王建秋
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：杭州师范大学医学院更多>>
- 发文基金：浙江省教育厅科研计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 乏氧对人口腔鳞状细胞癌细胞中叉头蛋白P3表达的影响及其机制被引量：1
- 2017年
- 目的:观察乏氧对人口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞中叉头蛋白P3(FOXP3)表达的影响,阐明乏氧调控FOXP3表达的表观遗传学机制。方法:选取人OSCC细胞株FaDu和OECM-1细胞,常氧和乏氧条件下培养18h。采用实时定量PCR方法检测细胞中FOXP3mRNA的相对表达水平,Western blotting法检测FaDu和OECM-1细胞中FoxP3蛋白表达水平,染色质免疫沉淀-定量PCR(ChIP-qPCR)法检测FOXP3基因启动子上组蛋白修饰H3K4乙酰化(H3K4ac)、H3K4三甲基化(H3K4me3)和H3K27三甲基化(H3K27me3)水平。采用组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)基因沉默的FaDu细胞,以实时定量PCR和ChIP-qPCR法检测FaDu细胞中HDA3mRNA相对表达水平和FOXP3mTNA表达抑制率。结果:与常氧条件比较,乏氧条件下FaDu和OECM-1细胞中FOXP3 mRNA相对表达水平均明显降低,分别下降65.6%(P<0.01)和75.7%(P<0.01);Western blotting检测,乏氧条件下FaDu和OECM-1细胞中FOXP3蛋白表达水平明显低于常氧条件下;染色质免疫沉淀实验,与常氧条件比较,乏氧条件下FaDu细胞中FOXP3基因启动子上的H3K4ac和H3K4me3水平明显降低(P<0.01),而H3K27me3水平无明显差异。与无HDAC3基因沉默的FaDu细胞比较,HDAC3基因沉默的FaDu细胞中缺氧诱导的FOXP3启动子上H3K4ac和H3K4me3表达抑制率明显降低(P<0.05),缺氧诱导的FOXP3mRNA相对表达抑制率降低(P<0.05)。结论:乏氧可通过HDAC3介导的FOXP3基因启动子上H3K4ac水平下调而抑制OSCC细胞中FOXP3的表达。
- 闫风琴范如意王方正王磊叶智敏傅真富王建秋
- 关键词：乏氧口腔肿瘤鳞状细胞组蛋白修饰
- 乏氧激活人口腔鳞癌细胞DKKL1的表达被引量：1
- 2016年
- 目的探讨常氧和乏氧条件下人口腔鳞癌细胞Dickkopf样蛋白-1(DKKL1)的表达及可能的表观遗传学机制。方法取对数生长期人口腔鳞癌SAS细胞和OECM-1细胞,常氧或乏氧(1.0%O2)条件下培养18 h,采用实时荧光定量PCR方法检测DKKL1 mRNA水平的表达,采用Western印迹方法检测其蛋白水平的表达;进一步采用染色质免疫沉淀(Ch IP)方法检测DKKL1基因启动子上H3K4乙酰化(H3K4ac)和二甲基化(H3K4me2)水平的变化。结果与常氧条件下相比,乏氧使DKKL1在SAS和OECM-1两种口腔鳞癌细胞中的表达均显著升高,其mRNA水平分别为常氧条件下的(4.0±0.4)倍(P<0.01)和(2.4±0.1)倍(P<0.01);Ch IP结果显示,乏氧增加了DKKL1基因启动子上H3K4ac水平,降低了H3K4me2水平。结论乏氧可激活口腔鳞癌细胞DKKL1的表达,该作用可能与乏氧调节DKKL1基因启动子上组蛋白H3K4的乙酰化和二甲基化修饰有关。
- 王建秋范如意谢其洋闫风琴
- 关键词：口腔鳞癌乏氧组蛋白修饰
