李翔
- 作品数:3 被引量:10H指数:2
- 供职机构:新疆农业大学农学院农业生物技术重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 棉花GbCBF2基因的克隆、互补表达载体的构建及遗传转化被引量:3
- 2016年
- 为研究棉花CBF2基因在植物抗逆中的作用,构建了p CAMBIA1300-At CBF2P-Gb CBF2-At CBF2T植物互补表达载体,并对拟南芥cbf2突变体进行遗传转化。以新海16 c DNA为材料,采用PCR的方法克隆4个棉花CBF2基因,同时克隆拟南芥CBF2基因启动子At CBF2P和终止子At CBF2T,并将这些基因与p Bluescript SK载体连接,构建p Bluescript SK-At CBF2P-Gb CBF2-At CBF2T中间过渡载体,用SacⅠ和Bam HⅠ双酶切中间载体,获得At CBF2P-Gb CBF2-At CBF2T核心片段,将此片段插入到p CAMBIA1300表达载体中,构建p CAMBIA1300-At CBF2P-Gb CBF2-At CBF2T植物互补表达载体。以拟南芥cbf2突变体为材料,采用农杆菌介导的方法进行遗传转化,获得转棉花CBF2基因群体。获得转基因株系后,将为筛选出棉花的CBF2抗冻负调控基因及棉花抗逆分子育种奠定基础。
- 孔丽颖李翔李才运刘晓东李月
- 关键词:棉花
- 海岛棉GbCBF6基因克隆及其在逆境胁迫下的表达分析被引量:2
- 2015年
- 该研究根据棉花生物信息数据库,采用PCR方法从棉花(Gossypium barbadense L.)中克隆了1个CBF/DREB转录因子基因,命名为GbCBF6(GenBank登录号为KR233255)。GbCBF6基因开放阅读框为753bp,编码251个氨基酸,预测分子量为27.82kD,等电点为7.68。氨基酸多重序列比对结果表明,GbCBF6基因编码的蛋白与其他植物冷胁迫相关的CBF蛋白具有高度的同源性,含有1个AP2功能结构域和2个特征序列基序;与棉花已经克隆的4个GhCBF基因的氨基酸序列差异较大,是1个新的棉花CBF基因。系统进化树分析表明,GbCBF6基因属于DREB亚家族中的A-1亚组。RT-PCR分析表明,GbCBF6基因表达受干旱胁迫下调,而受4℃低温上调,在高盐(200mmol/L NaCl)处理下其表达量先下降,后增加。推测GbCBF6基因在棉花非生物胁迫的调控中起重要作用。
- 李月孔丽颖李才运李翔代培红刘晓东
- 关键词:冷胁迫克隆表达
- 海岛棉5个CBF/DREB基因的克隆与表达分析被引量:8
- 2016年
- 低温、干旱和盐渍是影响作物生长、产量和全球地理分布的重要非生物胁迫。CBF/DREB转录因子是参与植物非生物胁迫应答反应的重要调控蛋白。为了更好地了解棉花CBF家族基因,通过生物信息学的方法,从海岛棉中克隆了5个具有完整开放阅读框的CBF基因,命名为Gb CBF1―Gb CBF5。这5个基因编码的蛋白与其他植物冷胁迫相关的CBF蛋白具有高度的保守性,含有1个AP2功能结构域和2个特征基序。系统进化树分析表明,这5个基因与拟南芥的3个参与冷胁迫的CBF基因一起聚类在DREB亚家族中的A-1亚组。通过RT-PCR的方法分析了海岛棉基因Gb CBF1―5在高盐(200 mmol·L-1 Na Cl)、干旱、4℃低温等非生物胁迫处理下的表达模式。结果表明其中2个基因在冷胁迫下上调表达,5个基因在干旱和盐处理下均下调表达。这些为进一步探索CBF基因在棉花逆境胁迫应激反应中的作用提供了有价值的信息。
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- 关键词:棉花海岛棉基因克隆基因表达调控冷胁迫