范会瑜
- 作品数：3 被引量：6H指数：1
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- 荧光分光光度法测定大黄中游离蒽醌的含量被引量：5
- 2007年
- 目的采用荧光分光光度法，建立了大黄中游离蒽醌类成分含量测定的方法。方法以丙酮为溶剂，在hex=460nnq和kern=540nnq处测定荧光强度。结果测得游离蒽醌含量在o．25～3．oμg／ml范围内呈良好的线性关系，线性回归方程为F=122．81C＋46．224（r=0．9996），最低检测限为0．25μg／ml，表明该法灵敏度高、重现性较好，且操作简便。结论该研究为测量大黄中活性成分游离蒽醌提供了一种有效可靠的分析方法。
- 王佩琪承伟郭兴杰范会瑜
- 关键词：游离蒽醌荧光分光光度法
- 维甲酸抑制甲状腺鳞癌细胞株生长增殖作用机制的探讨被引量：1
- 2009年
- 目的观察9-顺维甲酸(9-cis-RA)对甲状腺鳞癌SW579细胞株生长增殖及维甲酸受体β(RARβ)和p21表达的影响,进而探讨维甲酸的抗癌作用机制。方法将甲状腺鳞癌细胞株SW579分为对照组和实验组。实验组加入不同浓度的9-cis-RA,使其终浓度分别为1×10-7mol/L、5×10-7mol/L、1×10-6mol/L、5×10-6mol/L、1×10-5mol/L,各组细胞均在培养24 h后加药,继续培养48 h。在倒置显微镜下观察细胞生长情况及形态变化;采用MTT比色法测定细胞增殖活性;流式细胞仪检测细胞周期;用RT-PCR方法检测SW579细胞RARβ及p21mRNA的表达。结果低浓度9-cis-RA组(1×10-7mol/L、5×10-7mol/L、1×10-6mol/L)肿瘤细胞有向良性细胞形态转化的趋势;高浓度组(5×10-6mol/L、1×10-5mol/L)细胞生长密度较对照组明显降低,与低浓度组相比,向成熟分化的趋势不明显。MTT结果显示,实验组细胞均出现显著的生长抑制作用,且呈剂量依赖性。流式细胞仪分析,实验组随着9-cis-RA的升高,S期细胞在细胞周期中所占比例逐渐减少,G1期细胞则明显增加(P<0.01),细胞滞留在G1期。RT-PCR检测结果表明,经不同浓度维甲酸处理的各组细胞RARβ和p21 mRNA表达水平均显著上调。结论9-顺维甲酸在一定浓度范围内对甲状腺鳞癌细胞株SW579有剂量依赖性的增殖抑制作用,其机制可能与提高SW579细胞RARβ基因的表达,进而再上调p21的表达有关。
- 范会瑜肖建英李男崔明宇王翠瑶申静林徐华陈景清
- 关键词：9-顺维甲酸甲状腺鳞癌P21
- 小鼠截短型CDC25B蛋白PKA体外磷酸化分析
- 2012年
- 目的通过体外磷酸化研究和放射自显影技术证实小鼠CDC25B蛋白是蛋白激酶A(PKA)的直接作用底物。方法构建小鼠截短型pGEX-4T-2-CDC25B201原核表达载体,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,glutathione Sepharose 4B亲和层析纯化CDC25B蛋白,与PKA进行体外磷酸化反应,分别采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白免疫印迹(western blot)和放射自显影鉴定CDC25B是否为PKA直接磷酸化底物。结果在E.coli BL21细胞内,采用0.1 mmol/L的IPTG在27℃条件下诱导表达3 h即可达到较高表达水平;SDS-PAGE显示在约50 kD处有明显GST-CDC25B201融合蛋白特异条带;放射自显影显示GST-CDC25B201融合蛋白的磷酸化条带大约位于55 kD处;Western blot分析,在重组质粒表达的总蛋白、载体表达的GST蛋白、纯化蛋白及磷酸化蛋白的相应位置均出现GST抗体的杂交条带。结论小鼠CDC25B蛋白是PKA的直接作用底物。
- 肖建英范会瑜刘超张哲宗志红于秉治
- 关键词：小鼠CDC25BPKA
