张晓键
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
- 供职机构：中南大学资源加工与生物工程学院更多>>
- 发文基金：高等学校全国优秀博士学位论文作者专项资金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 嗜酸氧化亚铁硫杆菌APS还原酶的表达、纯化及其性质鉴定被引量：3
- 2009年
- 嗜酸氧化亚铁硫杆菌(Acidithiobacillus ferrooxidans)中APS还原酶是硫同化途径的一个关键酶,其对硫酸盐的还原及硫化物的氧化具有重要调节作用。本文以A.ferrooxidans ATCC23270基因组为模板,通过PCR扩增得到编码APS还原酶的cysH基因,与原核表达载体pLM1构建重组体,转化入大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)DH5α中,测序正确后,加IPTG诱导表达,用一步亲和层析法纯化出浓度和纯度都较高的APS还原酶。由蛋白颜色和紫外分析,确定其含有一个[Fe4S4]簇作为活性中心。表达产物进行SDS-PAGE分析,证实分子量为28kD。酶活测定表明其具有将APS还原为亚硫酸盐跟AMP的功能。
- 郑春丽张燕飞吴安娜戴云杰张晓键柳建设
- 关键词：嗜酸氧化亚铁硫杆菌克隆纯化
