孟琳琳
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 供职机构：新疆医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金新疆维吾尔自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 重组9型腺相关病毒转染小鼠骨髓间充质干细胞
- 2014年
- 背景:重组9型腺相关病毒对心肌细胞具有良好的亲和力,是目前研究基因治疗心肌梗死的理想载体。目的:观察携带增强型绿色荧光蛋白基因的重组9型腺相关病毒(r AAV9-e GFP)对小鼠骨髓间充质干细胞的转染效率。方法:将携带增强型绿色荧光蛋白基因的重组9型腺相关病毒以不同感染复数(1×105,1×106,1×107)转染体外培养的第4代小鼠骨髓间充质干细胞,并在转染后1-7 d连续用荧光倒置显微镜观察骨髓间充质干细胞中增强型绿色荧光蛋白阳性表达情况,寻找最佳感染条件;采用流式细胞仪检测最佳感染复数下携带增强型绿色荧光蛋白基因的重组9型腺相关病毒对小鼠骨髓间充质干细胞的转染效率。结果与结论:转染后第1天,感染复数为1×107组可见增强型绿色荧光蛋白开始表达,转染后第2天,感染复数为1×105、1×106组开始表达;各组增强型绿色荧光蛋白表达强度随感染复数值的增高而增强,同时增强型绿色荧光蛋白的表达强度随着时间延长而逐渐增强;转染后第5天达到高峰,此时感染复数为1×107组转染效率约8%,结果表明携带增强型绿色荧光蛋白基因的重组9型腺相关病毒对小鼠骨髓间充质干细胞转染效率较低。
- 董硕黄莺马依彤孟琳琳刘芬陈邦党陈小翠
- 关键词：小鼠骨髓间质干细胞转染干细胞骨髓干细胞国家自然科学基金
- 小鼠乳鼠原代心肌细胞的改良培养被引量：4
- 2015年
- 背景:大鼠心肌细胞原代培养技术日渐成熟,但小鼠心肌细胞在同样实验条件下不易获得,而小鼠基因组与人类基因组有更多相似之处,具有更高的研究价值。目的:改进小鼠乳鼠原代心肌细胞的培养方法,得到纯度高、活力强、保持心肌细胞原有结构和功能的心肌细胞。方法:将小鼠心肌组织利用酶消方法分离为单个的心肌细胞,实验步骤中将经典的胰酶、胶原蛋白酶混合酶消法分解开,先用胰酶消化心肌组织,使心肌组织变得松散,再用胶原蛋白酶,作用于细胞间质的胶原纤维,使心肌组织分离为单个的心肌细胞。调整胰酶和Ⅱ型胶原蛋白酶的浓度和作用时间,严格控制试剂p H值和各步骤的温度。结果与结论:心肌细胞在接种24 h后开始贴壁,48 h后可观察到部分心肌细胞出现自主搏动,72 h后彼此形成交联,96 h后可观察到心肌细胞形成细胞簇,并出现一致性搏动。心肌细胞的存活率和纯度均达95%以上。结果证实,实验采用改良方法成功培养出小鼠乳鼠心肌细胞,并且保留心肌细胞的结构和功能,纯度和成活率高,是可行的培养方法。
- 孟琳琳黄莺马依彤刘芬陈邦党陈小翠盖敏涛
- 关键词：小鼠心肌细胞原代细胞培养
- AKT和Wnt11双基因联合小鼠骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死的机制研究
- 孟琳琳黄莺马依彤杨毅宁刘芬陈邦党盖敏涛陈小翠
