吴小芸
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
- 供职机构：南京医科大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：国家重点实验室开放基金国家自然科学基金南京医科大学科技发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 锌指蛋白281抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞上皮间质转化和细胞外基质合成
- 2024年
- 目的探讨锌指蛋白281(ZNF281)在高糖(HG)诱导的肾小管上皮细胞(RTECs)上皮间质转化(EMT)和细胞外基质(ECM)合成中的作用及机制。方法使用HG诱导RTECs以构建糖尿病肾病模型,分为Control组、HG组和Mannitol组,使用CCK-8检测细胞增殖活力。使用小干扰RNA(siRNA)在HG诱导的RTECs中敲低ZNF281的表达水平,分为Control组、HG组、HG+ZNF281 siRNA组和HG+ZNF281 vector组。使用腺苷单磷酸活化蛋白激酶(AMPK)激动剂阿卡地新(AICAR)活化AMPK,分为Control组、HG组、HG+AICAR组和HG+二甲基亚砜组。实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法检测ZNF281、EMT和ECM合成相关指标表达水平。结果与Control组相比,HG组ZNF281、波形蛋白(vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(FN)和Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)的蛋白和mRNA表达水平升高,E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平降低;与HG组相比,HG+ZNF281 siRNA组和HG+AICAR组的EMT和ECM合成相关指标的蛋白和mRNA表达水平发生明显变化,同时HG+AICAR组ZNF281的蛋白和mRNA表达水平较HG组降低;在使用AICAR和转染ZNF281过表达质粒共处理的细胞中,AICAR+ZNF281组vimentin、α-SMA、FN、ColⅠ的表达水平较空载组升高,E-cadherin表达水平降低。结论AMPK通过负向调控ZNF281的表达水平进而抑制HG诱导的RTECs中EMT和ECM合成。
- 侯维玲乔云阳吴小芸施会敏曲高婷张爱青
- 关键词：上皮-间质转化细胞外基质肾小管间质纤维化
- 胎龄对早期枸橼酸咖啡因治疗早产儿呼吸暂停的影响被引量：7
- 2019年
- 目的观察不同胎龄呼吸暂停的早产儿早期使用枸橼酸咖啡因的疗效。方法选取胎龄28W-32W的早产儿80例,分为胎龄28W-29W^+6组与胎龄30W - 32W^+6组,每组各40例,2组再随机分别分为早期治疗组20例及常规治疗组20例。早期治疗组即生后2h内给予枸橼酸咖啡因,常规治疗组即出现呼吸暂停症状后给予枸橼酸咖啡因,比较各组患儿治疗后的临床疗效。结果28W-32W^+62组患儿比较,在首次用药时间、用药24h后呼吸暂停发生率、枸橼酸咖啡因干预时间、氧疗时间、无创呼吸机通气时间、机械通气时间、达到全胃肠内营养时间、颅内出血发生率、恢复到出生体重时间、胆汁淤积发生率方面比较,早期治疗组优于常规治疗组,差异有统计学意义(P<0.05)o 28W-32W+62组患儿在性别、胎龄、出生体重、无创呼吸机通气率、心动过速发生率、喂养不耐受发生率方面比较,差异无统计学意义(P>0. 05)。30W-32W^+62组患儿比较早期治疗组机械通气率优于常规治疗组,差异有统计学意义(P <0.05)。不同胎龄的2组早期治疗组比较,在胎龄、出生体重、枸橼酸咖啡因干预时间、氧疗时间、机械通气率及通气时间方面差异有统计学意义(P<0.05).在性别、首次用药时间、用药24 h后呼吸暂停发生率、无创呼吸机通气率、无创呼吸机通气时间、达到全胃肠内营养时间、颅内出血发生率、恢复到出生体重时间、心动过速发生率、喂养不耐受发生率、胆汁淤积发生率方面比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论早期使用枸橼酸咖啡因可降低早产儿呼吸暂停的发生率,减少并发症的发生;且胎龄越小,越早使用枸橼酸咖啡因,可缩短用氧时间、枸橼酸咖啡因的干预时间,降低机械通气率及机械通气的时间,且未见明显的枸橼酸咖啡因不良反应的出现。
- 吴小芸顾昊荣菊潘菲邬薇焦泽霖吴伟玲
- 关键词：早产儿胎龄
- pEGFP-N1-Mxi1-0重组质粒的构建与表达被引量：3
- 2015年
- 目的:构建Max作用蛋白1-0(Max interacting protein1-0,Mxi1-0)的真核表达载体,在小鼠胚胎成纤维细胞(NIH/3T3)中表达,以期为深入研究Mxi1-0的作用及机制奠定基础。方法:通过RT-PCR方法从人肿瘤细胞Hep G2中获得Mxi1-0基因的编码片段,连接至增强绿色荧光蛋白真核表达载体(p EGFP-N1)构建成p EGFP-N1-Mxi1-0。经酶切和测序鉴定重组质粒的正确性;采用脂质体转染技术将重组质粒瞬时转染NIH/3T3细胞,经荧光显微镜观察和Western blot方法检测Mxi1-0表达,免疫荧光法检测Mxi1-0在NIH/3T3细胞内的定位情况。结果:经双酶切和核酸序列测序鉴定证实含Mxi1-0的重组真核表达载体p EGFP-Mxi1-0构建成功。重组质粒瞬时转染NIH/3T3细胞后,检测到Mxi1-0的成功表达,并证实Mxi1-0主要定位于NIH/3T3细胞质中。结论:成功构建了真核表达载体p EGFP-N1-Mxi1-0,并检测到Mxi1-0的表达,实验证明Mxi1-0定位于NIH/3T3细胞质中。
- 胡圳圳李璐吴小芸郑大同吴伟玲
- 关键词：基因表达重组质粒细胞定位小鼠胚胎成纤维细胞
