李斗林
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 马尾松毛虫质型多角体病毒多角体蛋白基因的表达与定位
- 2006年
- 为了表达马尾松毛虫质型多角体病毒(DpCPV)多角体蛋白基因(S10片段)并探讨多角体蛋白在真核细胞中的定位,从DpCPV中分离出S10,与pET-28a载体连接成重组表达质粒pET28-S10;将S10克隆到杆状病毒转座载体pFASTBACHTb中,依次筛选出重组转座质粒pFASTBACS10,重组穿梭质粒BacmidS10,重组杆状病毒AcS10。多角体蛋白基因表达后,用SDS-PAGE、Western-blot和免疫荧光技术对表达产物进行了检测。结果表明:S10原核表达质粒、重组杆状病毒成功获得;在昆虫细胞中表达的质型多角体蛋白主要定位于细胞质,同时有少量产物定位于细胞核。
- 李斗林李艳秋张珈敏杨波陈伍国周伟东胡远扬
- 关键词：马尾松毛虫质型多角体病毒多角体蛋白基因
- 黑胸大蠊浓核病毒ns1基因的功能研究
- 从病毒感染的黑胸大蠊病虫虫体中提取总RNA,以特异性引物进行RT-PCR, 得到非结构蛋白NS1全长eDNA。将其N末端与麦芽糖结合蛋白(MBP)融合后, 利用杆状病毒表达载体在Sf9细胞中进行高效表达。表达蛋白经麦芽糖...
- 杨波张珈敏蔡大威李斗林陈伍国蒋洪胡远扬
- 文献传递
- 黑胸大蠊浓核病毒磷脂酶A_2功能区的克隆及其表达被引量：3
- 2006年
- 通过RT-PCR扩增获得PfDNV结构蛋白基因VP1含磷脂酶A2(PLA2)功能区片段,将其连接到pMD18-T载体上并亚克隆到原核表达载体pET28a和pET26b,构建阅读框架正确的重组表达载体pET28a-PLA和pET26b-PLA,转化大肠杆菌BL21-codonplus(DE3)-RIL,经IPTG诱导,SDS-PAGE显示得到了目的融合蛋白,以抗组氨酸的单克隆抗体对经Ni-NTA亲和层析柱纯化的目的蛋白进行了westernblot鉴定,结果表明成功表达PfDNV结构蛋白PLA2,对于研究该酶的生物学特性及其在病毒对细胞侵染过程中的功能奠定了基础。
- 俞海洋张珈敏杨波蒋洪周亮卢杰陈伍国李斗林胡远扬
- 关键词：磷脂酶A2原核表达
- 黑胸大蠊浓核病毒ns1基因的功能研究
- 从病毒感染的黑胸大蠊病虫虫体中提取总RNA,以特异性引物进行RT-PCR, 得到非结构蛋白NS1全长cDNA。将其N末端与麦芽糖结合蛋白(MBP)融合后, 利用杆状病毒表达载体在Sf9细胞中进行高效表达。表达蛋白经麦芽糖...
- 杨波张珈敏蔡大威李斗林陈伍国蒋洪胡远扬
- 文献传递
