吴世安
- 作品数:8 被引量:6H指数:2
- 供职机构:南开大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点实验室开放基金国家重点基础研究发展计划更多>>
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- Hippo信号通路在果蝇遗传学研究中的发现与扩展被引量:2
- 2017年
- Hippo信号通路的发现是利用果蝇遗传学研究重大生物学问题的又一里程碑式的贡献。大量研究表明,Hippo信号通路像早期发现的其他信号通路一样,也在众多的生理与病理过程中扮演着关键角色,如控制器官尺寸和癌症发生。迄今为止,Hippo信号通路的研究过程主要经历了3个阶段:第一,Hippo信号通路的遗传学发现及其核心因子的筛选与鉴定;第二,Hippo信号通路的调控机制研究;第三,Hippo信号通路的多样性生理学功能。现阶段正是研究Hippo信号通路的上游调控和各种功能的阶段,如细胞骨架、机械张力、营养的调控,功能涉及细胞增殖调控、干细胞生物学和免疫等方面。本文按时间顺序综述了在果蝇遗传学研究中Hippo信号通路的发现与扩展过程,并对未来的研究方向进行了展望。
- 孙书国吴世安张雷
- 关键词:果蝇细胞生长
- dRaf1转基因果蝇的构建与表型分析
- 2018年
- 黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)是生物学研究中最重要的模式生物之一.首先,将dRaf1基因克隆到Gal4诱导表达的染色体定点插入载体p UAST-att B质粒后进行显微注射,成功构建了可诱导dRaf1表达的转基因果蝇.将dRaf1转基因果蝇品系与眼睛或翅膀特异性表达GMR-Gal4和Nub-Gal4品系果蝇分别杂交,观察dRaf1在果蝇或翅膀过表达的表型,确定其发育特征.其次,将翅膀中过表达dRaf1的果蝇与HpoRNAi的果蝇杂交发现,dRaf1在果蝇翅膀中的表型明显增强.本研究为大规模筛选修饰dRaf1活性与功能的调节因子奠定基础.
- 王峰梁蕙戴良题田婧怡吴世安
- dRASSF在果蝇细胞中负调控Dmp53的蛋白水平
- 2014年
- 从果蝇细胞cDNA文库克隆得到基因Dmp53,将该基因插入到pAc-HisB载体中,得到的重组DNA成功在果蝇S2细胞中表达.通过免疫荧光对dRASSF和Dmp53亚细胞定位进行了分析,确定了两者均是典型细胞核定位且共转染时存在共定位现象.免疫共沉淀和western blotting分析未检测到dRASSF和Dmp53之间存在相互结合作用,但是dRASSF过表达可以有效地降低Dmp53的蛋白量.为深入阐释dRASSF和Dmp53间的相互关系提供有益的线索.
- 陈颜李超杰王萍林晓惠吴世安
- 肌营养不良蛋白dys参与调控Hippo信号通路被引量:1
- 2021年
- Hippo信号通路最早在黑腹果蝇中发现,现已被证明在哺乳动物中也是保守的.Hippo通路在器官发育和组织稳态中起着重要作用,Hippo信号通路异常与许多癌症的发生相关.Hippo信号通路依赖于核心激酶级联反应,磷酸化转录共激活因子Yorkie(Yki)进而调控下游靶基因的转录.尽管Wts是Hippo通路的关键激酶组分,但其蛋白质活性调节机制仍有待深入研究.通过质谱分析,发现并验证了Hippo信号通路核心激酶Wts与杜氏肌营养不良症相关蛋白dys之间存在相互作用,并发现dys能够通过促进Wts的细胞膜定位激活Wts进而调控果蝇器官大小.
- 张晓亭吴世安
- P因子介导mir-2基因簇原位过表达调节Yki的活性分析被引量:1
- 2017年
- Hippo信号通路在动物器官大小发育和肿瘤发生过程中发挥关键性作用.为了发掘新的Hippo信号通路活性调节因子,通过P因子插入介导基因原位过表达,在果蝇表型修饰筛选中鉴定了1株可以显著增强Hippo信号通路下游效应因子Yki活性的果蝇株MS004.反向PCR定位显示,MS004中P因子位于2号染色体左臂蛋白编码基因spitz的内含子区域;进一步的遗传分析确定,MS004果蝇株通过诱导位于spitz内含子区域的mir-2基因簇原位过表达增强Yki的活性.
- 李珊珊林晓惠吴世安
- 关键词:反向PCR
- 果蝇中Vlet调节Hippo信号通路激酶Wts活性的机制
- 2024年
- Hippo信号通路主要通过调控细胞增殖与凋亡来维持细胞稳态,在器官发育与肿瘤发生过程中扮演着十分重要的角色.Warts(Wts)是Hippo信号通路中的核心激酶,其调控机制十分复杂,寻找新的Wts调控因子对完善Hippo信号通路的研究具有重要意义.以Wts为诱饵蛋白,结合质谱分析发现Copper metabolism MURR1 domain(COMMD)蛋白家族的多个成员可能与Wts结合,免疫共沉淀结果表明Valette(Vlet)可与Wts包含激酶结构域的羧基端互作,并能通过抑制Wts的磷酸化水平抑制其激酶活性,进而促进Yki靶基因的表达.在果蝇体内过表达Vlet同样可以抑制Wts、增强Yki的活性.以上结果揭示了Vlet调控Wts活性的新机制,为进一步理解Hippo信号通路的活性调控机制提供了新的视角.
- 翟超军吴世安
- 关键词:HIPPO果蝇
- N端乙酰转移酶家族敲低细胞系构建及功能研究
- 2016年
- N端乙酰转移酶在肝癌细胞中的研究很少,为更好地研究其功能,本研究构建了全部6种已知的N端乙酰转移酶单基因敲低细胞系.首先设计PLKO载体适应的RNAi序列,将正确的RNAi质粒采用病毒包装并转染肝癌细胞,采用嘌呤霉素筛选,获得稳定细胞株后RT-PCR检测敲低效率,用细胞增殖曲线法检测细胞增殖.RT-PCR显示N端乙酰转移酶敲低细胞系构建成功,细胞增殖实验证实Naa10、Naa20、Naa30、Naa40敲低能够抑制细胞生长,该敲低细胞系的建立为进一步研究N端乙酰化的功能提供了稳定可靠的细胞模型.
- 胡良昌张晓亭吴世安
- 关键词:细胞增殖
- CRISPR/Cas9系统介导果蝇miR-2基因簇的定点敲除被引量:2
- 2019年
- microRNAs可作为肿瘤抑制因子或促进因子发挥作用,其表达与肿瘤的发生发展密切相关.miR-2基因家族成簇表达,是果蝇基因组中编码microRNA的最大的基因家族,但其功能不确定.为了研究miR-2基因家族的功能,本研究利用CRISPR/Cas9系统,成功敲除了miR-2家族位于2号染色体左臂(2L)的基因簇(ΔmiR-2),并初步确定了ΔmiR-2可以抑制促癌因子Yki活性,为研究miR-2家族的功能奠定了基础.
- 翟超军李珊珊李元沛王峰吴世安
- 关键词:果蝇基因敲除