 7721凋亡的作用,并初步探讨该过程中所涉及的信号分子。方法采用细胞增殖试剂观察VTN对细胞增殖率的影响,采用激光共聚焦显微镜观察VTN微管蛋白形态的影响,采用流式细胞术和Western Blotting观察VTN对抗植物化学物诱导SMMC 7721细胞凋亡及所涉及的信号分子表达变化。结果 VTN可以剂量依赖的方式促进肿瘤细胞的生长,并可抑制细胞凋亡诱导剂对细胞诱导凋亡的作用。结论体外实验条件下,VTN有助于肝癌细胞株SMMC 7721生长并可保护SMMC7721细胞,使其免予受到凋亡诱导剂的作用,提示VTN在肝癌发生过程中可能具有促进肿瘤细胞生长、抑制化学物诱导凋亡的生物学作用。
- 朱伟刘颖芝李文学陈建玲李军涛杨光宇吴锦银梁晓芸
- 关键词:肝细胞癌细胞凋亡半胱天冬酶