张永梅
- 作品数:5 被引量:7H指数:2
- 供职机构:内蒙古医科大学附属医院更多>>
- 发文基金:内蒙古自治区自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 小鼠14-3-3ε蛋白基因的克隆及其真核表达载体的构建被引量:1
- 2015年
- 目的构建小鼠14-3-3ε真核表达载体pcDNA3.1-ZEO-HA-14-3-3ε,并观察其在真核细胞中的表达。方法通过反转录-聚合酶链反应从小鼠肝组织中获得编码14-3-3ε的cDNA,定向克隆至真核表达载体pcDNA3.1-ZEO(+)中,经酶切和测序鉴定正确后,应用脂质体转染HEK293细胞,并通过蛋白免疫印迹检测细胞内14-3-3ε的表达。结果构建了真核表达载体pcDNA3.1-ZEO-HA-14-3-3ε,将其转染HEK293细胞48h后,蛋白免疫印迹检测到细胞内14-3-3ε的表达。结论成功构建了真核表达载体pcDNA3.1-ZEO-HA-14-3-3ε,为研究14-3-3ε在小鼠卵母细胞和小鼠-细胞受精卵G2/M转换中作用的研究奠定了基础。
- 孟峻侯艳军唐韬张永梅刘珊刘洋呼格吉乐
- 关键词:HEK293细胞真核表达载体
- PCT,CRP,ESR联合检测在儿童呼吸道感染性疾病中的应用被引量:1
- 2014年
- 目的探讨降钙素原、C反应蛋白、血沉在儿童呼吸道感染疾病诊断及疗效观察的应用价值。方法选取我院2012冬季11月至2013年1月期间50例需要住院治疗的呼吸道感染的儿童做为病例组,同时选取同期门诊正常体检儿童43例做为对照组,检测降钙素原、C反应蛋白、血沉三项指标并比较两组之间的差异。结果病例组降钙素原、C反应蛋白、血沉值明显高于对照组,组间比较有统计学意义。讨论降钙素原、C反应蛋白、血沉三项指标可以联合检测用于辅助诊断儿童呼吸道疾病。
- 张永梅韩笑张彩虹王美英刘洋
- 关键词:降钙素原C反应蛋白血沉
- 14-3-3ε和Cdc25B在小鼠卵母细胞生发泡期阻滞中的作用被引量:4
- 2016年
- 目的:研究14-3-3ε和Cdc25B对小鼠卵母细胞生发泡(GV)期阻滞作用的影响,为阐明蛋白激酶A/Cdc25B/14-3-3ε通路在小鼠卵母细胞GV期阻滞中发育调控机制奠定基础。方法:在体外将表达载体pcDNA3.1-ZEO-HA14-3-3ε、pcDNA3.1-MYC-Cdc25B-WT、pcDNA3.1-MYC-Cdc25B-S321A和pcDNA3.1-MYC-Cdc25B-S321D转录成mRNA。超排卵方法获得小鼠GV期卵母细胞,实验分为未注射组、TE缓冲液注射组、14-3-3εmRNA单独注射组、14-3-3εmRNA+Cdc25B-WT(野生型)mRNA共注射组、14-3-3εmRNA+Cdc25B-S321D(模拟磷酸化型)mRNA共注射组、14-3-3εmRNA+Cdc25B-S321A(突变型)mRNA共注射组,收集各组母卵细胞后采用Western blotting法检测外源性14-3-3ε和Cdc25B蛋白表达及Cdc2-Tyr15的磷酸化状态;相差显微镜观察卵母细胞的形态学变化并计数生发泡破裂(GVBD)率。结果:未注射组、TE缓冲液注射组、14-3-3εmRNA单独注射组、14-3-3εmRNA+Cdc25B-WT(野生型)mRNA共注射组、14-3-3εmRNA+Cdc25B-S321D(模拟磷酸化型)mRNA共注射组在显微注射后20h均未发生GVBD(P>0.05);14-3-3εmRNA+Cdc25B-S321A(突变型)mRNA共注射组在显微注射后1、2和3h卵母细胞的GVBD率分别为(5.00±0.68)%、(62.00±3.56)%和(100.00±0.00)%,显微注射后20h到达第2次减数分裂中期(MII)的比例为(79.00±2.80)%,与未注射组和TE缓冲液注射组比较,GVBD率和到达MII的比例均显著升高(P<0.01)。结论:14-3-3ε通过Cdc25B的321位丝氨酸磷酸化和脱磷酸化调控卵母细胞由GV期向GVBD的过渡。
- 孟峻侯艳军张永梅呼格吉乐韩艳秋
- 关键词:CDC25B卵母细胞显微注射
- 浅谈实验室与临床交流沟通
- 2012年
- 随着分子生物学、物理、化学、计算机技术等学科不断融入到医学领域,使检验医学实现了微量化、自动化,许多新技术、新方法在临床开展,为临床提供了诸多数据和信息,检验医学也成为了发展最快的医学专业之一。据统计,近年来新检验项目增加了100%-200%,临床医生在诊断中对检验依赖度增加了50%-80%[1]。检验项目复杂化与多样化,使实验室需要加强与临床的交流与沟通,将实验数据转化成有效的医疗信息传递给临床医生;同时临床医生更需要实验室工作人员的参与和帮助,解释实验结果,合理的利用新项目和新技术等。检验医师就是连接实验室与临床医生的桥梁。
- 王永祥张永梅
- 关键词:检验医师沟通
- 小鼠卵母细胞中14-3-3蛋白亚型的表达被引量:2
- 2015年
- 目的对小鼠卵母细胞生发泡期(GV)、生发泡破裂期(GVBD)的14-3-3蛋白亚型表达进行鉴定。方法RT-PCR法检测GV、GVBD期卵母细胞中14-3-3蛋白7个亚型的mRNA水平,蛋白免疫印迹(Western blotting)法检测其蛋白表达水平。结果检测了7个14-3-3亚型(β,γ,ε,σ,ζ,τ和η)mRNA的表达水平,结果显示,在GV期只有14-3-3β和14-3-3ε两个亚型表达,并且14-3-3εmRNA水平显著高于14-3-3β(P<0.01)。在蛋白水平上,在小鼠卵母细胞GV期和GVBD期均检测到14-3-3ε亚型蛋白表达,未检测到14-3-3β蛋白表达。结论 14-3-3蛋白ε亚型在小鼠卵母细胞GV、GVBD期均稳定表达。
- 孟峻侯艳军张永梅呼格吉乐刘洋宿瑞俊
- 关键词:卵母细胞