彭程
- 作品数:2 被引量:10H指数:2
- 供职机构:安徽中医药大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金安徽省自然科学基金更多>>
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- 新藤黄酸通过Ras/Raf/Erk信号通路诱导肺腺癌A549细胞凋亡的研究被引量:8
- 2016年
- 目的研究新藤黄酸(Gambogenic acid,GNA)诱导A549细胞凋亡的作用,并探讨其可能的分子机制。方法采用噻唑蓝(MTT)法检测0.5,1.0,2.0,4.0,8.0μmol·L^(-1)的GNA作用于A549细胞24 h后细胞的增殖情况;采用Hoechst 33342和Annexin V-FITC/PI染色法,于荧光显微镜下观察1.25,2.5,5.0μmol·L^(-1)的GNA作用细胞24 h后的凋亡形态;流式细胞仪检测1.25,2.5,5.0μmol·L^(-1)的GNA作用细胞24 h后的凋亡率;Western Blot法检测1.25,2.5,5.0μmol·L^(-1)的GNA处理细胞24 h后,Ras、Raf、Erk和p-Erk的表达。结果GNA能够显著降低A549细胞的活力,并呈浓度依赖性抑制细胞增殖,24 h的IC50为2.507μmol·L^(-1);Hoechst33342和AV/PI染色后,于荧光显微镜下观察发现,细胞显示明显的凋亡特征;流式细胞仪检测结果表明,随着GNA浓度的升高,细胞的凋亡比率逐渐上升;Western Blot法检测显示GNA能够抑制Ras、Raf、p-Erk1/2蛋白的表达。结论 GNA能够诱导A549细胞凋亡,其作用可能与通过调控Ras/Raf/Erk信号通路有关。
- 彭程孙美灵苏婧婧李庆林
- 关键词:新藤黄酸A549细胞凋亡肺癌
- 新藤黄酸与细胞外信号调节激酶抑制剂PD98059联合应用对肺腺癌A549细胞生长的影响被引量:2
- 2012年
- 目的研究新藤黄酸(Gambogenic acid,GNA)与细胞外信号调节激酶(extracellular signal regulatedkinase,ERK)特异性抑制剂PD98059联合应用对肺腺癌A549细胞生长的影响。方法新藤黄酸与ERK特异性抑制剂PD98059处理肺腺癌A549细胞,倒置显微镜观察细胞形态变化;甲基噻唑基四唑(methyl th-iazolyl tetrazolium,MTT)法检测细胞存活率;流式细胞仪检测细胞内活性氧的变化;蛋白印迹法(Westernblot)检测ERK、p-ERK蛋白的表达。结果 MTT法结果表明GNA在2.5μmol/L对肺腺癌A549细胞的增殖有抑制作用;与PD98059合用24h,GNA的抑制作用更加明显。倒置显微镜观察显示GNA作用肺腺癌A549细胞24h后,细胞固缩变圆,体积变小,部分细胞呈半贴壁状态;GNA和抑制剂PD98059合用后,多数细胞固缩变圆,脱落,并悬浮于培养液中;少数细胞体积增大、肿胀、破裂呈坏死状。流式细胞仪检测结果表明,20μmol/L PD98059+2.5μmol/L GNA共同作用于A549细胞24h后,与GNA 2.5μmol/L组比较细胞内活性氧生成增加。Western blot法检测表明,PD98059和GNA联合作用A549细胞24h后,p-ERK蛋白表达与GNA组比较显著降低。结论 GNA能诱导肺腺癌A549细胞凋亡,联合应用ERK抑制剂PD98059后可减少ERK蛋白的活化,增加肺腺癌A549细胞的凋亡;结果初步表明GNA诱导肺腺癌A549细胞的凋亡可能与调节ERK信号通路有关。
- 彭程苏婧婧程卉李庆林
- 关键词:新藤黄酸A549细胞细胞凋亡