赵长宏
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- 相关领域：生物学更多>>
- HEK293细胞中CDK10蛋白复合体的分离纯化被引量：1
- 2013年
- 通过半定量RT-PCR(reverse transcriptase PCR)检测了CDK10在人胚胎肾细胞(HEK293)、人宫颈癌细胞(HeLa)、人乳腺癌细胞(MCF7)中的表达水平,克隆并构建了全长CDK10基因的真核表达质粒.在HEK293中筛选得到了稳定表达CDK10-Flag的细胞系,大规模培养该细胞系,分离细胞核、细胞质提取物,在非变性条件下利用anti-Flag抗体免疫共沉淀(Immunoprecipitation,IP),银染及蛋白质免疫印迹检测结果表明分离到CDK10蛋白及与其可能结合的其它蛋白,为质谱(Mass Spectrum,MS)鉴定提供材料.
- 赵长宏陈斌吴传芳欧阳劲秦岭
- 关键词：蛋白纯化银染
- 蛋白激酶C对转录延伸正调节因子b(P-TEFb)的影响被引量：1
- 2011年
- 本文探讨了PKC的4种亚型α、βⅡ、γ和λ对P-TEFb各蛋白组分的表达影响.成功构建了带有HA标签的pcDNA3.1-PKC的各亚型真核表达载体,并转染HEK293细胞株,用Western bolt检测其表达情况,发现这四种PKC亚型在细胞中表达良好。将PKCβⅡ或者PKCλ转染进入HEK293细胞株,发现其可使CDK9和Cyclin T蛋白表达量升高;但在细胞中高表达PKCα和PKCγ,对P-TEFb各组分表达量没有影响.表明PKC可通过提高P-TEFb的组分表达量,从而上调某些基因的表达.
- 任浙丹黄迎彬杨洁赵长宏田平平吴传芳
- 关键词：转录调控
