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陈远
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1
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供职机构:
中国医学科学院肿瘤医院
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发文基金:
北京市自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
丁镇伟
中国医学科学院肿瘤医院
孙春阳
中国医学科学院肿瘤医院
刘海超
中国医学科学院肿瘤医院
李渊
中国医学科学院肿瘤医院
李奥
中国医学科学院肿瘤医院
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2013
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小鼠多囊蛋白1氨基端多克隆抗体的制备和其生物特性分析
2013年
目的制备针对多囊蛋白1(PC1)胞外区的抗体,为分析PC1胞外区生物特性和功能提供工具。方法根据生物信息学分析结果,PCR扩增编码小鼠Pkd1的氨基端474E-640L的cDNA片段。将该片段克隆到GST融合蛋白表达载体上,在IPTG诱导下产生小鼠Pkd1抗原(mPkd1-N)。纯化浓缩目的蛋白并制备兔抗PC1氨基端多克隆抗体(mPkd1-Np),并以Westernblot法、免疫组化以及免疫荧光方法分析该兔抗PC1氨基端抗体的特异性。结果成功地构建了mPkd1-N片段真核及原核表达载体,在大肠杆菌中实现表达,并制备了抗小鼠PC1氨基端的多克隆抗体mPkd1-Np。通过生化和细胞学方法证实了该抗体针对PC1的特异性。结论成功制备了高效价、特异性的兔抗mPkd1-Np多克隆抗体。
刘海超
李渊
李奥
陈远
孙春阳
丁镇伟
吴冠青
关键词:
PKD1基因
多克隆抗体
常染色体显性遗传多囊肾病
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